Name: Metoda pobierania próbek krwi przez ścianę, mająca na celu minimalizację zakłóceń snu w warunkach klinicznych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-06-13T14:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 39 s
Description: Poznaj metodę pobierania próbek krwi przez ścianę w celu minimalizacji zakłóceń snu. Technika ta umożliwia badanie rytmów dobowych i zdrowia kardiometabolicznego bez zakłócania naturalnych wzorców snu u uczestników.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Badania te były częściowo wspierane przez T32HL149646 do GSM oraz R01DK125653 i R01HL168081 do JLB. Chcielibyśmy również podziękować Stephanie Laing, RN, BSN, zawodowej pielęgniarce badawczej w Colorado Clinical & Translational Sciences Institute (CCTSI) oraz University of Colorado Anschutz Medical Campus Clinical Translational Research Center za przegląd metod oraz dostarczenie wglądów i poprawek do ostatecznej wersji tego manuskryptu.

Metody opisane w tym artykule są stosowane w protokołach obecnie zatwierdzonych przez Instytucjonalną Radę Przeglądową Colorado State University oraz Colorado Multiple Institutional Review Board. Reprezentatywne dane pochodziły z takich badań, w których przed udziałem uzyskano pisemną świadomą zgodę. Wszystkie zaopatrzenie i używany sprzęt są wymienione w Tabeli Materiałów. W dyskusji przedstawiono dodatkowe rozważania metodyczne.
1. Montaż i podłączenie linii przedłużacza
UWAGA: Przed jakimkolwiek zabiegiem klinicznym należy wykonać odpowiednią higienę rąk przy użyciu roztworu zawierającego co najmniej 70% alkoholu izopropylowego. Środki ochrony osobistej (PPE), w tym między innymi rękawiczki, fartuchy laboratoryjne i buty z zamkniętymi palcami, muszą być noszone przez cały czas.
<ol>
	<li>Przygotowanie do próbkowania przez ścianę (Rysunek 1)<ol>
		<li>Poza salą uczestników zorganizuj stanowisko pobierania krwi z następującymi materiałami: jednorazową podkładką chłonącą, zaworem 3-drożnym zaworem zaworowym, linią przedłużającą 120 cali, strzykawką do płukania soli fizjologicznej 10 mL, podgrzewaną strzykawką do płukania soli fizjologicznej w urządzeniu grzewczym, strzykawką 5 mL na odpady, 3 mL strzykawką do pobierania krwi (rozmiar może się różnić w zależności od ilości pobranej krwi), oraz pojemnik na odpady biologiczne. Wszystkie materiały są wymienione w Tabeli Materiałów.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Podłącz przedłużacz do próbki przez ścianę.<ol>
		<li>Na jednorazowej poduszce chłonnej przymocuj 3-drożny zaworek odcinek do żeńskiej strony blokady Luer na linii przedłużającej. UWAGA: Upewnij się, że odsłonięty koniec zaworu nie dotyka żadnych powierzchni (w tym rękawiczek). Jeśli jest zanieczyszczony, wymień zawor, aby zapewnić sterylność.</li>
		<li>Umieść 10 mL strzykawkę z solą fizjologiczną i 3 mL próbki (z przerwaną szczelką) na zaworze odcinającym. UWAGA: Po przymocowaniu zaworu do przewodu przedłużającego, dwa pozostałe miejsca mocowania zaworu są identyczne; dlatego strzykawki do płukania soli fizjologicznej i próbki mogą być umieszczone na jednym z pozostałych zaworów zaworowych. Przerwanie uszczelnienia oznacza cofnięcie tłoka strzykawki, aby zwolnić ją przed przymocowaniem do uczestnika, co zapewnia, że ostre ujemne ciśnienie spowodowane przerwaniem uszczelnienia nie powoduje uszkodzenia naczynia krwionośnego.</li>
		<li>Przekręć zaczep OFF zaworu tak, aby przedłużacz był zamknięty przy strzykawce do próbki 3 mL. To otworzy zaworek na 10 mL przepłukania soli fizjologicznej.</li>
		<li>Przepchnij sól fizjologiczną przez linię przedłużacą. Gdy sól fizjologiczna dotrze do końca linii, ostrożnie zdejmij korek i pozwól, by sól fizjologiczna kapała do kubka i/lub na podkładkę chłonącą, aby mieć pewność, że linia jest całkowicie wypełniona solą. Przymocuj ponownie nasadkę do końca teraz zagruntowanej linii przedłużającej.</li>
		<li>Przekręć zakładkę OFF zaworu zaworu tak, aby przewód był zamknięty na obu strzykawkach. Zostaw strzykawki podłączone do kurka. UWAGA: Maksymalna objętość w linii wynosi 3,4 mL.</li>
		<li>Przeprowadź zamknięty koniec linii przedłużacza przez port ścienny do pokoju uczestnika. Upewnij się, że pokrywa pozostaje na miejscu, aby utrzymać sterylność linii.</li>
		<li>Przejdź do pokoju uczestnika, aby podłączyć przedłużacz do uczestnika. Oczyść dalszy koniec linii przedłużania oraz miejsce przyłączenia zestawu dożylnego (podłączonego do uczestnika) sterylnym podkładem do przygotowania alkoholu.</li>
		<li>Zdejmij pokrywę z przewodu przedłużającego i podłącz ją do zestawu przedłużającego IV (podłączonego do uczestnika).</li>
		<li>Gdy linia przedłużająca zostanie podłączona do IV, wróć do przedsionka.<ol>
			<li>Usuń i wyrzuć zużytą sól fizjologiczną z kurka i podłącz podgrzaną sol fizjologiczną 10 mL do przepłukania. Przekręć zaczep OFF na zaworze, aby zamknąć przewód do próbki. To otworzy zaworek na nową płukaną sol fizjologiczną 10 mL.</li>
			<li>Włóż sól fizjologiczną do linii przedłużania, aby upewnić się, że nie ma wycieków, a kroplówka pozostaje bezprzezrodna. Przekręć zakładkę OFF zaworu zaworu tak, aby przewód był zamknięty na obu strzykawkach. UWAGA: Płukanie soli fizjologicznej nie może przekraczać temperatury ludzkiego ciała (37 °C/98,6 °F). Sprawdź temperaturę soli fizjologicznej za pomocą termometru umieszczonego w urządzeniu grzewczym. Do przepłukania całej linii potrzebne jest minimum 4,4 mL soli fizjologicznej, ponieważ objętość w linii przedłużającej wynosi 3,4 mL +, a objętość w zestawie przedłużającym IV to 1 mL.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Kontynuuj powolne przepychanie soli fizjologicznej, skręcając zaczep OFF na zaworze zaworu, aby zamknąć przewód do obu strzykawek. To utrzymuje ciśnienie w linii wyprostowej i minimalizuje cofający się przepływ krwi.</li>
		<li>Po pomyślnym ustanowieniu linii przedłużania wracaj do pokoju uczestnika, aby owinąć zestaw przedłużania IV samoprzylepnym, elastycznym opatrunkiem, aby zapobiec naciągnięciu podczas snu. Przymocuj przedłużacz do ramy łóżka taśmą.</li>
		<li>Omów z uczestnikiem jego preferencje dotyczące snu (np. śpiący na boku, śpiący na plecach itd.) i zapewnij nadmiar rurek, aby zapewnić swobodę ruchu podczas snu. Poproś uczestnika o sprawdzenie zakresu ruchu. UWAGA: Ważne jest, aby przypomnieć uczestnikowi, że musi poprosić personel o pomoc w odłączeniu linii przedłużacza do korzystania z toalety.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Pobieranie próbek krwi przez linię przedłużania
<ol>
	<li>Pobieram próbkę krwi.<ol>
		<li>Przed pobieraniem krwi upewnij się, że przedłużacz jest nadal zaimpregnowany solą fizjologiczną i potwierdzi, że zaczep OFF zaworu jest skręcony tak, aby żyłka była zamknięta na obu strzykawkach.<ol>
			<li>Jeśli w linii przedłużania widoczna jest krew, należy przepłukać co najmniej 4,4 mL podgrzanej soli fizjologicznej, aby usunąć linię przedłużającą i zestaw dożylnych z krew.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Przyłącz jedną strzykawkę 5 mL (strzykawkę do odpadów) i jedną strzykawkę 3 mL (strzykawkę próbkową) do zaworu odcinkającego. Przekręć zakładkę OFF na zaworze, aby otworzyć przedłużacz do strzykawki 5 mL (strzykawki odpadowej). UWAGA: Przed pobraniem próbki krwi należy pobrać i wyrzucić "marnotrawną" strzykawkę, która składa się z soli fizjologicznej w linii przedłużania oraz zestawu przedłużania dożylnego.</li>
		<li>Ciągnij strzykawką o pojemności 5 mL, aż cała krew zacznie przedostawać się do środka (po co najmniej 4,4 ml odpadów). UWAGA: Kolor płynu w strzykawce z odpadów zaczyna się od przezroczystego, potem od różowego, a na końcu do ciemnoczerwonego, gdy linia przedłużająca zostanie wypełniona pełną krwią.</li>
		<li>Gdy w strzykawce 5 mL będzie widoczna cała krew, odkręć zaczep OFF na zaworze odcinkowym, aby zamknąć przewód do strzykawki 5 mL marnotrawnej.</li>
		<li>Pobierz pożądaną ilość krwi strzykawką o pojemności 3 mL. Przekręć zaczep OFF na zaworze, aby zamknąć przedłużacz obu strzykawek. UWAGA: Krew nie może pozostawać w linii przedłużania przez dłuższe niż 5 minut, aby zmniejszyć ryzyko zakrzepnięcia. Jeśli pobieranie krwi jest powolne, można użyć kilku mniejszych strzykawek do pobierania próbek, aby zmniejszyć ciśnienie na żyłę. Ustaw timer, aby określić czas trwania pobierania krwi. Po 5 minutach przepłucz rurę, aby zapobiec zakrzepaniu. Można podjąć próbę nowego losowania lub pominięć losowanie. Chociaż niektóre protokoły zawierają techniki oszczędzania krwi, takie jak ponowne podanie strzykawki w celu minimalizacji utraty krwi, protokół ten nie wdraża takich środków.</li>
		<li>Wyjmij strzykawkę z odpadami 5 mL i zastąp ją ciepłą solą fizjologiczną 10 mL.</li>
		<li>Przekręć zakładkę OFF na zaworze odcinkowym, aby zamknąć przewód do pustej strzykawki 3 mL. To otworzy linię do przepłukania soli fizjologicznej.</li>
		<li>Podaj do 10 ml podgrzanej soli fizjologicznej, aby upewnić się, że w linii przedłużania nie pozostaje żadna krew.</li>
		<li>Przekręć zakładkę OFF na zaworze, aby zamknąć przewód do obu strzykawek.<ol>
