Name: Innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej do przekształcania tłuszczu w specjalistyczne składniki (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-07-11T12:40:00.000+00:00
Duration: 4 min 36 s
Description: Poznaj innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej w celu uzyskania wyspecjalizowanych komponentów o zwiększonej zawartości kolagenu. Ta metoda poprawia jakość przeszczepów tłuszczowych poprzez precyzyjne oddzielenie frakcji komórkowych i macierzowych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Ta praca była wspierana przez Narodową Fundację Nauk o Przyrodzie w Chinach (granty 81801932, 81901976, 81971852, 81772101 i 81901975).

To badanie zostało zatwierdzone przez Komisję Oceny Etyki w Szpitalu Nanfang w Kantonie, Chiny. Tkankę tłuszczową pobrano od zdrowych dawców, którzy wyrazili pisemną świadomą zgodę na udział w badaniu. Wszystkie eksperymenty na zwierzętach zostały zatwierdzone przez Instytucjonalny Komitet ds. Opieki i Wykorzystania Zwierząt w Szpitalu Nanfang i przeprowadzone zgodnie z wytycznymi Narodowej Rady Zdrowia i Badań Medycznych (Chiny).
1. Przygotowanie tłuszczu
<ol>
	<li>Znieczulenie ogólne i infiltracja płynu tumescencyjnego
	<ol>
		<li>Umieścić pacjenta w znieczuleniu ogólnym. Podczas fazy indukcji dożylnej należy podać kombinację propofolu (2 mg/kg), fentanylu (1,5 μg/kg) i rokuronium (0,6 mg/kg), a następnie utrzymać głębokość znieczulenia za pomocą sewofluranu (1,5%) i remifentanylu (0,1 μg/kg/min). W trakcie zabiegu dynamicznie dostosowuj plan znieczulenia w oparciu o monitoring BIS (wartość docelowa 40-60), parametry krążenia (MAP >65 mmHg) orazEtCO2 (35-45 mmHg).</li>
		<li>Ułożyć pacjenta w pozycji leżącej na plecach z wyściółką ochronną w punktach nacisku i dokładnie zdezynfekować miejsce operacyjne alkoholem chlorheksydyny. Przestrzegaj protokołów aseptycznych, aby zminimalizować ryzyko infekcji.</li>
		<li>Naciekać tkankę podskórną obszaru liposukcji (takiego jak brzuch lub udo) płynem tumescencyjnym zawierającym 0,06% lidokainy i 0,001% epinefryny za pomocą strzykawki o pojemności 20 ml. Utrzymuj stosunek nacieku 2:1 do przewidywanej objętości ekstrakcji tłuszczu, dostosowując całkowitą objętość wstrzyknięcia zgodnie ze specyficznymi cechami anatomicznymi pacjenta i wielkością leczonego obszaru.</li>
		<li>Sprawdź efekt znieczulający, aby potwierdzić pełną infiltrację płynu tumescencyjnego. Przed kolejnym krokiem nakłuj lub uszczypnij obszar liposukcji. Jeśli pacjent odczuwa tylko lekki ucisk, naciek jest wystarczający, co umożliwia gromadzenie tłuszczu przy mniejszym dyskomforcie.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Zbiór tłuszczu
	<ol>
		<li>Do zbierania tłuszczu należy użyć kaniuli wieloportowej 3 mm z ostrymi otworami bocznymi o średnicy 1 mm. Wykonaj operację przy ciśnieniu ssania -0,75 atm, aby zminimalizować uszkodzenia tkanki tłuszczowej i zapewnić integralność i żywotność pobranych komórek tłuszczowych.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Preparat tłuszczu Coleman
	<ol>
		<li>Pozostawić zebrany tłuszcz, który umieszcza się w strzykawce o pojemności 60 ml, aby odstawił się na 10 minut, aby płynne składniki osiadły na dnie pojemnika.</li>
		<li>Ostrożnie wylej płynną część na dole i zbierz górną, stosunkowo czystą warstwę tłuszczu, aby usunąć zanieczyszczenia, takie jak krew i płyn tumescencyjny.</li>
		<li>Zatrzymany tłuszcz należy zatrzymać w 60-mililitrowej strzykawce i odwirować przy 1,200 x g przez 3 minuty w temperaturze pokojowej w celu dalszej stratyfikacji składników.</li>
		<li>Po odwirowaniu ponownie wyrzuć płynną część na dnie. Zachowaj górną warstwę tłuszczu, która jest zdefiniowana jako tłuszcz Colemana, w 60- 
		strzykawka mililitrowa.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Pobieranie próbek tłuszczu o wysokiej i niskiej gęstości
	<ol>
		<li>Przenieś górne 2/3 tłuszczu Colemana do probówki o pojemności 20 ml, definiując go jako tłuszcz o niskiej gęstości (LDF).</li>
		<li>Przenieś pozostałą dolną 1/3 tłuszczu Colemana do innej probówki o pojemności 20 ml, definiując go jako tłuszcz o dużej gęstości (HDF).</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Ekstrakcja komponentów
<ol>
	<li>Preparat kompleksu macierzy tłuszczowej (AMC)
	<ol>
		<li>Przepuścić HDF przez urządzenie filtrujące z tuleją i trzema sitami wewnętrznymi (odstęp między sitkami filtracyjnymi 1,5 mm).</li>
		<li>Zbierz przyczepioną tkankę i odwodnij ją w worku filtrującym o oczkach 100 otoczonym gazą. Określ punkt końcowy, obserwując tkankę, gdy jest ona zbierana kleszczami; Gdy po podniesieniu kleszczy nie spadną żadne widoczne kropelki płynu, oznacza to, że odwodnienie osiągnęło pożądany efekt. Produkt końcowy został zidentyfikowany jako AMC. Zachowaj pozostałą płytę HDF do wykorzystania w przyszłości.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Ekstrakcja żelu z frakcji zrębu naczyniowego (SVF)
