Subskrypcja JoVE jest wymagana do oglądania tego materiału. Zaloguj się lub rozpocznij bezpłatny okres próbny.

Artykuł metodologiczny

Ustalenie mysiego modelu powierzchownego raka pęcherza moczowego za pomocą techniki dopęcherzowego podawania komórek

1.1K wyświetleń

⸱

DOI:

10.3791/67402

⸱

18 października 2024

 ,  ,  ,  , 

W tym artykule

Podsumowanie

Ten protokół opisuje unikalną metodę konstruowania ortotopowego modelu powierzchownego raka pęcherza moczowego.

Streszczenie

To badanie przedstawia innowacyjną metodę tworzenia ortotopowego modelu guza mysiego pęcherza moczowego o wysokiej skuteczności i precyzyjnej lokalizacji guza. Po znieczuleniu samic myszy C57BL/6J w pozycji leżącej, do pęcherza wprowadza się igłę dożylną o sile 24 G w celu usunięcia jej zawartości. Następnie przez cewnik wprowadza się igłę dozującą o wadze 34 G, obraca się ją pięć razy, aby spowodować ogniskowe uszkodzenie błony śluzowej kopuły pęcherza moczowego, a następnie usuwa. Zawiesina komórek MB49 jest zasysana i podłączana do igły dozującej 30 G, która jest wprowadzana do pęcherza moczowego za pośrednictwem cewnika. Komórki nowotworowe są wstrzykiwane podśluzówkowo do pęcherza moczowego pod ciśnieniem. Ta technika powoduje minimalny uraz myszy, wysoki wskaźnik wchłaniania guza i stałą lokalizację guza. Charakteryzuje się prostotą i doskonałą powtarzalnością. Model ten stanowi idealną platformę eksperymentalną do opracowywania dopęcherzowych terapii raka pęcherza moczowego, ułatwiając postęp i optymalizację strategii leczenia tego nowotworu.

Wprowadzenie

Rak pęcherza moczowego stanowi znaczące globalne obciążenie zdrowotne, z zauważalnymi różnicami w występowaniu i rokowaniach w zależności od płci. Ten nowotwór złośliwy charakteryzuje się odrębnymi podtypami molekularnymi, z których każdy jest związany z różnymi szlakami patogennymi. Cechy molekularne i patologiczne różnią się znacznie między nieinwazyjnym rakiem pęcherza moczowego (NMIBC) a inwazyjnym rakiem pęcherza moczowego (MIBC)1,2. NMIBC stanowi około 75% przypadków, w tym guzy pochodzenia nabłonkowego przejściowego, które pozostają zlokalizowane bez przerzutów lub rozprzestrzeniania się. I odwrotnie, M....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Protokół

Wszystkie protokoły i procedury eksperymentalne na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Komitet ds. Oceny Etycznej ds. Eksperymentów na Zwierzętach Uniwersytetu Medycznego w Tianjin, Tianjin, Chiny (numer zatwierdzenia SYXK: 2020-0010). Do tego badania wykorzystano sześcio- do ośmiotygodniowych samic myszy C57BL/6J. Zwierzęta były trzymane w kontrolowanych warunkach środowiskowych, w tym w 12-godzinnym cyklu jasnym i ciemnym, temperaturach w zakresie 21-25 °C, regulowanym poziomie wilgotności w zakresie 30%-70% oraz nieograniczonym dostępie do pożywienia i wody, chyba że określono inaczej. Szczegółowe informacje na temat stosowanych odczynników i sprzętu są wymienio....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Wyniki

Skuteczność wstrzyknięć podśluzówkowych oceniono początkowo poprzez podanie błękitu trypanowego. Po wstrzyknięciu wyraźnie zwizualizowano rozprzestrzenianie się barwnika w warstwie podśluzowej, co potwierdziło precyzyjne i kontrolowane dostarczanie wstrzykiwanych substancji (Rysunek 1).

Proces rozwoju guza był skrupulatnie monitorowany. Około 14 dni po implantacji zaobserwowano znaczną częstotliwość występowania krwiomoczu, co jest krytycznym objawem wskazującym n.......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Dyskusja

Badania nad rakiem pęcherza moczowego opierają się na modelach zwierzęcych, które są niezbędne zarówno w badaniach podstawowych, jak i stosowanych. Aby lepiej naśladować środowisko wzrostu guza, ortotopowe modele guza pęcherza moczowego zapewniają lepsze podejście w porównaniu z podskórnymi modelami guzów11.

Obecnie ortotopowe modele raka pęcherza moczowego można podzielić na dwa główne typy na dwa główne typy: te wykorzystujące myszy z niedoborem odporności, takie jak .......

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Oświadczenia

Autorzy oświadczają, że nie mają sprzecznych interesów.

Podziękowania

To badanie było wspierane przez fundusz Tianjin Municipal Health Industry Key Project (grant nr. TJWJ2022XK014), fundusz Projektu Badań Naukowych Komisji Edukacji Miejskiej w Tiencinie (grant nr 2022ZD069), Program Finansowania Talentów Instytutu Urologii w Tianjin (grant nr MYSRC202310), fundusz Projektu Badawczego Medycyny Klinicznej Drugiego Szpitala Uniwersytetu Medycznego w Tiencinie (grant nr 2023LC03), Fundusz Młodzieżowy Drugiego Szpitala Uniwersytetu Medycznego w Tiencinie (grant nr 2022ydey15) oraz Projekt Kultywacji Talentów Oddziału Urologii Drugiego Szpitala Uniwersytetu Medycznego w Tiencinie (grant nr 2023 r. MNRC202313). Sponsorzy odegrali rolę w przyg....

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Materiały

Lista materiałów użytych w tym artykule
NazwaFirmaNumer katalogowyKomentarze
Igła dozująca 34 GSuzhou Haorun Fluid Technology Co., Ltd., Suzhou, ChinySGL-362
Igła dozująca 30 GSuzhou Haorun Fluid Technology Co., Ltd., Suzhou, ChinySGL-362
AvertinSigma-Aldrich LLCT48402
Trypan niebieskiSigma-Aldrich LLC302643

Bibliografia

  1. Tran, L., Xiao, J. F., Agarwal, N., Duex, J. E., Theodorescu, D. Advances in bladder cancer biology and therapy. Nat Rev Cancer. 21 (2), 104-121 (2021).
  2. Dyrskjøt, L., et al. Bladder cancer. Nat Rev Dis Primers. 9 (1), 58(2023).
  3. Sim, W. J., et al.

Dostęp ograniczony. Zaloguj się lub rozpocznij wersję próbną, aby wyświetlić tę treść.

Przedruki i uprawnienia

Przeglądaj więcej artykułów

Rak pęcherza moczowego u myszyortotopowy model nowotworuwstrzykiwanie komórek MB49lokalizacja guza pęcherzapodśluzówkowe wstrzykiwanie komórektechnika uszkadzania pęcherzaterapia wewnątrz pęcherzowaodsetek przyjęcia się przeszczepu nowotworowego

Ten artykuł został opublikowany

Film wkrótce dostępny