Name: Wykorzystanie mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do podłużnego pobierania płynu śródmiąższowego w zwierzęcym modelu glejaka (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 50 s
Description: Poznaj metodę mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do pobierania płynu śródmiąższowego w modelu glejaka. Ta technika umożliwia analizę składników sygnałowych i ocenę odpowiedzi na leczenie temozolomidem.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Prace te zostały wsparte przez grant National Institute of Neurological Disorders and Stroke 1R01NS096376, 1R01NS112856 oraz P50CA221747 SPORE for Translational Approaches to Brain Cancer (A.U.A.).

<ol><li>Shetty, A. K., Zanirati, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interstitial+system+of+the+brain+in+health+and+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Aging+Dis%22%5BJournal%5D)">The interstitial system of the brain in health and disease.</a> Aging Dis. 11 (1), 200-211 (2020).</li>
<li>Taoka, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interstitial+fluidopathy+of+the+central+nervous+system%3A+An+umbrella+term+for+disorders+with+impaired+neurofluid+dynamics%5BTitle%5D)+AND+%22Magn+Reson+Med+Sci%22%5BJournal%5D)">Interstitial fluidopathy of the central nervous system: An umbrella term for disorders with impaired neurofluid dynamics.</a> Magn Reson Med Sci. 23 (1), 1-13 (2024).</li>
<li>Matsumae, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Research+into+the+physiology+of+cerebrospinal+fluid+reaches+a+new+horizon%3A+Intimate+exchange+between+cerebrospinal+fluid+and+interstitial+fluid+may+contribute+to+maintenance+of+homeostasis+in+the+central+nervous+system%5BTitle%5D)+AND+%22Neurol+Med+Chir+%28Tokyo%29%22%5BJournal%5D)">Research into the physiology of cerebrospinal fluid reaches a new horizon: Intimate exchange between cerebrospinal fluid and interstitial fluid may contribute to maintenance of homeostasis in the central nervous system.</a> Neurol Med Chir (Tokyo). 56 (7), 416-441 (2016).</li>
<li>Filannino, F. M., Panaro, M. A., Benameur, T., Pizzolorusso, I., Porro, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Extracellular+vesicles+in+the+central+nervous+system%3A+A+novel+mechanism+of+neuronal+cell+communication%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Mol+Sci%22%5BJournal%5D)">Extracellular vesicles in the central nervous system: A novel mechanism of neuronal cell communication.</a> Int J Mol Sci. 25 (3), 1629(2024).</li>
<li>Marcus, H. J., Carpenter, K. L., Price, S. J., Hutchinson, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+assessment+of+high-grade+glioma+biochemistry+using+microdialysis%3A+A+study+of+energy-related+molecules%2C+growth+factors+and+cytokines%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurooncol%22%5BJournal%5D)">In vivo assessment of high-grade glioma biochemistry using microdialysis: A study of energy-related molecules, growth factors and cytokines.</a> J Neurooncol. 97 (1), 11-23 (2010).</li>
<li>De Ruiter Swain, J., Michalopoulou, E., Noch, E. K., Lukey, M. J., Van Aelst, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+partitioning+in+the+brain+and+its+hijacking+by+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Genes+Dev%22%5BJournal%5D)">Metabolic partitioning in the brain and its hijacking by glioblastoma.</a> Genes Dev. 37 (15-16), 681-702 (2023).</li>
<li>Teer, L., Yaddanapudi, K., Chen, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Biophysical+control+of+the+glioblastoma+immunosuppressive+microenvironment%3A+Opportunities+for+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Bioengineering+%28Basel%29%22%5BJournal%5D)">Biophysical control of the glioblastoma immunosuppressive microenvironment: Opportunities for immunotherapy.</a> Bioengineering (Basel). 11 (1), 93(2024).</li>