	<ol>
		<li>Emulgacja mechaniczna LDF: Emulgować LDF mechanicznie, przepuszczając go między dwie strzykawki połączone złączem Luer-Lok typu żeńskie-żeńskie o średnicy wewnętrznej 1,4 mm z szybkością 10 ml/s przez 1 min.</li>
		<li>Odwirować zemulgowany LDF o stężeniu 1 600 x g przez 3 minuty. Zebrać środkową warstwę, która przypomina substancję podobną do żelu, jako żel SVF.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Produkcja fragmentów kolagenu tłuszczowego (ACF)
	<ol>
		<li>Proszkowanie LDF: Sproszkować LDF w specjalistycznym ekstraktorze ACF z prędkością 30 000 obr./min przez 60 s, aby uzyskać zawiesinę tłuszczu.</li>
		<li>Filtrowanie: Przenieść zawiesinę tłuszczu do strzykawek o pojemności 20 ml. Podłącz go do filtra jednokierunkowego 0,25 mm, popchnij tłok i zbierz filtrat do kolejnej strzykawki o pojemności 20 ml. Następnie podłącz tę strzykawkę do jednokierunkowego filtra 0,15 mm, ponownie popchnij tłok i zbierz końcowy filtrat do trzeciej strzykawki o pojemności 20 ml. Następnie odwirować zawiesinę tłuszczu o sile 3 000 x g przez 3 minuty.</li>
		<li>Zbierz stałą część na dole jako ACF.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
3. Testowanie składników tłuszczu
<ol>
	<li>Badanie sztywności
	<ol>
		<li>Stosować urządzenie z czujnikiem do pomiaru siły o zakresie od 0 N do 225 N i siłownikiem elektromagnetycznym pozwalającym na przesuw osiowy 6 mm.</li>
		<li>Zaciskać każdą próbkę tkanki (AMC i tłuszcz Colemana) i zastosować napięcie wstępne 25 - 30 N, aby wyeliminować luzy i spowodować wydłużenie. Ustaw obciążenie rampy na 8 mm/s i zapisz elektronicznie najwyższą siłę osiągniętą przed pęknięciem próbki. Następnie urządzenie oblicza sztywność tkanki.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Barwienie hematoksyliną i eozyną (HE) oraz Massonem
	<ol>
		<li>Utrwal próbki w 4% paraformaldehydzie, aby zachować ich strukturę. Odwodnić w gradiencie etanolu, aby usunąć wodę, która jest niezbędna do późniejszego procesu zatapiania.</li>
		<li>Zanurz próbki w parafinie, w procesie, który ułatwia cięcie próbek na cienkie kawałki. Następnie podziel próbki zatopione w parafinie.</li>
		<li>Barwić skrawki za pomocą plam trichromowych HE i Massona. Zbadaj próbki za pomocą skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM).</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Badania transplantacyjne
	<ol>
		<li>Wybierz 70 nagich myszy o poziomie SPF dla zdrowia, o wadze 15 - 18 g i w wieku 4 - 6 tygodni (niezależnie od płci). Myszy należy trzymać zgodnie z wytycznymi instytucjonalnymi, trzymać w indywidualnych klatkach z 12-godzinnym cyklem światła/ciemności i zaopatrywać w standardowe pożywienie i wodę ad libitum.</li>
		<li>Znieczulić myszy przez dootrzewnowe wstrzyknięcie pentobarbitalu sodu (50 mg/kg). Sprawdź głębokość znieczulenia za pomocą odruchu szczypania palców u stóp. Nałóż maść do oczu, aby zapobiec wysuszeniu.</li>
		<li>Wstrzyknąć 0,3 ml przygotowanego AMC lub tkanki tłuszczowej (tłuszcz Colemana w grupie kontrolnej) do tkanek podskórnych każdej myszy, służąc jako linia bazowa przeszczepu tłuszczu. Monitoruj zwierzęta, aż odzyskają przytomność, a następnie przenieś je do klatek.</li>
		<li>W dniach 7, 14, 30, 60 i 90 po szczepieniu zbierz przeszczepy, ostrożnie oddzielając je od otaczającej tkanki. Zmierz ich objętość. Szybkość retencji przeszczepów określono w następujący sposób: 
		wskaźnik retencji (%) = objętość przeszczepu w czasie zbioru/objętość tłuszczu iniekcyjnego (tutaj 0,3 ml) x 100%.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol><li>Simonacci, F., Bertozzi, N., Grieco, M. P., Grignaffini, E., Raposio, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Procedure%2C+applications%2C+and+outcomes+of+autologous+fat+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Med+Surg%22%5BJournal%5D)">Procedure, applications, and outcomes of autologous fat grafting.</a> Ann Med Surg. 20, 49-60 (2017).</li>
<li>Strong, A. L., Cederna, P. S., Rubin, J. P., Coleman, S. R., Levi, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Current+State+of+Fat+Grafting%3A+A+Review+of+Harvesting%2C+Processing%2C+and+Injection+Techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">The Current State of Fat Grafting: A Review of Harvesting, Processing, and Injection Techniques.</a> Plast Reconstr Surg. 136 (4), 897-912 (2015).</li>
<li>Evans, B. G. A., Gronet, E. M., Saint-Cyr, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((How+Fat+Grafting+Works%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg+Glob+Open%22%5BJournal%5D)">How Fat Grafting Works.</a> Plast Reconstr Surg Glob Open. 8 (7), e2705(2020).</li>
<li>Costanzo, D., Romeo, A., Marena, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Autologous+Fat+Grafting+in+Plastic+and+Reconstructive+Surgery%3A+An+Historical+Perspective%5BTitle%5D)+AND+%22Eplasty%22%5BJournal%5D)">Autologous Fat Grafting in Plastic and Reconstructive Surgery: An Historical Perspective.</a> Eplasty. 22, e4(2022).</li>
