Name: Zabieg chirurgicznego wszczepienia implantu i konfiguracja okablowania do ciągłego, długoterminowego monitorowania EEG/EKG u królików (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-01-24T14:45:00.000+00:00
Duration: 8 min 36 s
Description: Poznaj metodę ciągłego monitorowania EEG/EKG u królików przy użyciu implantowanych elektrod i systemu okablowania. Technika umożliwia jednoczesną rejestrację aktywności mózgu i serca przez 24/7 w naturalnym środowisku zwierząt bez nadzoru.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Pragniemy podziękować Pradeep Dumpala, DVM PhD, Sarah Blair, MA, oraz personelowi hodowlanemu z SUNY Upstate Medical University za ich poświęcenie i uwagę poświęconą opiece nad królikami. NIH-NINDS (1R61NS133273), Wydział Farmakologii, Uniwersytet Medyczny SUNY

Continuous EEG/ECG Recordings in Rabbits Using Subdermal Electrode Placement

<ol><li>Bosinski, C., Wagner, K., Zhou, X., Liu, L., Auerbach, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multi-system+monitoring+for+identification+of+seizures%2C+arrhythmias+and+apnea+in+conscious+restrained+rabbits%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Multi-system monitoring for identification of seizures, arrhythmias and apnea in conscious restrained rabbits.</a> J Vis Exp. (169), e62256(2021).</li>
<li>Finlay, M. C., Lambiase, P. D., Ben-Simon, R., Taggart, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effect+of+mental+stress+on+dynamic+electrophysiological+properties+of+the+endocardium+and+epicardium+in+humans%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+Rhythm%22%5BJournal%5D)">Effect of mental stress on dynamic electrophysiological properties of the endocardium and epicardium in humans.</a> Heart Rhythm. 13 (1), 175-182 (2016).</li>
<li>Shen, M. J., Zipes, D. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Role+of+the+autonomic+nervous+system+in+modulating+cardiac+arrhythmias%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Res%22%5BJournal%5D)">Role of the autonomic nervous system in modulating cardiac arrhythmias.</a> Circulation Res. 114 (6), 1004-1021 (2014).</li>
<li>Xu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Juvenile+myoclonic+epilepsy+and+sleep%5BTitle%5D)+AND+%22Epilepsy+Behav%22%5BJournal%5D)">Juvenile myoclonic epilepsy and sleep.</a> Epilepsy Behav. 80, 326-330 (2018).</li>
<li>Bazil, C. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Seizure+modulation+by+sleep+and+sleep+state%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Seizure modulation by sleep and sleep state.</a> Brain Res. 1703, 13-17 (2019).</li>
<li>Ryan, J. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Heart+rate+and+autonomic+biomarkers+distinguish+convulsive+epileptic+vs.+Functional+or+dissociative+seizures%5BTitle%5D)+AND+%22Seizure%22%5BJournal%5D)">Heart rate and autonomic biomarkers distinguish convulsive epileptic vs. Functional or dissociative seizures.</a> Seizure. 111, 178-186 (2023).</li>
<li>Brunner, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanisms+of+cardiac+arrhythmias+and+sudden+death+in+transgenic+rabbits+with+long+QT+syndrome%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">Mechanisms of cardiac arrhythmias and sudden death in transgenic rabbits with long QT syndrome.</a> J Clin Invest. 118, 2246-2259 (2008).</li>
<li>Edwards, A. G., Louch, W. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Species-dependent+mechanisms+of+cardiac+arrhythmia%3A+A+cellular+focus%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Med+Insights+Cardiol%22%5BJournal%5D)">Species-dependent mechanisms of cardiac arrhythmia: A cellular focus.</a> Clin Med Insights Cardiol. 11, 1179546816686061(2017).</li>
<li>Kaha Sciences. , Ad instruments. 
 <a target="_blank" href="http://https://www.adinstruments.com/kaha?creative=524197312959&keyword=kaha%20telemetry&matchtype=e&network=g&device=c&gad_source=1&gclid=CjwKCAjw8fu1BhBsEiwAwDrsjJLJeUjMCwMe-kCxFg2QdpP94gaAOd8qS6UBE6iU-IdP2XGxMvbT7hoCDZAQAvD_BwE">http://https://www.adinstruments.com/kaha?creative=524197312959&keyword=kaha%20telemetry&matchtype=e&network=g&device=c&gad_source=1&gclid=CjwKCAjw8fu1BhBsEiwAwDrsjJLJeUjMCwMe-kCxFg2QdpP94gaAOd8qS6UBE6iU-IdP2XGxMvbT7hoCDZAQAvD_BwE</a> (2024).</li>
<li>Stellar telemetry. , TSE Systems. 
 <a target="_blank" href="https://www.tse-systems.com/products/stellar-implantable-telemetry/">https://www.tse-systems.com/products/stellar-implantable-telemetry/</a> (2024).</li>
<li>Dsi implantable telemetry. , DSI. 
 <a target="_blank" href="https://www.datasci.com/products/implantable-telemetry">https://www.datasci.com/products/implantable-telemetry</a> (2024).</li>
<li>Stellar telemetry. , Kruuse televet ii, telemetric ecg & holter. 
 <a target="_blank" href="https://kruuse.com/products/consultation/examination/ekg/kruuse-televet-ii-telemetric-ecg-holter">https://kruuse.com/products/consultation/examination/ekg/kruuse-televet-ii-telemetric-ecg-holter</a> (2024).</li>
<li>Mishra, V., Gautier, N. M., Glasscock, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+Video-EEG-ECG+monitoring+to+identify+neurocardiac+dysfunction+in+mouse+models+of+epilepsy%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Simultaneous Video-EEG-ECG monitoring to identify neurocardiac dysfunction in mouse models of epilepsy.</a> J Vis Exp. (131), e57300(2018).</li>
<li>eeg/emg systems. , Pinnacle technology. 
 <a target="_blank" href="https://www.pinnaclet.com/eeg-emg-systems.html">https://www.pinnaclet.com/eeg-emg-systems.html</a> (2024).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia. Część informacji zawartych w tym manuskrypcie znajduje się również w pracy magisterskiej pierwszej autorki (Laura Williams) za odpowiednią zgodą.