<li>De Boeck, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioma-derived+il-33+orchestrates+an+inflammatory+brain+tumor+microenvironment+that+accelerates+glioma+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Nat+Commun%22%5BJournal%5D)">Glioma-derived il-33 orchestrates an inflammatory brain tumor microenvironment that accelerates glioma progression.</a> Nat Commun. 11 (1), 4997(2020).</li>
<li>Yeo, E. C. F., Brown, M. P., Gargett, T., Ebert, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+cytokines+and+chemokines+in+shaping+the+immune+microenvironment+of+glioblastoma%3A+Implications+for+immunotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">The role of cytokines and chemokines in shaping the immune microenvironment of glioblastoma: Implications for immunotherapy.</a> Cells. 10 (3), 607(2021).</li>
<li>Riviere-Cazaux, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Longitudinal+glioma+monitoring+via+cerebrospinal+fluid+cell-free+DNA%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Cancer+Res%22%5BJournal%5D)">Longitudinal glioma monitoring via cerebrospinal fluid cell-free DNA.</a> Clin Cancer Res. 31 (5), 881-889 (2025).</li>
<li>Wang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reciprocal+signaling+between+glioblastoma+stem+cells+and+differentiated+tumor+cells+promotes+malignant+progression%5BTitle%5D)+AND+%22Cell+Stem+Cell%22%5BJournal%5D)">Reciprocal signaling between glioblastoma stem cells and differentiated tumor cells promotes malignant progression.</a> Cell Stem Cell. 22 (4), 514-528 (2018).</li>
<li>Lehmann, A., Isacsson, H., Hamberger, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+in+vivo+administration+of+kainic+acid+on+the+extracellular+amino+acid+pool+in+the+rabbit+hippocampus%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Effects of in vivo administration of kainic acid on the extracellular amino acid pool in the rabbit hippocampus.</a> J Neurochem. 40 (5), 1314-1320 (1983).</li>
<li>Sandberg, M., Lindstrom, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Amino+acids+in+the+dorsal+lateral+geniculate+nucleus+of+the+cat--collection+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Amino acids in the dorsal lateral geniculate nucleus of the cat--collection in vivo.</a> J Neurosci Methods. 9 (1), 65-74 (1983).</li>
<li>Tossman, U., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Brain+amino+acids+measured+by+intracerebral+dialysis+in+portacaval+shunted+rats%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurochem%22%5BJournal%5D)">Brain amino acids measured by intracerebral dialysis in portacaval shunted rats.</a> J Neurochem. 41 (4), 1046-1051 (1983).</li>
<li>Zetterstrom, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Purine+levels+in+the+intact+rat+brain.+Studies+with+an+implanted+perfused+hollow+fibre%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Lett%22%5BJournal%5D)">Purine levels in the intact rat brain. Studies with an implanted perfused hollow fibre.</a> Neurosci Lett. 29 (2), 111-115 (1982).</li>
<li>Bourne, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Intracerebral+microdialysis%3A+30+years+as+a+tool+for+the+neuroscientist%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Pharmacol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Intracerebral microdialysis: 30 years as a tool for the neuroscientist.</a> Clin Exp Pharmacol Physiol. 30 (1-2), 16-24 (2003).</li>
<li>Darvesh, A. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+brain+microdialysis%3A+Advances+in+neuropsychopharmacology+and+drug+discovery%5BTitle%5D)+AND+%22Expert+Opin+Drug+Discov%22%5BJournal%5D)">In vivo brain microdialysis: Advances in neuropsychopharmacology and drug discovery.</a> Expert Opin Drug Discov. 6 (2), 109-127 (2011).</li>
<li>Chefer, V. I., Thompson, A. C., Zapata, A., Shippenberg, T. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Overview+of+brain+microdialysis%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Overview of brain microdialysis.</a> Curr Protoc Neurosci. Chapter 7 (Unit7), 1(2009).</li>
