13 czerwca 2025
Przedstawiamy tutaj metodę przenikającą przez ścianę, minimalnie inwazyjną metodę pobierania próbek krwi podczas snu w warunkach klinicznych.
Badamy, jak sen i rytmy okołodobowe zaburzają zdrowie kardiometaboliczne. Ostatecznie chcielibyśmy znaleźć strategie ograniczające pozostałe choroby związane ze snem i zaburzeniami okołodobowymi. Aby badać zmiany w ciele w ciągu 24 godzin, potrzebujemy mieć wgląd w system przez cały ten okres.
To może być trudne, ponieważ nie chcemy zakłócać snu w rytmie dobowym, wchodząc do pokoju uczestnika podczas snu, aby pobrać próbkę krwi. Aby to obejść, stosujemy protokół pobierania krwi przez ścianę. Tę lukę uzupełniamy, używając długiej linii kroplówki, którą umieszczamy w ścianie, z której możemy pobierać próbki krwi spoza pokoju uczestnika.
Pozwala nam to pobierać próbki krwi przy minimalnych zakłóceniach snu i rytmów okołodobowych. Nasze wyniki pozwolą naukowcom na dostęp do metabolicznych markerów zdrowia, takich jak glukoza i insulina, przez 24 godziny bez zakłócania snu, co może pomóc wyjaśnić wpływ snu i rytmów okołodobowych na ryzyko chorób. Na początek podłącz przedłużacz do próbkowania przez ścianę, łącząc trójkierunkowy stop z końcem samiczym blokiem przynęty.
Po przełamaniu uszczelnień umieść 10-mililitrową strzykawkę z solą fizjologiczną oraz strzykawkę z próbką 3 mililitrów na kurku zwarciowym. Odkręć zaczep zaworu zacinającego, aby zamknąć przewód przedłużający do strzykawki trzymililitrowej i otworzyć ją na płukanie soli fizjologicznej 10 mililitrów. Przepchnij sól fizjologiczną przez linię przedłużającą, aż dotrze do końca.
Ostrożnie zdejmij korek i pozwól, by sól fizjologiczna spłynęła do kubka lub na podkładkę chłonną. Przekręć zakładkę odcinającą, aby zamknąć przedłużacz obu strzykawek, trzymając je przymocowane do kurka zacinającego. Przeprowadź zakrętowany koniec przedłużki przez port ścienny do pokoju uczestnika, dbając o to, by pokrywa pozostała na miejscu, aby zachować sterylność.
W pokoju uczestnika wyczyść dalszy koniec linii przedłużania oraz stronę przymocowaną zestawu przedłużającego IV (przedłużacz IV). Używając podkładki do przygotowania ze sterylnym alkoholem, zdejmij nakręciło z przedłużki i przymocuj ją do zestawu przedłużającego dożylnego podłączonego do uczestnika. Teraz wróć do antykomory.
Wyjmij i wyrzuć zużytą sól fizjologiczną z kurka zatrzymającego i przymocuj podgrzaną sól fizjologiczną o pojemności 10 mililitrów. Przekręć zakładkę odcinającą, aby zamknąć przewód do próbki i otworzyć ją na nową płukaną solą fizjologiczną. Przeprowadzić sól fizjologiczną przez przedłużającą linię, aby sprawdzić brak wycieków i potwierdzić, że linia wenflofowa pozostaje nieprzezwignięta.
Powoli kontynuuj przepłukiwanie soli fizjologicznej, jednocześnie odkręcając zakładkę zdejmującą, aby całkowicie uszczelnić układ. Gdy linia przedłużająca zostanie potwierdzona, należy wrócić do pokoju uczestnika, aby owinąć zestaw wydłużających dożylnych samoprzylegającym, elastycznym opatrunkiem, aby zapobiec przesuwaniu się podczas snu. Przyklej przedłużacz mocno do ramy łóżka.
Podłącz strzykawkę odpadową o pięciu mililitrach, upewniając się, że przedłużacz jest zaparowana solą fizjologiczną, i podłącz próbkę trzymililitrowej do kurka odcinkowego. Przekręć zakładkę zdejmującą, aby otworzyć przewód do strzykawki z odpadem pięciu mililitrów. Używając strzykawki pięciomilitarowej, zbierz co najmniej 4,4 mililitra odpadów.