Przedstawiamy szczegółowy protokół generowania niestandardowej wiązki przewodów, własnej produkcji implantu oraz procedury sterylnego wszczepienia elektrod, przewodów i portu EEG/EKG. Taka konfiguracja ułatwia zbieranie ciągłych, wysokiej jakości zapisów EEG/EKG w sposób wydajny, bezpieczny i finansowo wykonalny. Protokół ten generuje system, w którym zarówno dane EEG, jak i EKG mogą być zbierane u królików bez konieczności stosowania środków ograniczających lub stałego nadzoru. Ciągłe, długoterminowe zapisy EEG i EKG uł...

Wcześniej opracowaliśmy protokół do zbierania ostrych (< 5 godzin) nagrań wideo/EEG/EKG od królików. Polega ona na użyciu dziewięciu podskórnych elektrod EEG i EKG, umieszczeniu królika w unieruchomieniu, a badacz ściśle monitoruje królika przez cały czas trwania zapisu1. Chociaż system ten zapewnia wysokiej jakości zapisy wideo/EEG/EKG, ma kilka ograniczeń. Zaburzenia rytmu serca, napady padaczkowe i inne nieprawidłowości w EEG/EKG mogą być wywoływane przez różne podłoża fizjologiczne i środowiskowe, więc zdarzenia te mogą zostać pominięte podczas prowadzenia zapisów przerywanych. W związku z tym ta platforma rejestracyjna nie ułatwia kompleksowej i dokładnej oceny funkcji elektrycznych układu nerwowo-sercowego w ciągu dnia, podczas różnych stanów fizjologicznych lub w normalnym środowisku utrzymania królików.
Ciągłe monitorowanie wideo/EEG/EKG jest ważne dla oceny funkcji elektrycznych serca i neuronów podczas różnych stanów fizjologicznych. Ułatwia dokładną ocenę częstości występowania i częstości występowania aktywności padaczkowej i arytmii, a także zgodności i progresji wieloukładowych zmian otaczających epizodyczne zdarzenia. Na przykład okołodobowe fluktuacje funkcji autonomicznych, a także zmiany autonomiczne zależne od stresu i aktywności, mają ogromny wpływ na tętno i wskaźniki EKG oraz mogą stanowić wyzwalacz arytmii2,3. W niektórych typach padaczki (np. młodzieńcza padaczka miokloniczna) napady są bardziej prawdopodobne podczas snu lub w ciągu 1-2 godzin od przebudzenia4. Dynamiczne zmiany aktywności elektrycznej w mózgu podczas snu mogą wpływać na podatność, pochodzenie i rozprzestrzenianie się napadów5.
Stres, aktywność i napady motoryczne mogą powodować artefakty mięśniowe i przemieszczenia elektrod, co wpływa na jakość i stabilność nagrań. W szczególności podczas badań pro-drgawkowych króliki doświadczają napadów mioklonicznych, klonicznych, tonicznych i kloniczno-tonicznych. Faza toniczna polega na mimowolnym wysunięciu szyjki, co może przesunąć elektrody szpilkowe, a tym samym przerwać sygnał w krytycznej fazie eksperymentu. W związku z tym tymczasowy system obejmujący elektrody sworzniowe ma krytyczne ograniczenia, którymi należy się zająć. Co więcej, ponieważ króliki są w zamknięciu, udokumentowanie pełnego zakresu objawów motorycznych jest trudne.
Dlatego ważne jest, aby opracować procedurę wszczepiania elektrod do długotrwałych, ciągłych i stabilnych nagrań wielosystemowych, gdy zwierzę znajduje się w swoim normalnym, nieskrępowanym środowisku. Ułatwi to szczegółową ocenę w szerokim zakresie stanów fizjologicznych i w odpowiedzi na czynniki środowiskowe. Będzie również cenny do uchwycenia rzadkich epizodycznych wydarzeń. Ponieważ konfiguracja nie wymaga obecności badacza podczas nagrywania, zwiększa wydajność i przepustowość platformy badawczej. Minimalizuje również częstotliwość przeszkadzania królikom przez ludzi. Wreszcie, ponieważ procedura ta pozwala zwierzętom pozostać w ich naturalnym środowisku inwentarskim przez cały czas nagrywania, poprawia jakość życia królików i poprawia ogólny dobrostan zwierząt.