<li>Altendorfer-Kroath, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+cerebral+open+flow+microperfusion+and+microdialysis+when+sampling+small+lipophilic+and+small+hydrophilic+substances%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Comparison of cerebral open flow microperfusion and microdialysis when sampling small lipophilic and small hydrophilic substances.</a> J Neurosci Methods. 311, 394-401 (2019).</li>
<li>Custers, M. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applicability+of+cerebral+open+flow+microperfusion+and+microdialysis+to+quantify+a+brain-penetrating+nanobody+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">Applicability of cerebral open flow microperfusion and microdialysis to quantify a brain-penetrating nanobody in mice.</a> Anal Chim Acta. 1178, 338803(2021).</li>
<li>Birngruber, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+open+flow+microperfusion%3A+A+new+in+vivo+technique+for+continuous+measurement+of+substance+transport+across+the+intact+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Exp+Pharmacol+Physiol%22%5BJournal%5D)">Cerebral open flow microperfusion: A new in vivo technique for continuous measurement of substance transport across the intact blood-brain barrier.</a> Clin Exp Pharmacol Physiol. 40 (12), 864-871 (2013).</li>
<li>Kleinert, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Time-resolved+hypothalamic+open+flow+micro-perfusion+reveals+normal+leptin+transport+across+the+blood-brain+barrier+in+leptin+resistant+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Mol+Metab%22%5BJournal%5D)">Time-resolved hypothalamic open flow micro-perfusion reveals normal leptin transport across the blood-brain barrier in leptin resistant mice.</a> Mol Metab. 13, 77-82 (2018).</li>
<li>Le Prieult, F., Barini, E., Laplanche, L., Schlegel, K., Mezler, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Collecting+antibodies+and+large+molecule+biomarkers+in+mouse+interstitial+brain+fluid%3A+A+comparison+of+microdialysis+and+cerebral+open+flow+microperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22MAbs%22%5BJournal%5D)">Collecting antibodies and large molecule biomarkers in mouse interstitial brain fluid: A comparison of microdialysis and cerebral open flow microperfusion.</a> MAbs. 13 (1), 1918819(2021).</li>
<li>Altendorfer-Kroath, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+the+therapeutic+antibody+ocrelizumab+in+mouse+brain+interstitial+fluid+using+cerebral+open+flow+microperfusion+and+simultaneous+monitoring+of+the+blood-brain+barrier+integrity%5BTitle%5D)+AND+%22Pharmaceutics%22%5BJournal%5D)">Quantification of the therapeutic antibody ocrelizumab in mouse brain interstitial fluid using cerebral open flow microperfusion and simultaneous monitoring of the blood-brain barrier integrity.</a> Pharmaceutics. 15 (7), 1880(2023).</li>
<li>Birngruber, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Enhanced+doxorubicin+delivery+to+the+brain+administered+through+glutathione+pegylated+liposomal+doxorubicin+%282b3-101%29+as+compared+with+generic+caelyx%2C%28%28r%29%29%2Fdoxil%28%28r%29%29--a+cerebral+open+flow+microperfusion+pilot+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Enhanced doxorubicin delivery to the brain administered through glutathione pegylated liposomal doxorubicin (2b3-101) as compared with generic caelyx,((r))/doxil((r))--a cerebral open flow microperfusion pilot study.</a> J Pharm Sci. 103 (7), 1945-1948 (2014).</li>
<li>Birngruber, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+implanted+cOFM+probe+causes+minimal+tissue+reaction+in+the+brain%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Long-term implanted cOFM probe causes minimal tissue reaction in the brain.</a> PLoS One. 9 (3), e90221(2014).</li>
<li>Altendorfer-Kroath, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Atraumatic+access+to+human+glioblastoma+in+a+xenograft+animal+model+by+cerebral+open+flow+microperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Atraumatic access to human glioblastoma in a xenograft animal model by cerebral open flow microperfusion.</a> J Neurosci Methods. 393, 109893(2023).</li>
