Badanie przewlekłej ekspozycji myszy na promieniowanie ultrafioletowe B

Badamy ogólnoustrojowe skutki ekspozycji skóry na niskie dawki promieniowania UVB, szczególnie na poziomach poniżej tych, które powodują rumień. Nasz protokół pozwoli zrozumieć ogólnoustrojowe skutki ekspozycji na niskie dawki promieniowania UVB, wykraczające poza bezpośrednie lub miejscowe skutki dla skóry. Nasza metoda ściśle naśladuje przewlekłą ekspozycję na promieniowanie UVB o niskim stopniu nasilenia poniżej poziomu rumienia. Dzięki temu jesteśmy w stanie badać endogenne skutki UVB.

[Narrator] Na początek umieść znieczuloną mysz na platformie roboczej i ogol od 50 do 60% jej grzbietu. Po usunięciu sierści za pomocą kremu do depilacji, umieść mysz w czystej, suchej klatce regeneracyjnej z ściółką klatkową. Pozwól myszy odpocząć w klatce domowej z jedzeniem ad libitum i wodą. Na początek załóż koszulę z długimi rękawami, spodnie, fartuch laboratoryjny, zamknięte buty, podwójne rękawiczki i osłonę twarzy, aby zapewnić bezpieczeństwo osobiste. Wykonaj naświetlanie ultrafioletem B wewnątrz okapu biologicznego z opuszczoną 10-milimetrową osłoną z pleksiglasu i założonym ekranem ochronnym. Umieść lampę ultrafioletową B na przezroczystej komorze z pleksi. Włącz lampę ultrafioletową B i pozwól jej działać, aż intensywność się ustabilizuje. Następnie włącz radiometr Ultraviolet X, wyposażony w głowicę pomiarową Ultraviolet B do monitorowania intensywności. Umieść oczyszczoną komorę ekspozycyjną w przezroczystej komorze z pleksiglasu z dwiema komorami, gdy lampa ultrafioletowa jest włączona lub wyłączona dla odpowiednich ekspozycji w ultrafiolecie lub udawanej. Użyj kalkulatora, aby określić wymagany czas wystawienia myszy na działanie pożądanej intensywności ultrafioletu B. Przenieś mysz z klatki domowej do komory ekspozycyjnej na żądany czas ekspozycji. Wystaw mysz na działanie dawki ultrafioletu B wynoszącej 50 milidżuli na centymetr kwadratowy, co jest dawką suberytematyczną. Aby sprawdzić skuteczność promieniowania, zmierz pigmentację ucha i ogona za pomocą spektrofotometru skórnego. Skalibruj spektrofotometr, ustawiając linię bazową na czystym, zwykłym białym papierze. Po zakończeniu kalibracji umieść czujnik pomiarowy na uchu lub ogonie myszy i zapisz odczyty intensywności melaniny. Stopniowy i znaczący wzrost poziomu melaniny zaobserwowano zarówno u samców, jak i samic myszy wystawionych na promieniowanie ultrafioletowe B w ciągu czterech tygodni w porównaniu z grupą kontrolną, potwierdzając skuteczną indukcję pigmentacji skóry.