<table><tbody><tr><td>Folia termokurczliwa 3:1 z klejem</td><td>N/A</td><td>Wirefly</td><td>Rurka poliolefinowa wyłożona klejem, zaprojektowana tak, aby skurczyć się o 1/3 średnicy po podgrzaniu. Odizoluj elektrody podczas łączenia przewodów i wtyczek, łącząc ze sobą elementy wiązki przewodów</td></tr><tr><td>Wkładki chłonne-dowolne</td><td></td><td></td> <td>Wkładki chłonne do zbierania płynów</td></tr><tr><td>BD E-Z Scrub 116 Chirurgiczna szczotka/gąbka do szorowania</td><td>371163</td><td>BD E-Z Scrub</td><td>3% PCMX Chirurgiczna szczotka/gąbka do szorowania Do szorowania przed operacją w celu uzyskania techniki aseptycznej</td></tr><tr><td>Stemple do biopsji</td><td>1315</td><td>ARGENT, McKesson</td><td>Okrągłe ostrze tnące 6 mm do okrągłego nacięcia portu</td></tr><tr><td>Buprenorfina</td> <td>-</td><td></td> <td>0,3 mg / ml Buprenorfina Do kontroli bólu pooperacyjnego</td></tr><tr><td>Łączniki doczołowe</td><td>X003C7S38P</td><td>SVAAR</td><td>Cynowany miedziany splot doczołowy 26-22 AWG Nieizolowane złącza doczołowe Łączenie drutów z włókna węglowego od elektrod do wtyczki</td></tr><tr><td>Cautery Pen</td><td>https://jorvet.com/product/cautery-kit-accessories/</td><td>Jorgensen Laboratories, Inc.</td><td>Ręczny długopis kauteryzacyjny Bovie do kontrolowania krwawienia</td></tr><tr><td>Tuleja przelotowa koncentrycznego</td><td>TULEJA KONCENTRYCZNA WH</td><td>Komercyjna elektryczna</td><td>tuleja z tworzywa sztucznego z otworem o średnicy wewnętrznej 6,9 mm i słupkiem 1 cm + słupek Port przewodowy</td></tr><tr><td>Kohezyjna folia</td><td>https://healthypets.com/vetone-cohesiant-wrap-blue-2x5yd/</td> <td>AmerisourceBergen</td><td>4 cale x 5 jardów samoprzylepna Do ochrony ran pooperacyjnych</td></tr><tr><td>Jednorazowy skalpel z uchwytem</td><td>https://www.securos.com/</td> <td>Securos Surgical AmerisourceBergen</td><td>Sterylne jednorazowe skalpele do wykonywania nacięć</td></tr><tr><td>Elektryczny pierścień</td><td></td> ślizgowy <td>Taidacent</td><td>High Speed Ball Przewodzący pierścień ślizgowy 12-drożne złącze obrotowe z pierścieniem kolektora 2A, elektryczny pierścień ślizgowy umożliwiający swobodny ruch zwierzęcia bez wiązania wiązki przewodów</td></tr><tr><td>Eye lublure pro</td><td>https://domespharma.us/eye-lube-pro-detailer-final-v6/</td> <td>Sentrx</td><td>Żel smarujący Zapobiega wysuszeniu/uszkodzeniu oczu podczas znieczulenia</td></tr><tr><td>GLUture</td><td>503763</td><td>World Precision Instrument</td><td>Miejscowy klej tkankowy Do zamykania miejsc nacięć&nbsp;</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>ANADA # 200-129</td><td>Isospire</td><td>Isoflurane Do znieczulenia</td></tr><tr><td>Alkohol izopropylowy</td><td>500205</td><td>VETone</td><td>70% alkohol izopropylowy Miejscowy środek antyseptyczny</td></tr><tr><td>Jet Liquid</td><td>1403</td><td>Lang Dental Mfg. Co., Inc.</td><td>Szybkoutwardzalna żywica akrylowa w płynie Płyn z żywicy akrylowej do uszczelniania tulei i przewodów do portu wyjściowego przewodu.&nbsp; Służy również do uszczelniania portu do skóry.</td></tr><tr><td>Jet Tooth Shade Powder</td><td>1420</td><td>Lang Dental Mfg. Co., Inc.</td><td>Szybko utwardzający się prowizoryczny proszek z żywicy akrylowej do koron i mostów. Dentystyczny proszek akrylowy do uszczelniania tulei i przewodów do portu wyjściowego przewodu. Służy również do uszczelniania portu do skóry.</td></tr><tr><td>Ketamina</td> <td>-</td><td></td> <td>100 mg / ml Ketamina do uspokojenia</td></tr><tr><td>Metalowe poszycie prysznica</td><td>HOS-960M</td><td>Waterpik</td><td>Ultra-elastyczny wymienny metalowy wąż prysznicowy, bardzo długi do ręcznych głowic prysznicowych, 96 cali, chromowany Metalowe poszycie wiązki przewodów</td></tr><tr><td>Zestaw elektrod MR Conditional/CT i zestaw przedłużający</td><td>MRQW32415</td><td>RhythmLink</td><td>System szybkozłączy z wtykami męsko-żeńskimi i 8 przewodami. Wtyczki używane do podłączenia wiązki przewodów portowych.&nbsp; Przewody i złącza DIN stosowane do wiązki przewodów</td></tr><tr><td>Nici monofilamentowe polipropylenowe niebieskie</td><td>P8665</td><td>SECUROPRO</td><td>3-0, FS-2, 18" szew odwrócony do cięcia. Zamknij wszelkie nacięcia chirurgiczne</td></tr><tr><td>retraktora</td><td>&lrm; 0487-013</td><td>West Coast Manufacturing Company</td><td>Przemysłowy chowany bęben z 48-calowym ze stali nierdzewnej, stalowym wspornikiem z tyłu, chromowanym przodem, 8 uncji wycofania, plastikowym zaciskiem węża. Wyciąga nadmiar wiązki przewodów do góry i od zwierzęcia Uszczelka</td></tr><tr><td>gumowa</td><td>E-3603 NSF-51</td><td>Saint Gobain</td><td>Przezroczysta rurka gumowa przycięta do szerokości 1,5 cm. Uszczelka do ochrony/konserwacji uszczelki.&nbsp;</td></tr><tr><td>Małe elektrody Webba</td><td>SWEBB1215</td><td>RhythmLink</td><td>6mm, płaski dysk [WEBB*] elektroda, chlorek srebra, drut, elektrody podskórne</td></tr><tr><td>Sterylne lateksowe rękawice chirurgiczne</td><td>10122</td> Sterylne rękawiczki lateksowe <td>AmerisourceBergen</td><td>, bezpudrowe, zakładane do sterylnej techniki chirurgicznej</td></tr><tr><td>Sterylny marker</td><td>DYNJSM01</td><td>Medline</td><td>Sterylny marker, Oznacz miejsca nacięcia/elektrody&nbsp;</td></tr><tr><td>Sterylne obłożenia chirurgiczne z klejem</td> <td>-</td> <td>dowolne</td><td>Sterylne obłożenia chirurgiczne z paskiem samoprzylepnym po jednej stronie, Stwórz stałe sterylne pole&nbsp;</td></tr><tr><td>Weterynaryjne maski anestezjologiczne</td> <td>-</td> <td>dowolne</td><td>plastikowe stożki z gumowymi uszczelkami do uszczelnienia na króliku ' twarz. Różne rozmiary. Dostarczanie znieczulenia wziewnego</td></tr><tr><td>Weterynaryjny peeling chirurgiczny Betadine</td><td>NDC 67618-154-16</td><td>Betadine</td><td>Powidon-jod, 7,5%, Antyseptyczny mydlinek do mycia skóry</td></tr><tr><td>Ksylazyna</td><td>-</td><td></td><td>-100 mg / ml Ksylazyna, do uspokojenia</td></tr></tbody></table>