<li>Stangler, L. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Microdialysis+and+microperfusion+electrodes+in+neurologic+disease+monitoring%5BTitle%5D)+AND+%22Fluids+Barriers+CNS%22%5BJournal%5D)">Microdialysis and microperfusion electrodes in neurologic disease monitoring.</a> Fluids Barriers CNS. 18 (1), 52(2021).</li>
<li>Hummer, J., Altendorfer-Kroath, T., Birngruber, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+open+flow+microperfusion+to+monitor+drug+transport+across+the+blood-brain+barrier%5BTitle%5D)+AND+%22Curr+Protoc+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Cerebral open flow microperfusion to monitor drug transport across the blood-brain barrier.</a> Curr Protoc Pharmacol. 85 (1), e60(2019).</li>
<li>Sundheimer, J. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+insights+and+recommendations+for+successfully+performing+cerebral+microdialysis+with+hydrophobic+drug+candidates%5BTitle%5D)+AND+%22Clin+Transl+Sci%22%5BJournal%5D)">Experimental insights and recommendations for successfully performing cerebral microdialysis with hydrophobic drug candidates.</a> Clin Transl Sci. 18 (5), e70226(2025).</li>
<li>Altendorfer-Kroath, T., Hummer, J., Birngruber, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+monitoring+of+brain+pharmacokinetics+and+pharmacodynamics+with+cerebral+open+flow+microperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Biopharm+Drug+Dispos%22%5BJournal%5D)">In vivo monitoring of brain pharmacokinetics and pharmacodynamics with cerebral open flow microperfusion.</a> Biopharm Drug Dispos. 44 (1), 84-93 (2023).</li>
<li>Kreß, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Innovative+platform+for+the+advanced+online+monitoring+of+three-dimensional+cells+and+tissue+cultures%5BTitle%5D)+AND+%22Cells%22%5BJournal%5D)">Innovative platform for the advanced online monitoring of three-dimensional cells and tissue cultures.</a> Cells. 11 (3), 412(2022).</li>
<li>Bjorkli, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((In+vivo+microdialysis+in+mice+captures+changes+in+alzheimer%27s+disease+cerebrospinal+fluid+biomarkers+consistent+with+developing+pathology%5BTitle%5D)+AND+%22J+Alzheimers+Dis%22%5BJournal%5D)">In vivo microdialysis in mice captures changes in alzheimer's disease cerebrospinal fluid biomarkers consistent with developing pathology.</a> J Alzheimers Dis. 84 (4), 1781-1794 (2021).</li>
<li>Gorska, A. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Evaluation+of+cerebrospinal+fluid+%28csf%29+and+interstitial+fluid+%28isf%29+mouse+proteomes+for+the+validation+and+description+of+alzheimer%27s+disease+biomarkers%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosci+Methods%22%5BJournal%5D)">Evaluation of cerebrospinal fluid (csf) and interstitial fluid (isf) mouse proteomes for the validation and description of alzheimer's disease biomarkers.</a> J Neurosci Methods. 411, 110239(2024).</li>
<li>Pemmari, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+of+homing+and+tissue-penetrating+peptides+by+microdialysis+and+in+vivo+phage+display%5BTitle%5D)+AND+%22Life+Sci+Alliance%22%5BJournal%5D)">Screening of homing and tissue-penetrating peptides by microdialysis and in vivo phage display.</a> Life Sci Alliance. 8 (5), e202201490(2025).</li>
</ol>

Autorzy nie mają nic do ujawnienia.

Procedury cOFM opisane w tym protokole mają potencjał rewolucjonizacji badań chorób OUN dzięki zdolności do podłużnego pobierania endogennych składników ISF tkanek patologicznych. Jednak sukces badawczy stosowania tej metody zależy od właściwego wykonania kilku kluczowych kroków. Z nich prawidłowe i bezpieczne umieszczenie kaniuli prowadzącej cOFM jest jednym z najważniejszych elementów. Nieprawidłowe zabiegi chirurgiczne lub strategie mocowania mogą skutkować przesunięciem całego uchwytu głowy i późniejszym wycofaniem z...