<li>Suszynski, T. M., Sieber, D. A., Van Beek, A. L., Cunningham, B. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Characterization+of+adipose+tissue+for+autologous+fat+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Aesthetic+Surg+J%22%5BJournal%5D)">Characterization of adipose tissue for autologous fat grafting.</a> Aesthetic Surg J. 35 (2), 194-203 (2015).</li>
<li>He, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Human+adipose+liquid+extract+induces+angiogenesis+and+adipogenesis%3A+a+novel+cell-free+therapeutic+agent%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Human adipose liquid extract induces angiogenesis and adipogenesis: a novel cell-free therapeutic agent.</a> Stem Cell Res Ther. 10 (1), 252(2019).</li>
<li>Li, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+matrix+complex%3A+a+high-rigidity+collagen-rich+adipose-derived+material+for+fat+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Aging%22%5BJournal%5D)">Adipose matrix complex: a high-rigidity collagen-rich adipose-derived material for fat grafting.</a> Aging. 13 (11), 14910-14923 (2021).</li>
<li>Zhu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improving+Low-Density+Fat+by+Condensing+Cellular+and+Collagen+Content+through+a+Mechanical+Process%3A+Basic+Research+and+Clinical+Applications%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Improving Low-Density Fat by Condensing Cellular and Collagen Content through a Mechanical Process: Basic Research and Clinical Applications.</a> Plast Reconstr Surg. 148 (5), 1029-1039 (2021).</li>
<li>Yao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+Extracellular+Matrix%2FStromal+Vascular+Fraction+Gel%3A+A+Novel+Adipose+Tissue-Derived+Injectable+for+Stem+Cell+Therapy%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Adipose Extracellular Matrix/Stromal Vascular Fraction Gel: A Novel Adipose Tissue-Derived Injectable for Stem Cell Therapy.</a> Plast Reconstr Surg. 139 (4), 867-879 (2017).</li>
<li>Yao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+Stromal+Vascular+Fraction+Gel+Grafting%3A+A+New+Method+for+Tissue+Volumization+and+Rejuvenation%5BTitle%5D)+AND+%22Dermatol+Durg%22%5BJournal%5D)">Adipose Stromal Vascular Fraction Gel Grafting: A New Method for Tissue Volumization and Rejuvenation.</a> Dermatol Durg. 44 (10), 1278-1286 (2018).</li>
<li>Jin, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+Adipose-Derived+Injectable+Sustained-Release+Collagen+Scaffold+of+Adipokines+Prepared+Through+a+Fast+Mechanical+Processing+Technique+for+Preventing+Skin+Photoaging+in+Mice%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Cell+Dev+Biol%22%5BJournal%5D)">An Adipose-Derived Injectable Sustained-Release Collagen Scaffold of Adipokines Prepared Through a Fast Mechanical Processing Technique for Preventing Skin Photoaging in Mice.</a> Front Cell Dev Biol. 9, 722427(2021).</li>
<li>Cai, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose+Component+Transplantation%3A+An+Advanced+Fat-Grafting+Strategy+for+Facial+Rejuvenation%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Adipose Component Transplantation: An Advanced Fat-Grafting Strategy for Facial Rejuvenation.</a> Plast Reconstr Surg. 153 (3), 549e-554e (2024).</li>
<li>Demirel, O., Aköz Saydam, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Assessment+of+the+Causes+of+Differences+in+Centrifugation+Protocols+as+a+Fat-Processing+Technique%3A+A+Systematic+Literature+Review%5BTitle%5D)+AND+%22Aesthetic+Plast+Surg%22%5BJournal%5D)">Assessment of the Causes of Differences in Centrifugation Protocols as a Fat-Processing Technique: A Systematic Literature Review.</a> Aesthetic Plast Surg. 45 (3), 1242-1265 (2021).</li>
<li>Neal, M. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Cold+Stored+Platelet+Transfusion+Following+Traumatic+Brain+Injury%3A+A+Randomized+Clinical+Trial%5BTitle%5D)+AND+%22Ann+Surgery%22%5BJournal%5D)">Early Cold Stored Platelet Transfusion Following Traumatic Brain Injury: A Randomized Clinical Trial.</a> Ann Surgery. , (2025).</li>
<li>Czako, S., Prochaska, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Red+blood+cell+transfusion+clinical+decision+support%3A+A+scoping+review+of+guideline+adherence+and+clinical+impact%5BTitle%5D)+AND+%22Transfusion%22%5BJournal%5D)">Red blood cell transfusion clinical decision support: A scoping review of guideline adherence and clinical impact.</a> Transfusion. 65 (2), 410-419 (2025).</li>
<li>Warner, D., Duncan, H., Gudsoorkar, P., Anand, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Indications+and+complications+associated+with+centrifuge-based+therapeutic+plasma+exchange+-+a+retrospective+review%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Nephrol%22%5BJournal%5D)">Indications and complications associated with centrifuge-based therapeutic plasma exchange - a retrospective review.</a> BMC Nephrol. 26 (1), 87(2025).</li>