zabieg chirurgicznego wszczepienia implantu i konfiguracja okablowania do ciągłego, długoterminowego monitorowania eeg/ekg u królików

Surgical Implant Procedure and Wiring Configuration for Continuous Long-Term EEG/ECG Monitoring in Rabbits

Wielosystemowe podejście, które obejmuje ciągłe gromadzenie zapisów elektroencefalogramu (EEG) i elektrokardiogramu (EKG), ułatwia kompleksową ocenę aktywności elektrycznej w mózgu i sercu, szczególnie prowadzącej do i otaczających epizodycznych zdarzeń. Opierając się na naszym poprzednim protokole, który ułatwia zbieranie przerywanych zapisów EEG/EKG od przytomnych, skrępowanych królików, opracowaliśmy protokół ciągłego zbierania zapisów EEG/EKG od nieskrępowanych królików. Ta nowa metoda umożliwia wysokiej jakości zapisy 24 godziny na dobę, 7 dni w tygodniu w klatce inwentarskiej, która rejestruje normalny zakres stanów fizjologicznych i umożliwia królikom swobodne poruszanie się, jedzenie, picie i sen. Umożliwia kompleksową ocenę występowania, częstości występowania i podatności na nieprawidłowości w zapisie EEG/EKG, drgawki, zaburzenia rytmu serca i nagłe zgony. Procedura ta polega na chirurgicznym umieszczeniu elektrod podskórnych oraz zaprojektowaniu i wyprodukowaniu solidnego systemu okablowania, który jest odporny na uszkodzenia przez króliki. Zabieg chirurgiczny obejmuje dwa nacięcia i podskórne tunelowanie dziewięciu elektrod i przewodów, które wychodzą przez specjalnie wykonany port. Zewnętrzne złącze mocuje się do wiązki przewodów, która zawiera elektryczny krętlik, który pozwala na swobodny zakres ruchu królika w całej klatce. Dodatkowo przewody są zamknięte w metalowej osłonie zawieszonej na zwijającym z sufitu klatki królika. Przewody są następnie podłączane do wzmacniacza/digitizera w celu uzyskania wysokiej jakości ciągłych zapisów EEG/EKG.

Stosując tę technikę chirurgiczną, nie odnotowano żadnych przypadków śmiertelności w trakcie ani po operacji. Istnieje ryzyko infekcji i niepełnego gojenia się rany, szczególnie jeśli królik będzie drapał lub gryzł miejsce nacięcia. Antybiotykoterapia przed i po operacji, przykrycie nacięcia suchym, sterylnym kawałkiem gazy oraz założenie królikowi kamizelki pomagają chronić miejsce operowane i umożliwiają lepsze gojenie. Wszystkie pomiary są przeprowadzane w standardowej klatce mieszkaln...

Badanie przedstawia protokół projektowania, produkcji i umieszczania nowatorskiego systemu ciągłego zapisu EEG/EKG u królików. Ten przewodowy system pozwala na ciągłe zapisy EEG/EKG z dziewięciu różnych elektrod na głowie i klatce piersiowej, co ułatwia kompleksową ocenę aktywności elektrycznej w mózgu i sercu.

Zabieg chirurgicznego wszczepienia implantu i konfiguracja okablowania do ciągłego, długoterminowego monitorowania EEG/EKG u królików

A multi-system approach that includes the continuous collection of electroencephalogram (EEG) and electrocardiogram (ECG) recordings facilitates a ...