Badanie chorób ośrodkowego układu nerwowego (OUN) jest notorycznie trudne ze względu na złożone, wielokomórkowe sygnalizowanie międzykomórkowe pośredniczone przez płyn śródmiąższowy (ISF)1,2,3,4. Ta złożoność jest szczególnie widoczna w guzach mózgu, takich jak glejak (GBM), gdzie sygnały międzykomórkowe są przekazywane zarówno między komórkami nowotworowymi, jak i stromalnymi 5,6,7,8,9. W wielu przypadkach nienaturalna wymiana różnorodnych biocząsteczek, w tym metabolitów i białkowych przekaźników, przyczynia się do ukształtowania pierwotnej etiologii patologii OUN. To wyzwanie badawcze jest szczególnie spotęgowane, zwłaszcza w GBM, przez fakt, że skład molekularny ISF jest czasowo dynamiczny i ewoluuje w trakcie postępu choroby oraz w odpowiedzi na leczenie interwencyjne10,11.
Tradycyjne przedkliniczne metody badań GBM obejmują badania in vitro oraz modele zwierzęce z pojedynczym punktem końcowym. Charakter tych podejść ogranicza ich szerszą użyteczność kliniczną ze względu na niezdolność do uchwycenia zarówno cech mikrośrodowiska guza, jak i podłużnych zmian czasowych. Postępy wprowadzone na początku lat 80. przezwyciężyły te ograniczenia kontekstowe dzięki rozwojowi mikrodializy intracerebralnej (cMD)12,13,14,15. Od momentu powstania 45 lat temu, cMD ugruntował swoją pozycję jako standardowa metoda podłużnego pobierania próbek płynu śródmiąższowego (ISF)w żywym mózgu. Osiąga się to poprzez swobodną dyfuzję i konwekcję wysokostężeniowych substancji rozpuszczonych ISF przez błonę półprzepuszczalną do stale płynącego, niskostężeniowego perfuzjatu, zazwyczaj sztucznego płynu mózgowo-rdzeniowego (aCSF)17. Te półprzepuszczalne membrany składają się z różnych biokompatybilnych polimerów o typowych granicach wielkości porów o masie molekularnej w zakresie od 20 kDa do 3 MDa18. Ten minimalnie inwazyjny zabieg umożliwia podłużne zbieranie in situ różnorodnych analitów, od małych cząsteczek, takich jak metabolity czy neuroprzekaźniki, po duże białka, takie jak przeciwciała. Jednak porowatość strukturalna membran cMD w połączeniu z adsorpcyjnym charakterem polimerów składowych może znacząco wpływać na względny odzysk analitów o określonych cechach biochemicznych lub wymiarowych, takich jak lipidy lub przeciwciała, odpowiednio19,20.
Postępy w celu przezwyciężenia tego ograniczenia błon cMD rozpoczęły się na początku lat 2010. wraz z opracowaniem mózgowej mikroperfuzji otwartego przepływu (cOFM)21. Działając na podobnych ogólnych zasadach co cMD, cOFM usuwa ograniczenia biochemiczne narzucone przez błony półprzepuszczalne, zamieniając je na sonda z siatką plastikową o niskiej adsorpcji o otworach makroskopowych o rozmiarze około 100 μm20. Wiele raportów wykazało poprawę użyteczności cOFM nad cMD dzięki zbieraniu wykrywalnych składników ISF, w tym hormonów peptydowych, nanociał/przeciwciał, małych lipofilowych terapii oraz liposomów PEGylowanych 19,22,23,24,25 . Wcześniejsze raporty analizujące fizjologiczną reakcję tkanek na implantację sondy prowadzącej cOFM pokazują, że integralność bariery krew-mózg zostaje przywrócona do 15 dni po implantacji, a blizny glejowe nie powstają do 30 dni po implantacji,26 dni. Dzięki zastąpieniu błon mikrodializujących otworami makroskopowymi, badacze wykazali również innowacyjną zdolność sond prowadzących cOFM do ułatwiania wstrzyknięcia ksenprzeszczepionych komórek glejaka do mózgów szczurów niedoborowych odporności, tak aby aurazowe wszczepienie i wzrost guza zachodziły bezpośrednio w okolicach obszaru pobierania próbekcOFM 27.