			<li>Kontynuuj powolne przepychanie soli fizjologicznej, skręcając zaczep OFF na zaworze zaworu, aby zamknąć przewód do obu strzykawek. To utrzymuje ciśnienie w linii wyprostowej i minimalizuje cofający się przepływ krwi.</li>
			<li>Użyj pozostałej soli fizjologicznej w strzykawce, aby przepłukać przez kurek do pustej strzykawki 3 mL. Oczyść zaworek z soli fizjologicznej jeszcze bardziej, wyjmując strzykawkę z soli fizjologicznej i pociągając za 3 mL, aby usunąć resztki płynu z kurka.</li>
		</ol>
		</li>
		<li>Wymień wszystkie strzykawki, aby przygotować się na kolejne pobranie. UWAGA: Nie zostawiaj otworów zaworów bez podłączonych strzykawek, ponieważ może to zaburzyć sterylność.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Cox, K. H., Takahashi, J. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+clock+genes+and+the+transcriptional+architecture+of+the+clock+mechanism%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Circadian clock genes and the transcriptional architecture of the clock mechanism.</a> J Mol Endocrinol. 63 (4), R93-R102 (2019).</li>
<li>Broussard, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aBroussard%2C+JL+%22Biological+Timekeeping%3A+Clocks%2C+Rhythms+and+Behaviour%22">Biological Timekeeping: Clocks, Rhythms and Behaviour</a>. , Springer. India. (2017).</li>
<li>Chellappa, S. L., Vujovic, N., Williams, J. S., Scheer, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+circadian+disruption+on+cardiovascular+function+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Trends+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Impact of circadian disruption on cardiovascular function and disease.</a> Trends Endocrinol Metab. 30 (10), 767-779 (2019).</li>
<li>Broussard, J. L., Van Cauter, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Disturbances+of+sleep+and+circadian+rhythms%3A+novel+risk+factors+for+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Opin+Endocrinol+Diabetes+Obes%22%5BJournal%5D)">Disturbances of sleep and circadian rhythms: novel risk factors for obesity.</a> Curr Opin Endocrinol Diabetes Obes. 23 (5), 353-359 (2016).</li>
<li>Hanlon, E., Van Cauter, E. V., Tasali, E., Broussard, J. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aHanlon%2C+E+%22Endocrine+Physiology+in+Relation+to+Sleep+and+Sleep+Disturbances.+Principles+and+Pract+Sleep+Medicine%22">Endocrine Physiology in Relation to Sleep and Sleep Disturbances. Principles and Pract Sleep Medicine</a>. , Elsevier Saunders, MO. (2021).</li>
<li>Prasad, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+smartphone+intervention+to+promote+time+restricted+eating+reduces+body+weight+and+blood+pressure+in+adults+with+overweight+and+obesity%3A+a+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">A smartphone intervention to promote time restricted eating reduces body weight and blood pressure in adults with overweight and obesity: a pilot study.</a> Nutrients. 13 (7), 2148(2021).</li>
<li>Procopio, S. B., Esser, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Clockwork+conditioning%3A+aligning+the+skeletal+muscle+clock+with+time-of-day+exercise+for+cardiometabolic+health%5BTitle%5D)+AND+%22J+Mol+Cell+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Clockwork conditioning: aligning the skeletal muscle clock with time-of-day exercise for cardiometabolic health.</a> J Mol Cell Cardiol. 198, 36-44 (2025).</li>
<li>Holtman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+circadian+timing+following+a+one-week+in-home+sleep+extension+manipulation+in+habitually+short-sleeping+adolescents%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Changes in circadian timing following a one-week in-home sleep extension manipulation in habitually short-sleeping adolescents.</a> Sleep. 48 (2), zsae273(2024).</li>
<li>Chellappa, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daytime+eating+prevents+internal+circadian+misalignment+and+glucose+intolerance+in+night+work%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Daytime eating prevents internal circadian misalignment and glucose intolerance in night work.</a> Sci Adv. 7, eabg9910(2021).</li>
<li>Skene, D. J., Arendt, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+circadian+rhythms%3A+physiological+and+therapeutic+relevance+of+light+and+melatonin%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Clin+Biochem%22%5BJournal%5D)">Human circadian rhythms: physiological and therapeutic relevance of light and melatonin.</a> Ann Clin Biochem. 43 (Pt 5), 344-353 (2006).</li>
<li>Powell, D. J., Schlotz, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Daily+life+stress+and+the+cortisol+awakening+response%3A+testing+the+anticipation+hypothesis%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Daily life stress and the cortisol awakening response: testing the anticipation hypothesis.</a> PLoS One. 7 (12), e52067(2012).</li>
<li>Wright, K. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Influence+of+sleep+deprivation+and+circadian+misalignment+on+cortisol%2C+inflammatory+markers%2C+and+cytokine+balance%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Behav+Immun%22%5BJournal%5D)">Influence of sleep deprivation and circadian misalignment on cortisol, inflammatory markers, and cytokine balance.</a> Brain Behav Immun. 47, 24-34 (2015).</li>
<li>Ikegami, K., Refetoff, S., Van Cauter, E., Yoshimura, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interconnection+between+circadian+clocks+and+thyroid+function%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">Interconnection between circadian clocks and thyroid function.</a> Nat Rev Endocrinol. 15 (10), 590-600 (2019).</li>
<li>Kessler, L., Nedeltcheva, A., Imperial, J., Penev, P. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Changes+in+serum+TSH+and+free+T4+during+human+sleep+restriction%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">Changes in serum TSH and free T4 during human sleep restriction.</a> Sleep. 33 (8), 1115-1118 (2010).</li>
<li>Van Cauter, E., Plat, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Physiology+of+growth+hormone+secretion+during+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pediatr%22%5BJournal%5D)">Physiology of growth hormone secretion during sleep.</a> J Pediatr. 128 (5 Pt 2), S32-S37 (1996).</li>
<li>Morselli, L., Leproult, R., Balbo, M., Spiegel, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+sleep+duration+in+the+regulation+of+glucose+metabolism+and+appetite%5BTitle%5D)+AND+%22Best+Pract+Res+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Role of sleep duration in the regulation of glucose metabolism and appetite.</a> Best Pract Res Clin Endocrinol Metab. 24 (5), 687-702 (2010).</li>
<li>Kapcala, L. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Twenty-four-hour+prolactin+secretory+patterns+in+women+with+galactorrhea%2C+normal+menses%2C+normal+random+prolactin+levels+and+abnormal+sellar+tomograms%5BTitle%5D)+AND+%22J+Endocrinol+Invest%22%5BJournal%5D)">Twenty-four-hour prolactin secretory patterns in women with galactorrhea, normal menses, normal random prolactin levels and abnormal sellar tomograms.</a> J Endocrinol Invest. 7 (5), 455-460 (1984).</li>
<li>Sassin, J. F., Frantz, A. G., Kapen, S., Weitzman, E. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+nocturnal+rise+of+human+prolactin+is+dependent+on+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">The nocturnal rise of human prolactin is dependent on sleep.</a> J Clin Endocrinol Metab. 37 (3), 436-440 (1973).</li>
<li>Chaput, J. -P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+insufficient+sleep+and+circadian+misalignment+in+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Endocrinol%22%5BJournal%5D)">The role of insufficient sleep and circadian misalignment in obesity.</a> Nat Rev Endocrinol. 19 (2), 82-97 (2023).</li>
<li>Broussard, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+restriction+increases+free+fatty+acids+in+healthy+men%5BTitle%5D)+AND+%22Diabetologia%22%5BJournal%5D)">Sleep restriction increases free fatty acids in healthy men.</a> Diabetologia. 58 (4), 791-798 (2015).</li>
<li>Vaughn, L. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Endocannabinoid+signalling%3A+has+it+got+rhythm%5BTitle%5D)+AND+%22Br+J+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Endocannabinoid signalling: has it got rhythm.</a> Br J Pharmacol. 160 (3), 530-543 (2010).</li>
<li>Lindgren, O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Differential+islet+and+incretin+hormone+responses+in+morning+versus+afternoon+after+standardized+meal+in+healthy+men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">Differential islet and incretin hormone responses in morning versus afternoon after standardized meal in healthy men.</a> J Clin Endocrinol Metab. 94 (8), 2887-2892 (2009).</li>
<li>Wesselius, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quality+and+quantity+of+sleep+and+factors+associated+with+sleep+disturbance+in+hospitalized+patients%5BTitle%5D)+AND+%22JAMA+Intern+Med%22%5BJournal%5D)">Quality and quantity of sleep and factors associated with sleep disturbance in hospitalized patients.</a> JAMA Intern Med. 178 (9), 1201-1208 (2018).</li>
