Obrazowanie transferu energii rezonansu Förstera w żywych komórkach metabolicznie regulowanej dynamiki aktywacji Akt w komórkach HepG2

Heterogeniczność komórkowa jest przeszkodą w dokładnym opisie zawiłości dynamiki komórkowej, które są zasadniczo uśrednione. Dlatego jesteśmy tutaj, aby obrazować pojedyncze komórki. Ostatnie osiągnięcia w zakresie genetycznie kodowanych bioczujników FRET poprawiły specyficzność i zrewolucjonizowały śledzenie Akt w czasie rzeczywistym w komórkach, co ma zasadnicze znaczenie dla zrozumienia heterogenetyki i opracowania spersonalizowanych terapii lekowych.

Rak i cukrzyca przechodzą przez złożone szlaki metaboliczne. Aby zdekodować biozłożoność szlaku sygnalizacji insuliny w nowotworach, używamy najnowocześniejszego obrazowania FRET z żywymi komórkami w rozdzielczości pojedynczej komórki. Odkryliśmy, że optymalizacja mikroskopu konfokalnego, konfiguracji sprzętu i oprogramowania wraz z precyzyjnym dostrojeniem mocy lasera i dostosowaniem wzmocnienia detektora mają kluczowe znaczenie dla zminimalizowania wszelkich szumów i przesłuchów spektralnych w sygnałach FRET.