Rozważania dotyczące stosowania cOFM w badaniach patologii OUN muszą nadal uwzględniać jego ograniczenia metodologiczne. Ze względu na uzależnienie od pasywnej dyfuzji i konwekcji analitów ISF w płynący perfuzat, ograniczenia te dotyczą stężenia analitu i objętości próbki18. Próbkowane składniki ISF zostaną rozcieńczone w zebranym perfuzacie cOFM w porównaniu do poziomów endogennych, co skłoniło wiele badań do porównania względnych proporcji analitów między warunkami eksperymentalnymi28. Typowe przepływy wahają się od 0,1 μL/min do 1,0 μL/min, co odpowiada zaledwie 6 μL/h do 60 μL/h. Uwzględniając czas przejścia w martwej przestrzeni rur, należy również uwzględnić całkowity czas próbki. Jest to szczególnie ważne podczas pobierania cOFM u zwierząt znieczulonych, gdzie kwestie dobrostanu zwierząt muszą być starannie uwzględniane. Bardziej szczegółowy opis tych i innych kwestii jest dostępny w wcześniejszym raporcie metodycznym zespołu rozwojowego cOFM29.
W tym manuskrypcie przedstawiamy zaktualizowany protokół stosowania podłużnego pobierania próbek cOFM w badaniach chorób neurologicznych, ze szczególnym uwzględnieniem GBM. Protokół obejmuje etapy wszczepienia kaniuli przewodniczej cOFM, wstrzyknięcia komórek nowotworowych oraz wszczepienia za pomocą przewodnika cOFM, a także dwie konfiguracje pobierania próbek cOFM u zwierząt obudzonych, swobodnie poruszających się. Przedstawiamy reprezentatywne dane pokazujące efekty leczenia na metabolomiczne i proteomiczne składniki ISF mierzone przez cOFM, wpływ konfiguracji próbkowania na stężenia analitów oraz skuteczność implantacji komórek nowotworowych prowadzonej przez cOFM.

<table><tbody><tr><td>Wiertło 0,7 mm</td><td>Narzędzia Nauki Ścisłej</td><td>19008-07</td><td>Wiercenie otworów z żarnem</td></tr><tr><td>Strzykawka o pojemności 1 do 5 mL</td><td>BD</td><td>#309646</td><td>Recyrkulacja próbki perfuzacji</td></tr><tr><td>Igła 18 G</td><td>BD</td><td>#305195</td><td>Recyrkulacja próbki perfuzacji</td></tr><tr><td>Igła 30G</td><td>BD Ultra-Fine</td><td>328438</td><td>Przebijanie twardej</td></tr><tr><td>Szwy 4-0 vicryl</td><td>Dynarex</td><td>9130</td><td>Zamknięcie operacji chirurgicznych</td></tr><tr><td>Chusteczki alkoholowe</td><td>FisherBrand</td><td>22-363-750</td><td>Dezynfekcja skóry w miejscu chirurgicznym</td></tr><tr><td>Śruby kotwiące</td><td>BASi</td><td>MD-1310</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Sztuczny płyn mózgowo-rdzeniowy (aCSF)</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MD-2400</td><td>ISF próbkowania</td></tr><tr><td>wkładka cOFM dummy</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>cOFM-D- #</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>przewodnik cOFM</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>cOFM-GD-#- #</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Posiadacz przewodnika cOFM</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>OFM-STM-1</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Wkład infuzyjny cOFM</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>cOFM-I- #</td><td>Iniekcja komórek</td></tr><tr><td>klin blokujący cOFM</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>cOFM-LOCK</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Wkładka cOFM do próbkowania</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>cOFM-S-X</td><td>ISF próbkowania</td></tr><tr><td>Aplikatory z bawełnianymi końcówkami</td><td>FisherBrane</td><td>22363160</td><td>Wchłanianie