<li>Yang, R., Song, Z., Li, S., Wang, J., Liang, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analysis+of+the+Volume+of+the+Liposuction-Derived+Adipose+Tissue+in+Clinical+Application%5BTitle%5D)+AND+%22J+Craniofacial+Surg%22%5BJournal%5D)">Analysis of the Volume of the Liposuction-Derived Adipose Tissue in Clinical Application.</a> J Craniofacial Surg. , (2025).</li>
<li>Baniameri, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tissue+Engineering+3D-Printed+Scaffold+Using+Allograft%2FAlginate%2FGelatin+Hydrogels+Coated+With+Platelet-Rich+Fibrin+or+Adipose+Stromal+Vascular+Fraction+Induces+Osteogenesis+In+Vitro%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cell+Physiol%22%5BJournal%5D)">Tissue Engineering 3D-Printed Scaffold Using Allograft/Alginate/Gelatin Hydrogels Coated With Platelet-Rich Fibrin or Adipose Stromal Vascular Fraction Induces Osteogenesis In Vitro.</a> J Cell Physiol. 240 (1), e31497(2025).</li>
<li>Karna, E., Szoka, L., Huynh, T. Y. L., Palka, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proline-dependent+regulation+of+collagen+metabolism%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Mol+Life+Sci%22%5BJournal%5D)">Proline-dependent regulation of collagen metabolism.</a> Cell Mol Life Sci. 77 (10), 1911-1918 (2020).</li>
<li>Ricard-Blum, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+collagen+family%5BTitle%5D)+AND+%22Cold+Spring+Harb+Perspect+Biol%22%5BJournal%5D)">The collagen family.</a> Cold Spring Harb Perspect Biol. 3 (1), a004978(2011).</li>
<li>Ferrara, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((VEGF+and+the+quest+for+tumour+angiogenesis+factors%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Rev+Cancer%22%5BJournal%5D)">VEGF and the quest for tumour angiogenesis factors.</a> Nat Rev Cancer. 2 (10), 795-803 (2002).</li>
<li>Harraz, M. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((SOD1+mutations+disrupt+redox-sensitive+Rac+regulation+of+NADPH+oxidase+in+a+familial+ALS+model%5BTitle%5D)+AND+%22J+Clin+Invest%22%5BJournal%5D)">SOD1 mutations disrupt redox-sensitive Rac regulation of NADPH oxidase in a familial ALS model.</a> J Clin Invest. 118 (2), 659-670 (2008).</li>
<li>Guan, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+High-Quality+Fat+Based+on+Precision+Centrifugation+in+Lipoaspirates+Using+Marker+Floats%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Identification of High-Quality Fat Based on Precision Centrifugation in Lipoaspirates Using Marker Floats.</a> Plast Reconstr Surg. 146 (3), 541-550 (2020).</li>
<li>Qiu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Identification+of+the+Centrifuged+Lipoaspirate+Fractions+Suitable+for+Postgrafting+Survival%5BTitle%5D)+AND+%22Plast+Reconstr+Surg%22%5BJournal%5D)">Identification of the Centrifuged Lipoaspirate Fractions Suitable for Postgrafting Survival.</a> Plast Reconstr Surg. 137 (1), 67e-76e (2016).</li>
<li>Feng, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mechanical+process+prior+to+cryopreservation+of+lipoaspirates+maintains+extracellular+matrix+integrity+and+cell+viability%3A+evaluation+of+the+retention+and+regenerative+potential+of+cryopreserved+fat-derived+product+after+fat+grafting%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">Mechanical process prior to cryopreservation of lipoaspirates maintains extracellular matrix integrity and cell viability: evaluation of the retention and regenerative potential of cryopreserved fat-derived product after fat grafting.</a> Stem Cell Res Ther. 10 (1), 283(2019).</li>
<li>Comerci, A. J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Risks+and+Complications+Rate+in+Liposuction%3A+A+Systematic+Review+and+Meta-Analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Aesth+Surg+J%22%5BJournal%5D)">Risks and Complications Rate in Liposuction: A Systematic Review and Meta-Analysis.</a> Aesth Surg J. 44 (7), Np454-Np463 (2024).</li>
<li>Crisan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+perivascular+origin+for+mesenchymal+stem+cells+in+multiple+human+organs%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+stem+cell%22%5BJournal%5D)">A perivascular origin for mesenchymal stem cells in multiple human organs.</a> Cell stem cell. 3 (3), 301-313 (2008).</li>
<li>Pan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CD90+serves+as+differential+modulator+of+subcutaneous+and+visceral+adipose-derived+stem+cells+by+regulating+AKT+activation+that+influences+adipose+tissue+and+metabolic+homeostasis%5BTitle%5D)+AND+%22Stem+Cell+Res+Ther%22%5BJournal%5D)">CD90 serves as differential modulator of subcutaneous and visceral adipose-derived stem cells by regulating AKT activation that influences adipose tissue and metabolic homeostasis.</a> Stem Cell Res Ther. 10 (1), 355(2019).</li>
</ol>