<li>Markwald, R. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+insufficient+sleep+on+total+daily+energy+expenditure%2C+food+intake%2C+and+weight+gain%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Impact of insufficient sleep on total daily energy expenditure, food intake, and weight gain.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 110 (14), 5695-5700 (2013).</li>
<li>McHill, A. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impact+of+circadian+misalignment+on+energy+metabolism+during+simulated+nightshift+work%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Impact of circadian misalignment on energy metabolism during simulated nightshift work.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 111 (48), 17302-17307 (2014).</li>
<li>Depner, C. M., Melanson, E. L., McHill, A. W., Wright, K. P. Jr <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mistimed+food+intake+and+sleep+alters+24-hour+time-of-day+patterns+of+the+human+plasma+proteome%5BTitle%5D)+AND+%22Proc+Natl+Acad+Sci+U+S+A%22%5BJournal%5D)">Mistimed food intake and sleep alters 24-hour time-of-day patterns of the human plasma proteome.</a> Proc Natl Acad Sci U S A. 115 (23), E5390-E5399 (2018).</li>
<li>Mullington, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Sleep+loss+reduces+diurnal+rhythm+amplitude+of+leptin+in+healthy+men%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neuroendocrinol%22%5BJournal%5D)">Sleep loss reduces diurnal rhythm amplitude of leptin in healthy men.</a> J Neuroendocrinol. 15 (9), 851-854 (2003).</li>
<li>Ona, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+technique+for+improved+blood+sampling+during+sleep+studies%5BTitle%5D)+AND+%22Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">A technique for improved blood sampling during sleep studies.</a> Psychophysiology. 31 (6), 609-610 (1994).</li>
<li>Schlierf, G., Dorow, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diurnal+patterns+of+triglycerides%2C+free+fatty+acids%2C+blood+sugar%2C+and+insulin+during+carbohydrate-induction+in+man+and+their+modification+by+nocturnal+suppression+of+lipolysis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Diurnal patterns of triglycerides, free fatty acids, blood sugar, and insulin during carbohydrate-induction in man and their modification by nocturnal suppression of lipolysis.</a> J Clin Invest. 52 (3), 732-740 (1973).</li>
<li>Schlierf, G., Reinheimer, W., Stossberg, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diurnal+patterns+of+plasma+triglycerides+and+free+fatty+acids+in+normal+subjects+and+in+patients+with+endogenous+%28type+IV%29+hyperlipoproteinemia%5BTitle%5D)+AND+%22Nutr+Metab%22%5BJournal%5D)">Diurnal patterns of plasma triglycerides and free fatty acids in normal subjects and in patients with endogenous (type IV) hyperlipoproteinemia.</a> Nutr Metab. 13 (2), 80-91 (1971).</li>
<li>Swanson, C. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((turnover+markers+after+sleep+restriction+and+circadian+disruption%3A+a+mechanism+for+sleep-related+bone+loss+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Endocrinol+Metab%22%5BJournal%5D)">turnover markers after sleep restriction and circadian disruption: a mechanism for sleep-related bone loss in humans.</a> J Clin Endocrinol Metab. 102 (10), 3722-3730 (2017).</li>
<li>Van Cauter, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modulation+of+glucose+regulation+and+insulin+secretion+by+circadian+rhythmicity+and+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Modulation of glucose regulation and insulin secretion by circadian rhythmicity and sleep.</a> J Clin Invest. 88 (3), 934-942 (1991).</li>
<li>Rynders, C. A., Morton, S. J., Bessesen, D. H., Wright, K. P. Jr, Broussard, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythm+of+substrate+oxidation+and+hormonal+regulators+of+energy+balance%5BTitle%5D)+AND+%22Obesity+%28Silver+Spring%29%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythm of substrate oxidation and hormonal regulators of energy balance.</a> Obesity (Silver Spring). 28 (Suppl 1), S104-S113 (2020).</li>
<li>Thosar, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Circadian+rhythm+of+vascular+function+in+midlife+adults%5BTitle%5D)+AND+%22Arterioscler+Thromb+Vasc+Biol%22%5BJournal%5D)">Circadian rhythm of vascular function in midlife adults.</a> Arterioscler Thromb Vasc Biol. 39 (6), 1203-1211 (2019).</li>
<li>Thosar, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Morning+impairment+in+vascular+function+is+unrelated+to+overnight+sleep+or+the+inactivity+that+accompanies+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22Am+J+Physiol+Regul+Integr+Comp+Physiol%22%5BJournal%5D)">Morning impairment in vascular function is unrelated to overnight sleep or the inactivity that accompanies sleep.</a> Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol. 315 (5), R986-R993 (2018).</li>
<li>Dimsdale, J. E., Coy, T., Ziegler, M. G., Ancoli-Israel, S., Clausen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+sleep+apnea+on+plasma+and+urinary+catecholamines%5BTitle%5D)+AND+%22Sleep%22%5BJournal%5D)">The effect of sleep apnea on plasma and urinary catecholamines.</a> Sleep. 18 (5), 377-381 (1995).</li>
<li>Klerman, E. B., Gershengorn, H. B., Duffy, J. F., Kronauer, R. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparisons+of+the+variability+of+three+markers+of+the+human+circadian+pacemaker%5BTitle%5D)+AND+%22J+Biol+Rhythms%22%5BJournal%5D)">Comparisons of the variability of three markers of the human circadian pacemaker.</a> J Biol Rhythms. 17 (2), 181-193 (2002).</li>
<li>Benloucif, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Measuring+melatonin+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Sleep+Med%22%5BJournal%5D)">Measuring melatonin in humans.</a> J Clin Sleep Med. 4 (1), 66-69 (2008).</li>
<li>Lammers, W. J., Badia, P., Hughes, R., Harsh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Temperature%2C+time-of-night+of+testing%2C+and+responsiveness+to+stimuli+presented+while+sleeping%5BTitle%5D)+AND+%22Psychophysiology%22%5BJournal%5D)">Temperature, time-of-night of testing, and responsiveness to stimuli presented while sleeping.</a> Psychophysiology. 28 (4), 463-467 (1991).</li>
<li>Alikhan, R., Forster, R., Cohen, A. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heparin+for+the+prevention+of+venous+thromboembolism+in+acutely+ill+medical+patients+%28excluding+stroke+and+myocardial+infarction%29%5BTitle%5D)+AND+%22Cochrane+Database+Syst+Rev%22%5BJournal%5D)">Heparin for the prevention of venous thromboembolism in acutely ill medical patients (excluding stroke and myocardial infarction).</a> Cochrane Database Syst Rev. 2014 (5), CD003747(2014).</li>
<li>Roth, B., Ekelund, M., Fan, B. G., Ekstrom, U., Nilsson-Ehle, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+heparin+and+low+molecular+weight+heparin+on+lipid+transport+during+parenteral+feeding+in+the+rat%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Anaesthesiol+Scand%22%5BJournal%5D)">Effects of heparin and low molecular weight heparin on lipid transport during parenteral feeding in the rat.</a> Acta Anaesthesiol Scand. 40 (1), 102-111 (1996).</li>
<li>Weintraub, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Continuous+intravenous+heparin+administration+in+humans+causes+a+decrease+in+serum+lipolytic+activity+and+accumulation+of+chylomicrons+in+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Lipid+Res%22%5BJournal%5D)">Continuous intravenous heparin administration in humans causes a decrease in serum lipolytic activity and accumulation of chylomicrons in circulation.</a> J Lipid Res. 35 (2), 229-238 (1994).</li>
<li>Schallom, M. E., Prentice, D., Sona, C., Micek, S. T., Skrupky, L. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heparin+or+0.9%25+sodium+chloride+to+maintain+central+venous+catheter+patency%3A+a+randomized+trial%5BTitle%5D)+AND+%22Crit+Care+Med%22%5BJournal%5D)">Heparin or 0.9% sodium chloride to maintain central venous catheter patency: a randomized trial.</a> Crit Care Med. 40 (6), 1820-1826 (2012).</li>
<li>Rahman, S. A., Wright, K. P. Jr, Lockley, S. W., Czeisler, C. A., Gronfier, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterizing+the+temporal+dynamics+of+melatonin+and+cortisol+changes+in+response+to+nocturnal+light+exposure%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Characterizing the temporal dynamics of melatonin and cortisol changes in response to nocturnal light exposure.</a> Sci Rep. 9 (1), 19720(2019).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Metoda pobierania krwi przez ścianę przedstawiona tutaj jest szeroko stosowana w badaniach nad snem i okołodobowymi do pobierania krwi podczas snu przy minimalnych zakłóceniach uczestników. Opisane procedury — w tym przygotowanie, montaż i zastosowanie linii przedłużającej — mają szerokie zastosowanie zarówno w środowiskach klinicznych, jak i badawczych. Dzięki tej technice naukowcy mogą skutecznie pobierać próbki krwi przez 24 godziny, także podczas zaplanowanego snu. Ponadto polisomnografia (PSG) potwierdza, że w ideal...