Wykorzystując ciągłe zapisy EEG i EKG, celem badania jest jednoczesne monitorowanie aktywności elektrycznej zarówno w mózgu, jak i sercu. Stanowi to platformę, która umożliwia nam zbadanie wielosystemowej kaskady zdarzeń, które towarzyszą arytmii serca, napadom padaczkowym i ostatecznie prowadzą do nagłej śmierci. Ten system rejestracji pozyskuje EEG i EKG 24 godziny na dobę, 7 dni w tygodniu od wielu nieskrępowanych królików podczas różnych stanów fizjologicznych i otaczających rzadkich epizodycznych zdarzeń.Ułatwia ciągłe nagrania bez konieczności bezpośredniego nadzoru, jest przystępny cenowo, dostarcza natychmiastowe dane bezpośrednio do badacza i nie wymaga wymiany baterii należących do osób trzecich. Opracowanie niestandardowego, przewodowego zestawu do nagrywania zostało zbudowane, aby ułatwić królikowi swobodne poruszanie się w jego naturalnym środowisku mieszkaniowym. Przewody są obudowane, aby chronić je przed ugryzieniem.W ten sposób wiązka przewodów i tunelowanie wszystkich elektrod pod skórą umożliwiają ciągłe zapisy podczas różnych stanów fizjologicznych. Dzięki naszemu systemowi zgromadziliśmy wiele wysokiej jakości danych, które pozwalają nam badać rozpowszechnienie, substrat i czynniki wyzwalające nieprawidłową aktywność elektryczną w mózgu i sercu. Pozwala również ocenić zgodność między nieprawidłowościami w zapisie EEG i EKG, które mogą prowadzić do nagłej śmierci.Aby rozpocząć, zaopatrz się w wtyczkę uzupełniającą do portu alon z krętlikiem utrzymującym dziewięć wstępnie podłączonych przewodów z każdej strony. Za pomocą nożyc do drutu przytnij druty do pięciu centymetrów po mniejszej stronie obrotowej i zdejmij pięć milimetrów powłoki z drutu z końców. Nasuń dwucentymetrowy kawałek małej rurki termokurczliwej na każdy przewód wtyczki uzupełniającej.Dokładnie przewody. Dla każdego przewodu nasuń rurkę termokurczliwą na lutowane połączenia. Za pomocą opalarki obkurcz rurkę, aby bezpiecznie ją przymocować.Następnie przełóż długi kawałek dużej rurki termokurczliwej przez wtyczkę, przesuwając ją tak, aby pokryła całą długość wiązki przewodów. Po większej stronie obrotowej zdejmij pięć milimetrów powłoki drutu z końca każdego drutu za pomocą ściągacza izolacji i nasuń kawałek metalowej osłony o długości większej niż 45 centymetrów na wiązkę przewodów. Następnie przymocuj druty z większej strony krętlika do przeciętych drutów elektrody.Przymocuj małą rurkę termokurczliwą do każdego połączenia i użyj opalarki, aby zabezpieczyć rurkę na miejscu. Teraz nasuń metalową osłonę na nowo podłączone przewody i obróć. Po rozciągnięciu metalowego poszycia zaznacz położenie na nylonowym poszyciu w celach informacyjnych.Następnie nasuń jednocentymetrowy kawałek gumowej rurki o średnicy zewnętrznej 15 milimetrów na nylonowe poszycie i wiązkę przewodów. Umieść trzycentymetrowy kawałek dużej rurki termokurczliwej na gumowej rurce i przymocuj ją. Dodaj dwa kawałki rurki termokurczliwej o długości jednego centymetra na nierozciągniętą metalową powłokę w odległości 20 i 24 centymetrów od wtyczki.Aby rozpocząć, zmontuj całą wiązkę przewodów wymaganą do zabiegu. Po ustawieniu znieczulonego królika należy wykonać cztery małe znaki za pomocą sterylnego markera końcówki w zamierzonych miejscach umieszczenia elektrod elektrokardiograficznych lub EKG. Wykonaj podłużne nacięcie o długości od 2,5 do 3,5 centymetra na prawym boku królika.Za pomocą hemostatów wykonaj preparację brzusznie, aby utworzyć kieszeń podskórną, upewniając się, że kieszeń