Autorzy oświadczają, że nie ma dla nich konfliktu interesów.

Ten protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej obejmuje kilka krytycznych etapów, które zapewniają pomyślną izolację wyspecjalizowanych składników. Po pierwsze, odwirowanie pobranej tkanki tłuszczowej rozdziela ją na tłuszcz o wysokiej gęstości (HDF) i tłuszcz o niskiej gęstości (LDF), z których każdy ma odrębny skład macierzy komórkowej i zewnątrzkomórkowej (ECM)23,24. HDF, bogaty w żywotne adipocyty i komórki zrębu frakcji naczyniowej (SVF), jest dalej przetwar...

Autologiczny przeszczep tkanki tłuszczowej jest szeroko stosowaną techniką zwiększania objętości i regeneracji tkanek, napędzaną postępem w przygotowaniu miejsca dawczego, ekstrakcji tłuszczu, przetwarzaniu i implantacji1,2,3,4. Jednak jednolite właściwości fizyczne i biologiczne tradycyjnych przeszczepów tłuszczowych często ograniczają ich skuteczność w zaspokajaniu różnych potrzeb klinicznych5. Aby przezwyciężyć te ograniczenia, nasz zespół badawczy opracował innowacyjny protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej, przekształcający autologiczny tłuszcz w wyspecjalizowane składniki o odrębnych właściwościach i funkcjach fizykochemicznych.
Głównym celem protokołu jest frakcjonowanie autologicznej tkanki tłuszczowej na wyspecjalizowane składniki - Kompleks Matrycy Tłuszczowej (AMC), Żel Frakcji Naczyniowej Zrębu (SVF) i Fragment Kolagenu Tłuszczowego (ACF), z których każdy został zaprojektowany z myślą o konkretnych wyzwaniach klinicznych. Dostarczając komponenty o unikalnych właściwościach, takich jak zwiększona sztywność, wysoka gęstość komórek i formuły bogate w kolagen, protokół umożliwia precyzyjne i ukierunkowane strategie przeszczepiania6,7,8,9,10,11.
Tradycyjne przeszczepy tłuszczu, choć skuteczne w zwiększaniu objętości, często nie spełniają złożonych wymagań scenariuszy klinicznych. Jego nieprzewidywalne wchłanianie tłuszczu prowadzi do niestabilnej odbudowy objętości. Co więcej, ze względu na jednolite właściwości fizyczne i biologiczne tradycyjnych przeszczepów tłuszczu, nie są one w stanie zapewnić ukierunkowanego wypełnienia obszarów o szczególnych wymaganiach dotyczących przeszczepu, takich jak wsparcie strukturalne, wykonywanie precyzyjnych iniekcji na małych obszarach i osiąganie ukierunkowanej stymulacji kolagenu. Problemy te często wymagają wielu operacji, co zwiększa ból i obciążenie finansowe pacjentów1,2,5. Ten protokół frakcjonowania rozwiązuje te ograniczenia poprzez specyficzne wzbogacenie tkanki tłuszczowej w zawartość o szczególnej wartości z tradycyjnej tkanki tłuszczowej. Dzięki temu procesowi tworzymy składniki tkanki tłuszczowej o dostosowanych właściwościach, oferując w ten sposób klinicystom wszechstronny zestaw narzędzi do spersonalizowanego leczenia. W porównaniu z syntetycznymi wypełniaczami lub tradycyjnym przeszczepem tłuszczu, podejście to wykorzystuje tkankę autologiczną, eliminując ryzyko odrzucenia immunologicznego i zapewniając biokompatybilność3. Dodatkowo w procesie frakcjonowania powstają składniki o unikalnych właściwościach, takie jak AMC, który zapewnia wsparcie strukturalne i charakteryzuje się niskim współczynnikiem wchłaniania; SVF-żel, który zapewnia precyzyjne iniekcje i charakteryzuje się dużą gęstością komórek frakcji zrębu naczyniowego; oraz ACF, białkowe rusztowanie kolagenowe zdolne do kontrolowanego uwalniania czynników tłuszczowych, które wykazuje potencjał do zastosowań klinicznych w odmładzaniu skóry7,9,11. Takie podejście zmniejsza również potrzebę powtarzania procedur, poprawiając retencję przeszczepów i zadowolenie pacjenta10,12.
Koncepcja frakcjonowania tkanek biologicznych w celu optymalizacji wyników terapeutycznych jest dobrze ugruntowana, co widać w rozdzielaniu krwi na osocze, czerwone krwinki i płytki krwi dla docelowych zastosowań medycznych. W ostatnich latach stopniowo rozwijają się również badania i kliniczne zastosowania składników tkanki tłuszczowej13,14,15,16,17,18. Ten protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej opiera się na tej zasadzie, izolując składniki o różnych właściwościach do dostosowanego zastosowania klinicznego. Klinicyści mogą określić przydatność tej metody, biorąc pod uwagę potrzeby anatomiczne pacjenta, pożądane wyniki (np. zwiększenie objętości, wsparcie strukturalne lub odmłodzenie skóry) oraz dostępny sprzęt. Protokół ten jest szczególnie skuteczny w przypadkach wymagających precyzyjnej kontroli właściwości przeszczepu, takich jak odmładzanie twarzy, rewizja blizn lub złożone procedury rekonstrukcyjne7,10,12.