Rytmy dzienne i dobowe to cykle biologiczne zaangażowane w regulację procesów fizjologicznych, metabolicznych i behawioralnych przez 24 godziny. Rytmy dzienne to wzorce biologiczne, które podążają za cyklem dnia i nocy, są napędzane przez sygnały środowiskowe lub behawioralne. Dla porównania, rytmy okołodobowe w biologii są zbliżone do 24-godzinnych cykli i są napędzane przez wewnętrzną sieć zegarów molekularnych, niezależną od zewnętrznych sygnałów (uwaga: szczegółowe wyjaśnienie zegarów okołodobowych wykracza poza zakres tego artykułu; zainteresowani czytelnicy są kierowani do Cox i in.1 w celu uzyskania dalszych informacji oraz do Broussarda i in.2 w celu omówienia klinicznych protokołów okołodobowych). Zarówno rytm dniowy, jak i okołodobowy odgrywają kluczową rolę w zdrowiu, a zaburzenia związane są ze zwiększonym ryzykiem rozwoju chorób sercowo-naczyniowych i cukrzycy typu 2 3,4. To zrozumienie ma swoje korzenie w dekadach badań dotyczących pomiarów szeregów czasowych w kontrolowanych warunkach laboratoryjnych. Wyniki takich badań pomogły rozróżnić endogenne wpływy okołodobowe od zewnętrznych wpływów środowiskowych lub behawioralnych na procesy biologiczne i ich rolę w utrzymaniu homeostazy fizjologicznej 2,5. Ten cykl badań położył podwaliny pod nowsze badania translacyjne badające wpływ snu i dobowego wyznaczania czasu zachowań na wyniki zdrowotne 6,7,8,9.
Hormony i czynniki metaboliczne wykazują wyraźne 24-godzinne oscylacje. Melatonina, na przykład, rośnie w biologicznej nocy i pozostaje niska w biologicznym dniu10. Natomiast rytm kortyzolowy charakteryzuje się hamowaniem na początku biologicznej nocy, po którym następuje wzrost przed przebudzeniemsię 11, co zmienia się podczas deprywacji snu12. Hormon stymulujący tarczycę (TSH) wzrasta w biologicznym wieczorze i jest tłumiony podczas13. snu. Rytm TSH zostaje zaburzony podczas deprywacji snu, co prowadzi do wzrostu poziomu TSH podczas biologicznej nocy14. Rytmiczne wzorce kilku innych czynników krążących są podobnie wpływane przez cykle snu i czuwania. Na przykład wydzielanie hormonu wzrostu (GH) jest ściśle powiązane ze snem wolnofalowym (SWS), z wyraźnym uwalnieniem krótko po rozpoczęciu snu, zwłaszcza u mężczyznw wieku 15 lat. Ponadto wydzielanie GH w połączeniu ze zwiększonym poziomem glukozonu podczas snu pomaga dostosować się do przedłużonego nocnego postu i prowadzi do zmniejszenia wykorzystania glukozy, co pozwala utrzymać stabilny poziom glukozy we krwi i zapobiegać hipoglikemii16. Podobnie jak GH, prolaktyna gwałtownie wzrasta po rozpoczęciu snu i osiąga szczyt w połowie okresu snu, z podobnymi wzrostami podczas drzemek w ciągu dnia17,18. Dodatkowe czynniki krążące wykazujące rytm 24-godzinny to hormon adrenokortykotropowy, hormon luteinizujący, glukoza i insulina (dla bardziej kompleksowego podsumowania zob. Hanlon i in.5).
Wiele czynników krążących związanych z głodem, regulacją apetytu i równowagą energetyczną również wykazuje wahania w ciągu 24 godzin. Ghrelin, która pobudza głód, osiąga szczyt przed posiłkami i spada podczas nocnego snu, podczas gdy leptyn, hormon sytości, wzrasta w nocy, prawdopodobnie tłumiąc głód podczas nocnego postu19. Inne sygnały metaboliczne, takie jak wolne kwasy tłuszczowe, endokannabinoidy oraz peptydy sytości, takie jak GLP-1 i PYY, wykazują zmienności wpływane zarówno przez wzorce snu, jak i żywienia 19,20,21,22.
Razem opisane powyżej oscylacje ilustrują złożoną interakcję między snem, procesami okołodobowymi i homeostazą fizjologiczną, którą można w pełni docenić jedynie poprzez profilowanie 24-godzinnych wzorców krążenia istotnych zmiennych fizjologicznych.
Wyjaśnienie 24-godzinnych rytmów czynników krążących jest niezbędne do zrozumienia codziennych wahań funkcji fizjologicznych, a także tego, jak sen i zaburzenia okołodobowe wpływają na zdrowie. Jednak tradycyjne metody pobierania próbek krwi mogą zakłócać same procesy, które napędzają i regulują te rytmy23, co podkreśla potrzebę minimalnie inwazyjnych metod, które pozwalają na dokładne wglądanie się w profile 24-godzinne.
Dlatego celem tego artykułu metodycznego jest szczegółowe opisanie kroków niezbędnych do niezawodnego pobierania częstych próbek krwi przez 24 godziny od uczestników badań z wykorzystaniem techniki pobierania krwi przez ścianę. Opisana technika, stosowana przez wiele laboratoriów snu i okołodobowych 20,24,25,26,27,28,29,30,31,32,33,34,35,36, porusza wyzwania techniczne związane z pobieraniem próbek krwi podczas snu. W kolejnych sekcjach sama technika została opisana w dodatkowej demonstracji wideo. Ponadto prezentowane są reprezentatywne dane z badania klinicznego wykorzystującego tę metodę. Na koniec artykuł kończy się omówieniem ograniczeń, pułapek i ważnych kwestii związanych z wykorzystaniem tej metody w badaniach klinicznych.

