Skuteczna jednoosobowa technika pobierania próbek mleka od myszy laboratoryjnych
28 marca 2025
Ten artykuł opisuje, jak złożyć urządzenie, które może być używane do zbierania mleka od myszy laboratoryjnych. To urządzenie jest niedrogie, przenośne i umożliwia pobranie 0,1–0,5 ml mleka przez jedną przeszkoloną osobę. Dołączony jest również szczegółowy protokół doju.
Badanie to koncentruje się na ulepszeniu technik pobierania próbek mleka w badaniach nad laktacją, szczególnie u myszy. Przedstawiamy metodę, która pozwala przezwyciężyć wyzwania, takie jak utrata próbki, ograniczona objętość i pracochłonne procesy, oferując usprawnione rozwiązanie do zbierania mleka gryzoni i cenne narzędzie dla badaczy w tej dziedzinie. Jednym z największych wyzwań związanych z prowadzeniem badań na myszach są ich niewielkie rozmiary, zwłaszcza jeśli chodzi o pobieranie próbek z biopłynów, takich jak mleko.
Trudno jest uzyskać wystarczającą objętość bez łączenia próbek lub ręcznego zbierania ich przez dwie osoby, co w wielu przypadkach sprawia, że proces ten jest mniej praktyczny. Nasz protokół upraszcza odbiór mleka, umożliwiając jednej osobie pobranie wystarczającej ilości mleka w czasie krótszym niż 10 minut przy użyciu łatwo dostępnych narzędzi laboratoryjnych. W przeciwieństwie do innych metod, minimalizuje utratę próbki dzięki ciągłemu odsysaniu, wciągając mleko bezpośrednio do probówek zbiorczych, oszczędzając czas i zachowując objętość do analizy.
Aby rozpocząć, przymocuj jeden koniec rurki PVC o średnicy wewnętrznej 5/32 cala do pompy próżniowej i zabezpiecz nasadkę taśmą. Za pomocą prostego łącznika z zadziorami podłącz drugi koniec rurki PVC o średnicy wewnętrznej 5/32 cala do rurki PVC o średnicy wewnętrznej 1/8 cala. Następnie użyj łącznika, aby przymocować drugi koniec rurki PVC o średnicy wewnętrznej 1/8 cala do igły podskórnej o średnicy 18.
Za pomocą nożyczek odetnij koniec końcówki pipety P200 na około 0,2 centymetra, aby utworzyć większy otwór. Włóż zmodyfikowaną końcówkę pipety P200 przez otwór korka przegrody tak, aby końcówka była skierowana do góry, a następnie przymocuj zatyczkę do przegrody do sterylnej probówki zbiorczej. Za pomocą igły podskórnej o rozmiarze 18 nakłuć korek przegrody nosowej.
Teraz włącz pompę próżniową, aby sprawdzić ciśnienie ssania, kładąc palec w rękawiczce na otworze końcówki pipety W dniu doju oddziel matkę od jej młodych, aby umożliwić gromadzenie się mleka w gruczołach. Utrzymuj szczenięta w cieple w gnieździe. Po znieczuleniu tamy mocno ściśnij stopę tamy, aby ocenić percepcję doznań i bólu przez zwierzę.
Następnie nałóż weterynaryjną maść okulistyczną na oczy matki, aby zapobiec wysuszeniu podczas znieczulenia. Umieść znieczuloną koferdam na plecach na solidnej powierzchni roboczej. Delikatnie oczyść obszar sutka zapory sterylną chusteczką nasączoną alkoholem.
Podawać jedną do dwóch jednostek oksytocyny dootrzewnowo między czwartą a piątą parą strzyków po stronie jamy otrzewnej, która nie została wstrzyknięta. Delikatnie ocieraj się o okolice szyi zapory ręką niedominującą. Następnie ściśnij tkankę sutkową od podstawy do czubka smoczka, aż pojawi się kropla mleka.
Włącz urządzenie próżniowe, naciskając przycisk zasilania. Aby rozpocząć dój, delikatnie przyłóż odwróconą końcówkę pipety P200 do smoczka i delikatnym ruchem pociągającym, aby wyciągnąć mleko. Wydoić wszystkie strzyki, aż zbierze się wystarczająca ilość mleka.
Następnie włóż znieczuloną koparację z powrotem do klatki i upewnij się, że jest ona utrzymywana w cieple w okresie rekonwalescencji po znieczuleniu. Od 0,1 do 0,5 mililitra mleka można wygodnie pobrać z każdej matki w mniej niż 10 minut. Stężenie tłuszczu mlecznego znacznie wzrosło z 174,4 gramów na litr w drugim dniu po porodzie do 224,4 gramów na litr w 10 dniu po porodzie.