<table><tbody><tr><td>0,001% Epinefryna</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>E4375</td><td></td></tr><tr><td>0,06% Lidokaina</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>L5647</td><td></td></tr><tr><td>3-milimetrowa wieloportowa kaniula</td><td>Tulip Produkty medyczne, San Diego, CA, USA</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>50-ml probówki wirówkowe</td><td>Corning</td><td>430829</td><td></td></tr><tr><td>Urządzenie do testowania obciążenia BOSE ElectroForce</td><td>Bose Corporation</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Collagenase</td><td>Worthington Biochemical</td><td>LS004176</td><td></td></tr><tr><td>Złącze Luer-Lok żeńskie-żeńskie</td> BD <td>Biosciences</td><td>309628</td><td></td></tr><tr><td>Urządzenie filtrujące z tuleją i sitami</td><td>wykonane na zamówienie (Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.)</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Gauze</td><td>Medline Industries</td><td>MDS093944</td><td></td></tr><tr><td>Hematoksylina/Zestaw do barwienia eozyny</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT110116</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do barwienia trichromu Massona</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>HT15</td><td></td></tr><tr><td>Nagie myszy</td><td>Southern Mdical University</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna buforowana fosforanami (PBS)</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td></td><td></td>10010023</tr><tr><td>Okrągły sitko filtracyjne ze stali nierdzewnej (0,15 mm)</td><td>Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Okrągły sitko filtracyjne ze stali nierdzewnej (0,25 mm)</td><td>Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Sterylizowany worek filtracyjny ze 100 siatkami</td><td>Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Frakcja naczyniowa zrębu (SVF)-Ekstraktor żelowy</td><td>Shanghai Tiangong Instruments Co., Ltd.</td><td>/</td><td></td></tr><tr><td>Trypsin</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>25200056</td><td></td></tr><tr><td>Zestaw do analizy Western Blot</td><td>Bio-Rad</td><td>1705061</td><td></td></tr></tbody></table>

innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej do przekształcania tłuszczu w specjalistyczne składniki

Innovative Adipose Tissue Fractionation for Transforming Fat into Specialized Components

Tradycyjne autologiczne przeszczepianie tkanki tłuszczowej jest powszechnie stosowane do zwiększania objętości i regeneracji tkanek. Jednak jednolite właściwości fizyczne i biologiczne przeszczepów tłuszczu często prowadzą do nieoptymalnej wydajności w różnych scenariuszach pacjentów i wieloaspektowych wymaganiach. Rozwijając podstawy autologicznego przeszczepu tłuszczu, wprowadzamy pionierskie podejście określane jako autologiczny przeszczep składnika tłuszczowego. Ta innowacyjna koncepcja łączy w sobie skrupulatnie opracowany protokół mający na celu przekształcenie autologicznej tkanki tłuszczowej w różnorodny zestaw składników tłuszczowych, z których każdy charakteryzuje się unikalnymi właściwościami fizykochemicznymi dostosowanymi do konkretnych zastosowań w różnych kontekstach klinicznych. Za pomocą szeregu metod fizycznych tkanka tłuszczowa może zostać przekształcona w Kompleks Matrycy Tłuszczowej (AMC) zapewniający wystarczające sztywne podparcie, Tłuszcz o wysokiej gęstości (HDF) do dalszego wypełniania, żel Stromal Vascular Fraction (SVF) do małych i/lub precyzyjnych iniekcji oraz Adipose Collagen Fragment (ACF) do drobnych zmarszczek i/lub potrzeb odmładzania twarzy. Te odrębne składniki tkanki tłuszczowej posiadają nieodłączne cechy, które nadają się do precyzyjnych i ukierunkowanych strategii przeszczepów, zaspokajając zniuansowane wymagania indywidualnych potrzeb pacjentów. Nowatorski protokół frakcjonowania tkanki tłuszczowej wykazuje ogromny potencjał w rewolucjonizowaniu przeszczepu tkanki tłuszczowej. Oferuje nową perspektywę i metodologię dla bardziej wyrafinowanego i dostosowanego do potrzeb przeszczepu.

Poprzez zastosowanie różnych procedur mechanicznych przeprowadzonych podczas procesu chirurgicznego, z sukcesem przekształciliśmy tkankę tłuszczową w odrębne komponenty tłuszczowe o różnych charakterystykach. Są to kolejno: AMC, który zapewnia solidne wsparcie (Rycina 1A), HDF do dalszego wypełniania (Rycina 1B), żel SVF-gel do precyzyjnych iniekcji w małych obszarach (Rycina 1C) oraz ACF do usuwania drobnych zmarszczek lub w celu r...

Tutaj prezentujemy protokół, który może przekształcić autologiczną tkankę tłuszczową w różne substancje składowe tkanki tłuszczowej o różnych właściwościach i funkcjach fizykochemicznych.

Innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej do przekształcania tłuszczu w specjalistyczne składniki

Traditional autologous adipose tissue grafting is commonly used for volume augmentation and tissue regeneration. However, the uniform physical and ...

Nasze badania mają na celu frakcjonację tkanki tłuszczowej w celu stworzenia docelowych składników i zbadania ich działania. Tradycyjne wykresy tłuszczu mają problemy, takie jak nieprzewidywalna absorpcja i jednolite właściwości. Nasz protokół rozwiązuje ten problem, tworząc specjalistyczne komponenty tłuszczowe do docelowych zastosowań. Nasze laboratorium skupi się na tym, jak czynniki zewnętrzne, takie jak czynniki pacjenta i środowisko chirurgiczne, wpływają na przeszczepianie składników tłuszczowych.[Narrator] Na początek pozwól, aby zebrany tłuszcz umieszczony w 60-mililitrowej strzykawce stał nienaruszony przez 10 minut, aby płynne składniki mogły osiąść na dnie. Ostrożnie wyrzuć porcję płynu. Zatrzymaj zebrany tłuszcz w 60-mililitrowej strzykawce i odwiruj go w 1,200 G przez trzy minuty w temperaturze pokojowej, aby dalej rozwarstwiać składniki, Po odwirowaniu ponownie wyrzuć płynną część na dole i zachowaj górną warstwę tłuszczu zdefiniowaną teraz jako tłuszcz Colemana. Teraz przenieś górne dwie trzecie tłuszczu Colemana do 60-mililitrowej strzykawki, definiując go jako tłuszcz o niskiej gęstości. Następnie przenieś pozostałą dolną jedną trzecią do innej 60-mililitrowej strzykawki, definiując ją jako tłuszcz o wysokiej gęstości. W celu przygotowania kompleksu macierzy tłuszczowej przepuść tłuszcz o dużej gęstości przez urządzenie filtrujące z rękawem i trzema wewnętrznymi sitami rozmieszczonymi w odstępach 1,5 milimetra. Zbierz przyczepioną tkankę i odwodnij ją w worku filtrującym o oczkach 100 oczek owiniętym gazą. Za pomocą kleszczy określ, czy odwodnienie jest całkowite, gdy po podniesieniu z tkanki nie spadają żadne widoczne kropelki. Zdefiniuj produkt końcowy jako kompleks macierzy tłuszczowej. W przypadku ekstrakcji żelu zrębu frakcji naczyniowej należy mechanicznie emulgować tłuszcz o niskiej gęstości, przepuszczając go między dwiema strzykawkami, połączonymi łącznikiem żeńskim do żeńskiego zamka przynęty o średnicy wewnętrznej 1,4 milimetra z szybkością 10 mililitrów na sekundę przez jedną minutę. Odwirować zemulgowany tłuszcz o niskiej gęstości w stężeniu 1,600 G przez trzy minuty i zebrać środkową warstwę przypominającą żel w postaci żelu frakcji zrębu naczyniowego. Do produkcji fragmentów kolagenu tłuszczowego należy sproszkować tłuszcz o niskiej gęstości za pomocą specjalistycznego ekstraktora z prędkością 30 000 obrotów na minutę przez 60 sekund, aby uzyskać zawiesinę tłuszczu. Przenieś zawiesinę tłuszczu do strzykawki o pojemności 20 mililitrów i podłącz jednokierunkowy filtr o średnicy 0,25 milimetra, popchnij tłok i zbierz filtrat do drugiej strzykawki. Następnie podłącz jednokierunkowy filtr o średnicy 0,15 milimetra do drugiej strzykawki, ponownie popchnij tłok i zbierz końcowy filtrat do trzeciej strzykawki. Na koniec odwirować zawiesinę tłuszczu o stężeniu 3000 G przez trzy minuty i zebrać stałą część na dnie jako fragment kolagenu tłuszczowego. Składnik macierzy tłuszczowej lub AMC wykazywał znacznie wyższą zawartość macierzy zewnątrzkomórkowej i kolagenu w porównaniu z tłuszczem Colemana, jak wykazano gęstym barwieniem na obrazach histologicznych i skaningowej mikroskopii elektronowej, a zawartość kolagenu w AMC określono ilościowo na około 45% w porównaniu z około 15% w masie tłuszczowej Colemana. Barwienie Massona wykazało, że kolagen był rozprzestrzeniony po całym polu w ACF, podczas gdy w tłuszczu Colemana był ograniczony do obszarów wokół komórek tłuszczowych. Analiza bioinformatyczna i proteomiczna ACF zidentyfikowała wysoką obfitość błony plazmatycznej i białek jądrowych oraz wzbogacenie w metabolizm i procesy organizacyjne kolagenu z dominującą obecnością kolagenu typu 1, 6 i 4.

innovative-adipose-tissue-fractionation-for-transforming-fat-into

Research

JoVE Journal

Bioengineering

Bioinżynieria

Niniejszy protokół opisuje izolację komórek zrębowych pochodzących z tkanki tłuszczowej z aspiratu tłuszczowego oraz stworzenie krytycznego ubytku w kalwaru o rozmiarze 4 mm w celu oceny regeneracji szkieletu.