<table><tbody><tr><td>Zestaw przedłużaczy IV standardowego kalibru 9 cali z objętością zapłonowania 1 mL, zdejmowanym złączem SmartSite Needle-Free, zaciskiem suwakowym i spinowym zamkiem męskim luer</td><td>Medline</td><td>IME22059EH</td><td></td></tr><tr><td>Zastrzyk chlorku sodu 0,9% USP 10 mL w 10 mL strzykawce ZR</td><td>Excelsior Medical</td><td>EMZE010001</td><td></td></tr><tr><td>Podkład do przygotowania alkoholu</td><td>Medline</td><td>MDS090737</td><td></td></tr><tr><td>BD Insyte Autoguard Skrzydłowy cewnik 20 G</td><td>Medline</td><td>381534</td><td></td></tr><tr><td>Strzykawka BD Plastipak 3 mL</td><td>Fischer Scientific</td><td>309657</td><td></td></tr><tr><td>CoFlexNL</td><td>Medline</td><td>5200CP</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw przedłużający IV 192 cale, rury małokalibrowe</td><td>Oddział Medyczny na OIOM-ie</td><td>B2202</td><td>Aby zamówić materiały na OIOM, konieczne jest założenie konta na OIOM</td></tr><tr><td>Gąbki z gazy nietkanej</td><td>Medline</td><td>NON25223</td><td></td></tr><tr><td>Tegaderm</td><td>Medline</td><td>1624W</td><td></td></tr><tr><td>Ultra(TM) 3-kierunkowy stockcockw/obrotowy męski zamek luer lock</td><td>Medline</td><td>MX2311L</td><td></td></tr></tbody></table>