Następnie kontynuuj pobieranie, aż pojawi się cała krew. Teraz przekręć zaczep ogranicznika, aby zamknąć przewód do strzykawki z odpadem pięciu mililitrów. Użyj strzykawki o trzech mililitrach, aby pobrać pożądaną ilość krwi i przekręcić zakładkę odcinającą, aby zamknąć linię przedłużania obu strzykawek.
Wyjmij strzykawkę z odpadem 5 mililitrów i zastąp ją ciepłym płukaniem soli fizjologicznej o pojemności 10 mililitrów. Przekręć zakładkę z odcinaniem, aby zamknąć przewód do strzykawki z próbką trzech mililitrów. Otwieram ją na płukanie soli fizjologicznej.
Do linii przedłużania należy podać do 10 mililitrów ciepłej soli fizjologicznej, aby nie pozostała w niej żadna krew. Usuń próbkę z krwią do dalszego przetwarzania i zamień ją na pustą strzykawkę o trzech mililitrach. Przekręć zakładkę odciącającą, aby zamknąć przewód do obu strzykawek.
Powoli kontynuuj płukanie soli fizjologicznej, jednocześnie odkręcając zakładkę off-tab, aby utrzymać ciśnienie w linii przedłużenia i zminimalizować przepływ krwi cofniętej. Użyj pozostałej soli fizjologicznej, aby przepłukać przez zaworek do pustej strzykawki o trzech mililitrach. Następnie wyjmij strzykawkę z solą fizjologiczną i pociągnij trzymililitrową strzykawkę, aby usunąć resztki płynu z kurka zacinającego.
Wymień wszystkie strzykawki, aby przygotować się do kolejnego pobrania krwi. Profil stężenia melatoniny w osoczu przez 24 godziny mierzono w warunkach słabego oświetlenia. Wyniki sugerują, że poziomy melatoniny podążają za wyraźnym wzorcem wzroście i spadania zgodnym z prawidłowym rytmem okołodobowym, co potwierdza, że metoda pobierania próbek krwi przez ścianę dokładnie rejestruje zmiany hormonalne podczas biologicznej nocy.
W niedawnym badaniu skuteczność pobierania krwi przez ścianę wyniosła 67%, co odpowiada 304 na 454 próby pobrania krwi, a nieudane pobrania krwi stanowiły 33% prób, z czego 94% przypisywano problemom pozycyjnym, takim jak leżenie lub zatykanie linii wyprostowej. Podczas łatwego pobierania krwi polisomnograficzne wykazały stabilne sygnały elektroencefalogramu, elektrogramu, elektromiogramu i elektrokardiogramu, bez oznak pobudzenia czy zmiany etapu snu. Trudne pobieranie krwi wiązało się z zaburzeniami elektroencefalogramu, elektrogramu i elektromiogramu oraz podwyższonym tętnem wskazującym na pobudzenie.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejsze badanie przedstawia małoinwazyjną metodę pobierania krwi podczas snu, rozwiązującą problemy związane z badaniem rytmów okołodobowych oraz zdrowia kardiometabolicznego. Dzięki zastosowaniu protokołu pobierania krwi przez ścianę, badacze mogą gromadzić próbki bez zakłócania snu uczestnika.
Ciągły, małoinwazyjny pobór krwi jest kluczowy dla dokładnego profilowania 24-godzinnych rytmów fizjologicznych w badaniach klinicznych. Metoda pobierania krwi przez ścianę pozwala na zachowanie ciągłości snu, co umożliwia wiarygodną ocenę krążących biomarkerów związanych z ryzykiem kardiometabolicznym. Podejście to zwiększa pewność predykcyjną w badaniach nad biologią okołodobową i wspiera badania translacyjne nad mechanizmami chorób.
Metoda ta integruje się z kontinuum od odkrycia do translacji, umożliwiając wysokowierny, rozdzielony w czasie pobór próbek biomarkerów w warunkach klinicznych i badawczych.