Naprawa modelu krytycznego ubytku kalwarii z wykorzystaniem stromalnych komórek pochodzących z tkanki tłuszczowej pozyskanych z lipoaspiratu

Biała tkanka tłuszczowa (WAT) ma krytyczne braki w swoich obecnych pierwotnych modelach hodowli, co utrudnia rozwój farmakologiczny i badania metaboliczne. W tym miejscu przedstawiamy protokół wytwarzania układu mikrofizjologicznego tkanki tłuszczowej poprzez umieszczanie WAT między arkuszami komórek zrębu. Ta konstrukcja zapewnia stabilną i adaptowalną platformę dla podstawowej kultury WAT.

Platforma mikrofizjologiczna dla ludzkiego tłuszczu: warstwowa biała tkanka tłuszczowa

Tutaj prezentujemy protokół uzyskiwania frakcji naczyniowej zrębu z tkanki tłuszczowej poprzez szereg procesów mechanicznych, które obejmują emulgację i wielokrotne wirowanie.

Mikronizacja mechaniczna lipoaspiratów w terapii regeneracyjnej

Precyzyjne ujawnienie metod i protokołów jest kluczowe dla powszechnego stosowania terapii komórkami macierzystymi. W tym miejscu przedstawiamy protokół izolacji komórek regeneracyjnych pochodzących z tkanki tłuszczowej, stosowany do pojedynczego wstrzyknięcia do ciał jamistych w leczeniu zaburzeń erekcji (ED) po radykalnej prostatektomii (RP).

Izolacja komórek regeneracyjnych pochodzących z tkanki tłuszczowej w leczeniu zaburzeń erekcji po radykalnej prostatektomii

Tutaj prezentujemy mikrofragmentację ludzkiej tkanki tłuszczowej bez enzymów przy użyciu urządzenia systemu zamkniętego. Ta nowa metoda pozwala na uzyskanie submilimetrowych skupisk tkanki tłuszczowej nadających się do przeszczepu in vivo, hodowli in vitro oraz dalszej izolacji i charakterystyki komórek.

Mikrofragmentacja ludzkiej tkanki tłuszczowej do fenotypowania komórek i charakterystyki sekretomu

Przedstawiamy protokół izolacji, hodowli i indukcji adipogennej komórek macierzystych pochodzących z tkanki tłuszczowej pochodzącej z grzebienia nerwowego (NCADSC) z okołoaortalnej tkanki tłuszczowej Wnt-1 Cre+/-; Myszy Rosa26RFP/+. NCADSC mogą być łatwo dostępnym źródłem ADSC do modelowania adipogenezy lub lipogenezy in vitro.

Izolacja, hodowla i indukcja adipogenna grzebienia nerwowego Oryginalne komórki macierzyste pochodzące z tkanki tłuszczowej okołoorciowej

Ten protokół opisuje techniczne podejście do izolowania subpopulacji komórek zrębu adipogennych i włóknisto-zapalnych z mysich magazynów białej tkanki tłuszczowej (WAT) w jamie brzusznej poprzez sortowanie komórek aktywowane fluorescencją lub separację kulek immunomagnetycznych.

Izolacja adipogennych i włóknisto-zapalnych subpopulacji komórek zrębu z mysich wewnątrzbrzusznych magazynów tłuszczu

Prezentujemy prostą metodę izolowania wysoce żywotnych komórek progenitorowych tkanki tłuszczowej z najądrzy myszy za pomocą sortowania komórek aktywowanego fluorescencją.

Preparat komórek progenitorowych tkanki tłuszczowej tkanki tłuszczowej najądrza myszy

Tutaj prezentujemy szczegółowy protokół opisujący wykorzystanie fragmentów mikronaczyniowych wyizolowanych z gryzoni lub ludzkiej tkanki tłuszczowej jako prostego podejścia do inżynierii funkcjonalnej, unaczynionej beżowej tkanki tłuszczowej.

Trójwymiarowa hodowla unaczynionej termogenicznej tkanki tłuszczowej z fragmentów mikronaczyniowych

Ten protokół opisuje półautomatyczną izolację frakcji zrębu naczyniowego (SVF) z mysiej tkanki tłuszczowej w celu uzyskania preadipocytów i osiągnięcia różnicowania adipocytów in vitro. Użycie dysocjatora tkankowego do trawienia kolagenazy zmniejsza zmienność eksperymentalną i zwiększa odtwarzalność.

Półautomatyczna izolacja zrębu frakcji naczyniowej z mysiej białej tkanki tłuszczowej za pomocą dysocjatora tkankowego

Przedstawiamy tutaj standardową metodę efektywnej izolacji komórek macierzystych pochodzących z tłuszczu i adipocytów, charakteryzującą się skróceniem czasu przetwarzania o &gt;90%, wysoką żywotnością komórek oraz szeroką kompatybilnością.

Efektywna izolacja komórek macierzystych i adipocytów pochodzących z tłuszczu z tkanki tłuszczowej wieprzi

Poznaj innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej w celu uzyskania wyspecjalizowanych komponentów o zwiększonej zawartości kolagenu. Ta metoda poprawia jakość przeszczepów tłuszczowych poprzez precyzyjne oddzielenie frakcji komórkowych i macierzowych.

Innowacyjne frakcjonowanie tkanki tłuszczowej do przekształcania tłuszczu w specjalistyczne składniki

Przeglądaj więcej filmów