metoda pobierania próbek krwi przez ścianę, mająca na celu minimalizację zakłóceń snu w warunkach klinicznych

Through-the-Wall Blood Sampling Method to Minimize Sleep Disruption in Clinical Settings

Rytmy fizjologiczne, w tym rytmy dzienne i dobowe, odgrywają kluczową rolę w zdrowiu, a zaburzenia coraz częściej łączą się z chorobami sercowo-naczyniowymi i cukrzycą typu 2. Rytmy te są ściśle powiązane z cyklami snu i czuwania, ponieważ zmiany w czasie lub czasie trwania snu mogą wpływać na rytmy dzienne i okołodobowe, zaburzając tym samym homeostazę fizjologiczną. Dodatkowe czynniki, takie jak czas przyjmowania zachowań takich jak spożywanie posiłków i/lub aktywność fizyczna, mogą modulować rytmy 24-godzinne w sposób wspierający zdrowie lub zwiększający ryzyko chorób przewlekłych. 
Pomimo rosnącego uznania znaczenia rytmów biologicznych, pozyskiwanie seryjnej próbki krwi potrzebne do wyjaśnienia wzorców w czynnikach krążących pozostaje poważnym wyzwaniem w badaniach klinicznych. Rutynowe metody pobierania krwi mogą zakłócać sen, potencjalnie zmieniając rytmy snu i biologiczne, a w konsekwencji wpływając na interesujące zmienne. Podkreśla to potrzebę stosowania minimalnie inwazyjnych metod, które pozwalają oceniać procesy biologiczne przez całą dobę bez zakłócania snu czy rytmów biologicznych. 
Aby sprostać tym wyzwaniom, wiele grup klinicznych i badawczych stosuje technikę znaną jako metoda pobierania próbek krwi "przez ścianę". To podejście wykorzystuje wydłużone rurki połączone z cewnikiem stacjonarnym, przewleczone przez ścianę lub przegrodę do miejsca poza pokojem uczestnika. Dzięki umożliwieniu pobierania krwi bez konieczności wchodzenia do pomieszczenia, metoda ta minimalizuje zakłócenia, zachowując integralność 24-godzinnych profili krążących zmiennych interesujących i minimalnie zakłócając sen. 
Tutaj przedstawiamy szczegółowy opis metody pobierania próbek krwi przez ścianę oraz pokazujemy jej wykonalność i skuteczność w pobieraniu próbek krwi podczas zaplanowanych snu. Przedstawione są reprezentatywne dane z badania klinicznego, a także omawiane są dodatkowe kwestie, w tym wpływ trudnego pobierania krwi na architekturę snu.