rozciąga się do czterech zaznaczonych miejsc. Używając bezigłowego końca nici monofilamentowego 3-0, zawiąż trzy zestawy węzłów chirurgicznych wokół podstawy elektrody EKG. Przełóż igłę przymocowaną do elektrody EKG przez kieszeń podskórną i wyjdź w odpowiednim zaznaczonym miejscu.Zastosuj delikatny ciąg, aby ustawić elektrodę EKG w zaznaczonym miejscu. Zwolnij trakcję i zbadaj palpacyjnie obszar, aby sprawdzić, czy elektroda pozostaje na swoim miejscu. Aby zabezpieczyć elektrodę, przełóż szew monofilamentowy 3-O i igłę przez skórę królika przylegającą do miejsca wyjścia elektrody.Przeciągnij szew częściowo przez skórę i zawiąż standardowy węzeł chirurgiczny. Od nacięcia na boku królika tępo rozetnij w kierunku dolnego kąta łopatek, a następnie do podstawy głowy. Po obróceniu królika do pozycji leżącej, użyj sterylnego markera na końcówce, aby umieścić pięć małych kropek w zamierzonych miejscach umieszczenia elektroencefalogramu lub elektrody EEG.Wykonaj małe poprzeczne nacięcie na głowie o wymiarach 1,5 centymetra między przednimi aspektami podstawy uszu. Tępo wypreparuj doogonowo i czaszkowo od nacięcia, aż utworzy się kieszeń podskórna. Włóż duże kleszcze do nacięcia na boku, a następnie rozłóż kleszcze i unieś skórę w miejscu oznaczonym dla portu.Wykorzystuje sześciomilimetrowe narzędzie do biopsji dziurkacza, aby utworzyć okrągły otwór w zaznaczonym miejscu. Po przykryciu wtyczki przewodu plastikiem lub gumą, przepchnij stronę wtyczki portu przez otwór wykonany przez biopsję dziurkacza. Następnie dociśnij skórę do podstawy portu, aby była napięta.Umieść gumową uszczelkę na porcie i dociśnij ją w dół, aż przylega do skóry. Wsuń nadmiar drutu do kieszeni podskórnej z tyłu i z boku. Teraz delikatnie zbliż skórę do siebie i zamknij wszystkie miejsca nacięć za pomocą prostych przerywanych szwów.Nałóż mieszankę akrylową na zewnętrzną stronę portu, tworząc małą kopułę, która uszczelnia miejsce portu ze skórą. Po zestaleniu się akrylu umieść sterylną gazę w miejscu nacięcia na boku i luźno owiń królika folią weterynaryjną. Przełóż wiązkę przewodów przez otwór znajdujący się w górnej środkowej części klatki królika.Podłącz złącza DIN do odpowiedniego urządzenia monitorującego i przymocuj zwijacza do górnej części klatki w pobliżu otworu na wiązkę przewodów. Przedłuż przewód zwijacza, który ma plastikowy klips na końcu i przymocuj zacisk do wiązki przewodów w miejscu między dwoma kawałkami rurki termokurczliwej. Na koniec podłącz wtyczkę wiązki przewodów do wtyczki na grzbiecie królika i nagraj sygnał z urządzenia monitorującego.Stabilne sygnały EEG i EKG zarejestrowano od trzymiesięcznego królika za pomocą przewlekle wszczepionych elektrod, które zachowywały swoje położenie bez odrzucenia lub infekcji. Zaobserwowano, że dane o wysokiej rozdzielczości dotyczące zmienności rytmu serca i wskaźników serca zmieniają się cyklicznie co 30 minut. Sygnały EEG i EKG uchwycone podczas pielęgnacji wykazały solidną stabilność sygnału pomimo ruchu królika, utrzymując wysoką jakość sygnału do analizy.Podanie leku prodrgawkowego wywołało wyraźne pęknięcia theta w potylicznych elektrodach EEG, które były rejestrowane wraz z prawidłowymi sygnałami EKG w rytmie zatokowym. Wyższe dawki pro-drgawek wywoływały napady, a EEG wykazywało pre-ictal theta bursts, przewlekłe artefakty i sygnały miesiączkowe ictal tonizujące. W EKG wykazano nieprawidłowości w załamku T wskazujące na niedotlenienie w okresie tonicznym, powracające do normy sprzed napadu padaczkowego.