Laktoza i całkowite stężenie białka nie wykazały istotnych różnic między drugim dniem po porodzie a 10. dniem po porodzie. Względna obfitość alfa-S1-kazeiny i kwaśnego białka serwatkowego była wyższa w mleku po porodzie w 10. dniu w porównaniu z mlekiem po porodzie w drugim dniu, podczas gdy beta-kazeina była bardziej obfita w mleku po porodzie w drugim dniu niż w mleku po 10. dniu. Intensywności pasm białkowych na żelu do elektroforezy wizualnie potwierdziły różnice we względnej obfitości poszczególnych białek mleka.
Przegląd
Niniejsze badanie dotyczy wyzwań związanych z pobieraniem próbek mleka w badaniach laktacji u myszy, dostarczając uproszczoną metodę, która pozwala jednej osobie na efektywne zbieranie wystarczających objętości. Protokół ulepsza istniejące techniki poprzez minimalizowanie utraty próbek i zmniejszenie intensywności pracy.
Kluczowe elementy badania
Obszar badań
- Badania laktacji
- Zbieranie mleka gryzoni
- Techniki pobierania biopłynów
Tło
- Pobieranie mleka od myszy stanowi unikalne wyzwanie ze względu na ich niewielką wielkość.
- Tradycyjne metody często wymagają wielu osób i prowadzą do utraty próbek.
- Skuteczne techniki są kluczowe dla dokładnych wyników badań.
Stosowane metody
- Zastosowanie urządzenia próżniowego do ciągłego ssania podczas pobierania
- Myszy jako model biologiczny
- Kombinacja standardowych narzędzi laboratoryjnych do montażu i zastosowania
Główne wyniki
- Ułatwione zbieranie 0,1–0,5 mL mleka w mniej niż 10 minut.
- Znaczące zmiany w stężeniu tłuszczu w mleku obserwowane w czasie.
- Różnice w względnej obfitości białek mleka w różnych dniach po porodzie.
Wnioski
- To badanie pokazuje praktyczne podejście do zbierania mleka od myszy, które wspomaga badania laktacji.
- Relevancja metody polega na jej potencjale poprawy dokładności danych w pobieranie biopłynów.
Często zadawane pytania
Executive Industry Relevance
Efficient and reproducible milk sampling from laboratory mice is critical for lactation and neonatal development studies, enabling quantitative analysis of milk composition under experimental conditions. This single-person technique addresses longstanding bottlenecks in biofluid collection, supporting robust data generation and reducing operational complexity in early discovery workflows. The method enhances predictive confidence in nutritional and developmental studies by ensuring sample integrity and standardization.
Strategic Applications in Biopharma R&D
Early Discovery & Target Validation
- Enables precise interrogation of lactation biology and nutritional pathways in rodent models.
- Supports functional validation of experimental manipulations affecting milk composition.
- Facilitates mechanistic de-risking by providing reliable, quantitative milk samples for downstream analysis.
Screening & Assay Development
- Prepares validated milk samples for standardized macronutrient and protein assays.
- Improves assay reproducibility by minimizing sample loss and operator variability.
- Enables scalable, single-operator workflows for high-throughput experimental designs.
Translational & Preclinical Research
- Aligns rodent milk composition studies with translational biomarker discovery in neonatal development.
- Supports continuity from basic research to preclinical validation of nutritional interventions.
- Reduces biological risk by ensuring consistent sample quality across experimental cohorts.
Pipeline & Workflow Integration
This technique integrates into the early discovery and preclinical continuum, bridging hypothesis-driven research and quantitative assay development in rodent models.
- Discovery Biology: Provides robust sample collection for hypothesis testing of lactation and developmental pathways.
- Screening: Delivers reproducible, quantitative milk samples for macronutrient and protein analysis.
- Analytics: Enables direct comparison of milk composition across experimental timepoints and conditions.
- Translational Research: Supports alignment of rodent data with human neonatal nutrition studies when relevant.
- Enterprise Reuse: Offers a standardized, scalable protocol adaptable across research teams and studies.
Operational & Enterprise Impact
- Scientific Value: Increases predictive confidence and reduces mechanistic ambiguity in lactation research.
- Operational Value: Streamlines workflows with single-operator efficiency and minimizes sample loss.
- Strategic Value: Improves go/no-go decision-making by enabling reliable, quantitative data generation.
- Portfolio Impact: Supports risk-adjusted prioritization of nutritional and developmental research programs.
Implementation Considerations
- Requires technical proficiency in rodent handling and anesthesia.
- Needs access to basic laboratory equipment such as vacuum pumps, tubing, and collection tubes.
- Demands cross-team standardization for reproducibility in multi-site studies.
- May require adaptation for use in other small animal models.
- Sample volume limitations inherent to mouse physiology must be considered in experimental design.