24-godzinna melatonina z użyciem pobierania krwi przez ścianę podczas snu Opisana powyżej metoda pozwala na ocenę 24-godzinnych wzorców czynników obiegowych, które w innym przypadku zostałyby przeoczone przez pojedynczą próbę punktu czasowego. Melatonina, hormon często mierzony przez pobieranie próbek krwi przez ścianę, jest najczęściej akceptowanym zastępcą do oceny rytmu centralnego zegara okołodobowego, który znajduje się w jądrze nadgórnym (SCN) przedniego podwzgórza. Ponieważ bezpośredni dostęp...

Przedstawiamy tutaj metodę przenikającą przez ścianę, minimalnie inwazyjną metodę pobierania próbek krwi podczas snu w warunkach klinicznych.

Metoda pobierania próbek krwi przez ścianę, mająca na celu minimalizację zakłóceń snu w warunkach klinicznych

Physiological rhythms, including diurnal and circadian rhythms, play a critical role in health, with disturbances increasingly linked to cardiovascular ...

Badamy, jak sen i rytmy okołodobowe zaburzają zdrowie kardiometaboliczne. Ostatecznie chcielibyśmy znaleźć strategie ograniczające pozostałe choroby związane ze snem i zaburzeniami okołodobowymi. Aby badać zmiany w ciele w ciągu 24 godzin, potrzebujemy mieć wgląd w system przez cały ten okres.To może być trudne, ponieważ nie chcemy zakłócać snu w rytmie dobowym, wchodząc do pokoju uczestnika podczas snu, aby pobrać próbkę krwi. Aby to obejść, stosujemy protokół pobierania krwi przez ścianę. Tę lukę uzupełniamy, używając długiej linii kroplówki, którą umieszczamy w ścianie, z której możemy pobierać próbki krwi spoza pokoju uczestnika.Pozwala nam to pobierać próbki krwi przy minimalnych zakłóceniach snu i rytmów okołodobowych. Nasze wyniki pozwolą naukowcom na dostęp do metabolicznych markerów zdrowia, takich jak glukoza i insulina, przez 24 godziny bez zakłócania snu, co może pomóc wyjaśnić wpływ snu i rytmów okołodobowych na ryzyko chorób. Na początek podłącz przedłużacz do próbkowania przez ścianę, łącząc trójkierunkowy stop z końcem samiczym blokiem przynęty.Po przełamaniu uszczelnień umieść 10-mililitrową strzykawkę z solą fizjologiczną oraz strzykawkę z próbką 3 mililitrów na kurku zwarciowym. Odkręć zaczep zaworu zacinającego, aby zamknąć przewód przedłużający do strzykawki trzymililitrowej i otworzyć ją na płukanie soli fizjologicznej 10 mililitrów. Przepchnij sól fizjologiczną przez linię przedłużającą, aż dotrze do końca.Ostrożnie zdejmij korek i pozwól, by sól fizjologiczna spłynęła do kubka lub na podkładkę chłonną. Przekręć zakładkę odcinającą, aby zamknąć przedłużacz obu strzykawek, trzymając je przymocowane do kurka zacinającego. Przeprowadź zakrętowany koniec przedłużki przez port ścienny do pokoju uczestnika, dbając o to, by pokrywa pozostała na miejscu, aby zachować sterylność.W pokoju uczestnika wyczyść dalszy koniec linii przedłużania oraz stronę przymocowaną zestawu przedłużającego IV (przedłużacz IV). Używając podkładki do przygotowania ze sterylnym alkoholem, zdejmij nakręciło z przedłużki i przymocuj ją do zestawu przedłużającego dożylnego podłączonego do uczestnika. Teraz wróć do antykomory.Wyjmij i wyrzuć zużytą sól fizjologiczną z kurka zatrzymającego i przymocuj podgrzaną sól fizjologiczną o pojemności 10 mililitrów. Przekręć zakładkę odcinającą, aby zamknąć przewód do próbki i otworzyć ją na nową płukaną solą fizjologiczną. Przeprowadzić sól fizjologiczną przez przedłużającą linię, aby sprawdzić brak wycieków i potwierdzić, że linia wenflofowa pozostaje nieprzezwignięta.Powoli kontynuuj przepłukiwanie soli fizjologicznej, jednocześnie odkręcając zakładkę zdejmującą, aby całkowicie uszczelnić układ. Gdy linia przedłużająca zostanie potwierdzona, należy wrócić do pokoju uczestnika, aby owinąć zestaw wydłużających dożylnych samoprzylegającym, elastycznym opatrunkiem, aby zapobiec przesuwaniu się podczas snu. Przyklej przedłużacz mocno do ramy łóżka.Podłącz strzykawkę odpadową o pięciu mililitrach, upewniając się, że przedłużacz jest zaparowana solą fizjologiczną, i podłącz próbkę trzymililitrowej do kurka odcinkowego. Przekręć zakładkę zdejmującą, aby otworzyć przewód do strzykawki z odpadem pięciu mililitrów. Używając strzykawki pięciomilitarowej, zbierz co najmniej 4,4 mililitra odpadów.Następnie kontynuuj pobieranie, aż pojawi się cała krew. Teraz przekręć zaczep ogranicznika, aby zamknąć przewód do strzykawki z odpadem pięciu mililitrów. Użyj strzykawki o trzech mililitrach, aby pobrać pożądaną ilość krwi i przekręcić zakładkę odcinającą, aby zamknąć linię przedłużania obu strzykawek.Wyjmij strzykawkę z odpadem 5 mililitrów i zastąp ją ciepłym płukaniem soli fizjologicznej o pojemności 10 mililitrów. Przekręć zakładkę z odcinaniem, aby zamknąć przewód do strzykawki z próbką trzech mililitrów. Otwieram ją na płukanie soli fizjologicznej.Do linii przedłużania należy podać do 10 mililitrów ciepłej soli fizjologicznej, aby nie pozostała w niej żadna krew. Usuń próbkę z krwią do dalszego przetwarzania i zamień ją na pustą strzykawkę o trzech mililitrach. Przekręć zakładkę odciącającą, aby zamknąć przewód do obu strzykawek.Powoli kontynuuj płukanie soli fizjologicznej, jednocześnie odkręcając zakładkę off-tab, aby utrzymać ciśnienie w linii przedłużenia i zminimalizować przepływ krwi cofniętej. Użyj pozostałej soli fizjologicznej, aby przepłukać przez zaworek do pustej strzykawki o trzech mililitrach. Następnie wyjmij strzykawkę z solą fizjologiczną i pociągnij trzymililitrową strzykawkę, aby usunąć resztki płynu z kurka zacinającego.Wymień wszystkie strzykawki, aby przygotować się do kolejnego pobrania krwi. Profil stężenia melatoniny w osoczu przez 24 godziny mierzono w warunkach słabego oświetlenia. Wyniki sugerują, że poziomy melatoniny podążają za wyraźnym wzorcem wzroście i spadania zgodnym z prawidłowym rytmem okołodobowym, co potwierdza, że metoda pobierania próbek krwi przez ścianę dokładnie rejestruje zmiany hormonalne podczas biologicznej nocy.W niedawnym badaniu skuteczność pobierania krwi przez ścianę wyniosła 67%, co odpowiada 304 na 454 próby pobrania krwi, a nieudane pobrania krwi stanowiły 33% prób, z czego 94% przypisywano problemom pozycyjnym, takim jak leżenie lub zatykanie linii wyprostowej. Podczas łatwego pobierania krwi polisomnograficzne wykazały stabilne sygnały elektroencefalogramu, elektrogramu, elektromiogramu i elektrokardiogramu, bez oznak pobudzenia czy zmiany etapu snu. Trudne pobieranie krwi wiązało się z zaburzeniami elektroencefalogramu, elektrogramu i elektromiogramu oraz podwyższonym tętnem wskazującym na pobudzenie.

