Wieloraki zintegrowany model stresu społecznego dla zaburzeń psychicznych u samic myszy C57BL/6J

Badania te mają na celu zrozumienie, w jaki sposób przewlekły stres społeczny prowadzi do objawów psychiatrycznych u samic myszy poprzez ustanowienie wielozintegrowanego modelu stresu społecznego. Większość dostępnych obecnie modeli zaburzeń psychicznych została opracowana przy użyciu samców zwierząt. Protokół ten wprowadza nowy model myszy przeznaczony do badania tych zaburzeń u samic myszy. W ramach tego badania opracowano wiarygodny model zwierzęcy, który pozwala nam zbadać mechanizmy neurofizjologiczne leżące u podstaw zaburzeń psychicznych u samic myszy.

[Narrator] Na początek umieść 10-centymetrową rurkę akrylową o średnicy wewnętrznej 26 milimetrów w każdej klatce samic myszy i kandydatów na zwycięzców, aby umożliwić im aklimatyzację i nauczenie się przechodzenia przez nią przez trzy dni. Aby wytresować myszy do zawodów w rurce, delikatnie chwyć ogon każdej myszy i połóż go na stole. Następnie przytrzymaj mysz za ogon i umieść ją na jednym końcu rurki. Zwolnij ogon, gdy mysz wejdzie do rurki i pozwól jej dobrowolnie przejść. Teraz umieść mysz na przeciwległym końcu rurki i powtórz tę samą procedurę. Po powtórzeniu całego procesu jeszcze raz przywróć mysz do jej klatki domowej. Aby przeprowadzić selekcję zwycięzców, przygotuj rurkę akrylową o długości 30 centymetrów i średnicy wewnętrznej 26 milimetrów i narysuj na niej widoczną środkową linię. Chwyć obie myszy kandydujące na zwycięzcę za ogony i umieść je na przeciwległych końcach rurki. Pozwól im wejść i spotkać się w punkcie środkowym, a następnie jednocześnie zwolnij je i uruchom stoper. Zidentyfikuj zwycięzcę jako mysz, która wypycha drugą z rurki i przyznaj jej jeden punkt. Umieść obie myszy z powrotem w ich klatce domowej. Uszereguj myszy na podstawie ich łącznych wyników. W celu przesiewania agresora CD1 umieść samca myszy C57 bezpośrednio w klatce domowej samca CD1 na trzy minuty. Zapisz opóźnienie do pierwszego ataku, liczbę ataków i czas trwania agresywnych zachowań w ciągu trzech minut jako wskaźniki agresywności i powtórz procedurę przesiewową przez dwa dodatkowe dni. W przypadku niepowodzenia konkurencji społecznej umieść mysz z wieloma zintegrowanymi stresami społecznymi lub myszą MISS i mysz zwycięzcę na przeciwległych końcach rury, tak aby szli do przodu i spotykali się w punkcie środkowym. Mysz MISS zostanie wypchnięta z tuby przez zwycięzcę. Zamień pozycje dwóch myszy i powtórz interakcję. Następnie przywróć zarówno myszy, jak i zwycięzcę do ich domowych klatek. W celu zmodyfikowanego modelowania stresu zastępczej porażki społecznej umieść samicę myszy MISS w klatce agresora CD1, zamkniętej pod perforowaną akrylową osłoną, aby umożliwić zastępczą obserwację agresywnych interakcji. Wprowadź samca myszy intruza C57 do klatki, aby był fizycznie atakowany przez mysz CD1 przez 10 minut. Po 10 minutach usuń męskiego intruza i pozwól samicy myszy MISS i dodatkowym pięciu minutom na ekspozycję sensoryczną myszy CD1. Po pięciu minutach zastąp mysz CD1 nową myszą intruzową C57 i powtórz całą procedurę trzy razy. Następnie przywróć mysz MISS do jej klatki domowej. Następnie, aby modelować nieuniknione naprężenie związane z przeludnieniem, umieść nieprzezroczysty rękaw w standardowej klatce zawierającej ściółkę. Wprowadź 12 do 15 samic myszy, wszystkie myszy MISS lub zmieszane z innymi samicami do rękawa przez 30 minut dziennie. W przypadku izolacji społecznej myszy MISS należy trzymać indywidualnie, gdy nie doświadczają one niepowodzenia w konkurencji społecznej, stresu związanego z porażką zastępczą lub stresu związanego z przeludnieniem przez pozostałą część 10-dniowego okresu modelowania. Test preferencji sacharozy, który ocenia anhedonię poprzez pomiar preferencji dla słodkiego roztworu nad wodą, wykazał, że preferencja sacharozy była znacznie niższa u myszy narażonych na MISS w porównaniu z wcześniejszymi kontrolami. Całkowite spożycie płynów w teście preferencji sacharozy, w tym zarówno wody, jak i sacharozy, nie różniło się znacząco między MISS a myszami naiwnymi, co wskazuje, że zmniejszona preferencja sacharozy nie była spowodowana zmienionym spożyciem płynów. Test zawieszenia ogona, który ocenia rozpacz behawioralną poprzez pomiar biernego bezruchu, ujawnił, że myszy narażone na MISS miały znacznie dłuższy czas unieruchomienia niż myszy naiwne. Ponadto test otwartego pola używany do oceny lęku poprzez pomiar czasu spędzonego w centrum otwartej areny wykazał, że myszy narażone na MISS spędzały znacznie mniej czasu w strefie centralnej w porównaniu z myszami naiwnymi. Podwyższony labirynt plus, który mierzy lęk poprzez unikanie otwartych ramion, wykazał, że myszy narażone na MISS spędzały znacznie mniej czasu w otwartych ramionach niż naiwne grupy kontrolne.