surgical-implant-procedure-wiring-configuration-for-continuous-long

Research

JoVE Journal

Medicine

Medycyna

Ten film pokazuje procedurę wszczepienia elektrod EEG-EKG i dołączenia sond oddechowych do modelu królika w celu uzyskania i analizy zapisów jego sygnałów biologicznych.

Przygotowanie świadomego modelu królika do jednoczesnego wideo-EEG-EKG-oksymetrii-kapnografii do interwencji eksperymentalnych: procedura wszczepienia elektrod EEE-EKG i dołączenia sond oddechowych w modelu królika

W tym filmie demonstrujemy wielosystemową metodę monitorowania nieprawidłowości neurologicznych i krążeniowo-oddechowych podczas dożylnego wstrzykiwania leku wywołującego napady. Jednoczesne monitorowanie parametrów wideo EEG, EKG, oksymetrii i kapnografii pomaga zrozumieć zmiany fizjologiczne w czasie rzeczywistym związane z napadami padaczkowymi.

Wielosystemowe monitorowanie nieprawidłowości padaczkowych u królików: metoda jednoczesnego zapisu wideo EEG, EKG, kapnografii i oksymetrii podczas napadów indukowanych

Tutaj demonstrujemy użycie bezprzewodowej technologii umożliwiającej elektroencefalogram (EEG) w modelach chorób ludzkich noworodków gryzoni. Dzięki telemetrii nie ma obciążających połączeń, co pozwala na naturalne zachowania.