through-wall-blood-sampling-method-to-minimize-sleep-disruption

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Przewlekła kanulacja naczyń krwionośnych u szczura jest często wymagana w celu podawania substancji, pobierania próbek krwi w określonym czasie lub bezpośredniego pomiaru ciśnienia tętniczego u zwierząt świadomych. Przedstawiona zostanie technika kanulacji tętnicy udowej szczura oraz odpowiadające jej pomiary ciśnienia krwi u świadomego zwierzęcia.

Kaniulacja tętnicy i żyły udowej w celu pobierania krwi, podawania leków oraz pomiaru ciśnienia tętniczego i częstości akcji serca u zwierząt świadomych

Przedstawiamy metodologię przetwarzania krwi pełnej w celu uzyskania różnych składników do dalszej analizy. Zoptymalizowaliśmy uproszczony protokół, który umożliwia szybkie, wysokoprzepustowe jednoczesne przetwarzanie próbek krwi pełnej w warunkach nieklinicznych.

Szybkie frakcjonowanie i izolacja składników krwi pełnej w próbkach uzyskanych w warunkach środowiskowych

Tutaj prezentujemy protokół mający na celu poprawę jakości danych z domowych testów snu poprzez dostarczenie metody wzbogacania instrukcji poprzez ustrukturyzowaną wizytę uczestnika. Protokół ten obejmuje wdrożenie podręcznika edukacyjnego krok po kroku ze zdjęciami, aby zapewnić prawidłowe rozmieszczenie sprzętu.

Multimodalne monitorowanie snu w domu u osób starszych

Utrata snu i niewspółosiowość rytmu dobowego przyczyniają się do licznych wypadków i incydentów operacyjnych. Skuteczność środków zaradczych i projektów harmonogramu pracy mających na celu złagodzenie zmęczenia może być trudna do oceny w środowiskach operacyjnych. Ten manuskrypt podsumowuje podejście do zbierania danych dotyczących snu, okołodoby, zmęczenia i wydajności w złożonych środowiskach operacyjnych.

Gromadzenie danych dotyczących snu, okołodoby, zmęczenia i wydajności w złożonych środowiskach operacyjnych

Tutaj prezentujemy metodę badania rytmów dobowych w wydajności po dokładnej kategoryzacji uczestników do grup fenotypów okołodobowych na podstawie Monachijskiego Kwestionariusza Chronotypu, złotego standardu biomarkerów fazy okołodobowej i miar aktygraficznych.

Fenotypowanie okołodobowe człowieka i dobowe testy wydajności w świecie rzeczywistym

Obecny protokół opisuje prostą i efektywną metodę pobierania krwi z żyły podobojczykowej u szczurów. Umożliwia szybkie, terminowe i łatwe do zidentyfikowania pobieranie próbek bez znieczulenia oraz pozwala uzyskać wysokiej jakości krew dzięki powtarzalnemu pobieraniu próbek.

Powtarzające się pobieranie próbek krwi z żyły podobojczykowej przytomnego szczura

Obecny protokół opisuje prostą i efektywną metodę dynamicznego pobierania krwi z serca szczura w czasie rzeczywistym za pomocą techniki mikrodializy.

Dynamiczna ciągła ekstrakcja krwi z serca szczura za pomocą nieinwazyjnej techniki mikrodializy

Protokół pokazuje powtarzające się pobieranie płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi od szczurów z padaczką, wykonywane równolegle z ciągłym monitorowaniem wideo-elektroencefalogramu (EEG). Są one niezbędne do zbadania możliwych powiązań między zmianami w różnych cząsteczkach płynów ustrojowych a aktywnością napadową.

Pobieranie próbek płynu mózgowo-rdzeniowego i krwi z żyły ogonowej bocznej u szczurów podczas zapisów EEG

Pulsatywność hormonu luteinizującego (LH) jest cechą charakterystyczną funkcji rozrodczych. Opisujemy protokół zdalnej aktywacji określonych populacji neuronów związany z seryjnym automatycznym pobieraniem krwi. Technika ta pozwala na czasową modulację hormonalną, multipleksowanie i minimalizowanie efektów manipulacji na poziomie LH u przytomnych, swobodnie poruszających się i niezakłóconych zwierząt.

Zdalna aktywacja neuronów w połączeniu z automatycznym pobieraniem próbek krwi w celu indukcji i pomiaru krążącego hormonu luteinizującego u myszy

Tutaj prezentujemy kombinację skutecznych metod ograniczania szczurów i nakłuwania żył podobojczykowych, które umożliwiają szybkie, bezpieczne i wielokrotne pobieranie krwi u szczurów bez znieczulenia.

Pobieranie próbek krwi z żyły podobojczykowej u przytomnych szczurów

Poznaj metodę pobierania próbek krwi przez ścianę w celu minimalizacji zakłóceń snu. Technika ta umożliwia badanie rytmów dobowych i zdrowia kardiometabolicznego bez zakłócania naturalnych wzorców snu u uczestników.

Metoda pobierania próbek krwi przez ścianę, mająca na celu minimalizację zakłóceń snu w warunkach klinicznych

Przeglądaj więcej filmów