Długotrwałe, ciągłe monitorowanie EEG w modelach chorób człowieka u małych gryzoni przy użyciu systemu nadajników bezprzewodowych Epoch

Korzystając z jednoczesnego wideo-EEG-EKG-oksymetrii-kapnografii, opracowaliśmy metodologię oceny podatności modeli królików na rozwój prowokowanych arytmii i napadów. Ten nowatorski system rejestracji stanowi platformę do testowania skuteczności i bezpieczeństwa terapii i może uchwycić złożoną kaskadę zdarzeń wielosystemowych, których kulminacją jest nagła śmierć.

Wielosystemowe monitorowanie w celu identyfikacji napadów padaczkowych, zaburzeń rytmu serca i bezdechu u przytomnych, unieruchomionych królików

Tutaj prezentujemy metodę długoterminowej oceny wydajności i bezpieczeństwa miękkich matryc elektrod podtwardówkowych w modelu minipig, opisując metodę i narzędzia chirurgiczne, pooperacyjny rezonans magnetyczny, elektrofizjologię kory słuchowej, właściwości elektrochemiczne implantu oraz immunochemię pośmiertną.

Implantacja matrycy podtwardówkowej miękkiej elektrokortykografii (ECoG) i długotrwała rejestracja kory mózgowej u świnek miniaturowych

Mechanizmy nagłej niespodziewanej śmierci w epilepsji (SUDEP) są słabo poznane i trudne do przetłumaczenia z obecnych modeli. Transgeniczne króliki mogą oferować wgląd w te mechanizmy. Opisujemy metodę długoterminowych, ciągłych zapisów elektroencefalografii i elektrokardiografii u transgenicznych królików w celu oceny poważnych zdarzeń, które mogą prowadzić do śmierci.

Implantacja urządzeń telemetrycznych do elektroencefalogramu i elektrokardiogramu w zestawach dla noworodków

Opisano wysoce powtarzalny model zawału mięśnia sercowego u myszy z minimalnymi inwazyjnymi manipulacjami. Model można łatwo wykonać, co skutkuje wysoką odtwarzalnością i wskaźnikiem przeżycia. W związku z tym opisany model zmniejszy liczbę wymaganych zwierząt, zgodnie z zasadą 3R (Replacement, Refinement and Reduction).

Minimalnie inwazyjny zabieg chirurgiczny indukcji zawału mięśnia sercowego u myszy

Przedstawiamy zabieg chirurgiczny polegający na cewnikowaniu jelitowego pnia limfatycznego u nowonarodzonych świń w celu pobrania dużych ilości składników metabolizmu lipidów z odprowadzającej limfy.

Długotrwałe cewnikowanie pnia limfatycznego jelit i pobieranie limfy u nowonarodzonych świń

Tutaj prezentujemy protokół oceny funkcji krążeniowo-oddechowej u obudzonych świń, w spoczynku i podczas stopniowanych ćwiczeń na bieżni. Przewlekła aparatura pozwala na wielokrotne pomiary hemodynamiczne bez wpływu kardiodepresyjnych środków znieczulających.

Chirurgiczne umieszczanie cewników do długotrwałych testów wysiłkowych układu sercowo-naczyniowego u świń

Strategie wymiany nabłonka barwnikowego siatkówki (RPE) i terapia oparta na genach są brane pod uwagę w przypadku kilku stanów zwyrodnieniowych siatkówki. Do translacji klinicznej wymagane są modele zwierzęce z dużymi oczami do badania technik chirurgicznych stosowanych u pacjentów. W tym miejscu przedstawiamy model królika do chirurgii podsiatkówkowej ukierunkowany na przeszczep RPE, który jest wszechstronny i opłacalny.

Protokół krok po kroku dla chirurgii podsiatkówkowej u królików

Poznaj metodę ciągłego monitorowania EEG/EKG u królików przy użyciu implantowanych elektrod i systemu okablowania. Technika umożliwia jednoczesną rejestrację aktywności mózgu i serca przez 24/7 w naturalnym środowisku zwierząt bez nadzoru.

Zabieg chirurgicznego wszczepienia implantu i konfiguracja okablowania do ciągłego, długoterminowego monitorowania EEG/EKG u królików (Wideo) | JoVE Journal

Zabieg chirurgicznego wszczepienia implantu i konfiguracja okablowania do ciągłego, długoterminowego monitorowania EEG/EKG u królików

Przeglądaj więcej filmów