płynów, stosowanie nadtlenku wodoru</td></tr><tr><td>Linia komórkowa glejaka myszy CT2A</td><td>Laboratorium Seyfrieda – Uniwersytet Bostoński</td><td>NA</td><td>Przeszczepione komórki nowotworowe</td></tr><tr><td>Środek cementujący zęby</td><td>IvoClar</td><td>595953US</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Światło do utwardzania zębów</td><td>Henry Schein</td><td>5700253</td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Krem do depilacji</td><td>Veet</td><td>3116875</td><td>Usuwanie owłosienia w miejscu operacji</td></tr><tr><td>Elektryczny golarz</td><td>Wahl Clipper Corp.&nbsp;</td><td>8841</td><td>Usuwanie owłosienia w miejscu operacji</td></tr><tr><td>Kleszcze z cienkim końcówką</td><td>Narzędzia Nauki Ścisłej</td><td>5SF</td><td>Nacięcie, umieszczenie śruby kotwicznej</td></tr><tr><td>Złącza rur z kołnierzem</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MD-1510</td><td>Iniekcja komórek</td></tr><tr><td>Fiolki do kolekcji frakcji</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MF-5281</td><td>Frakcjonowane przechowywanie próbek</td></tr><tr><td>Gazoszczelna szklana strzykawka (25 &mu; L)</td><td>Hamilton</td><td>80465</td><td>Iniekcja komórek</td></tr><tr><td>Nadtlenek wodoru (1-3%)</td><td>Walgreens</td><td>NDC: 0363-0268-32</td><td>Czyszczenie powierzchni czaszki</td></tr><tr><td>Strzykawki insulinowe (0,3 do 1,0 mL) z igłami 31G</td><td>BD Ultra-Fine</td><td>328438</td><td>Znieczulenie i podawanie środków przeciwbólowych</td></tr><tr><td>Rurki mikrowirówkowe</td><td>Basix</td><td>02-682-002</td><td>Recyrkulacja próbki perfuzacji</td></tr><tr><td>Mikrowiertarka i uchwyt stereotaktyczny</td><td>Aparat Harvarda</td><td>75-1874</td><td>Wiercenie otworów z żarnem</td></tr><tr><td>Kurtka myszy</td><td>Lomir</td><td>MJ 02</td><td>Połączenie zwierząt z systemem klatki obrotowej</td></tr><tr><td>Rurki OFM o niskim wiązaniu</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>OFM-PP2-100-LB</td><td>ISF próbkowania</td></tr><tr><td>OFM-Pump - Pompa mikroperfuzji</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MPP102-PC</td><td>ISF próbkowania</td></tr><tr><td>Maść okulistyczna</td><td>Dechra</td><td>211-38</td><td>Okołosugryczne nawilżenie oka</td></tr><tr><td>Igła do pobierania próbek metalu pasywowanego</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MW-2310</td><td>Frakcjonowane przechowywanie próbek</td></tr><tr><td>Worek perfuzacyjny</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>OFM-BAG</td><td>ISF próbkowania</td></tr><tr><td>Fizjologiczny roztwór soli fizjologicznej</td><td>OIOM Medyczne & nbsp;</td><td>0990-7983-03</td><td>Czyszczenie powierzchni czaszki, pomoc w wierceniu dziur z żarnami</td></tr><tr><td>Wymazy z povidonu i jodu</td><td>PDI Healthcare</td><td>SKU B40600</td><td>Dezynfekcja skóry w miejscu chirurgicznym</td></tr><tr><td>Uchwyt sondy</td><td>Stoelting</td><td>51633</td><td></td></tr><tr><td>Chłodzony kolektor frakcji</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MD-1201</td><td>Frakcjonowane przechowywanie próbek</td></tr><tr><td>System klatki obrotowej</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>AMD-R Raturn</td><td>Automatyczne obudowy do pobierania cOFM podczas budzenia</td></tr><tr><td>Ostrza skalpela i uchwyty</td><td>Fisher Scientific &nbsp;</td><td>22079693</td><td>Nacięcie</td></tr><tr><td>Śrubokręt</td><td></td><td></td><td>Montaż na głowie cOFM</td></tr><tr><td>Samotrawiący klej dentystyczny & nbsp;</td><td>Tokuyama</td><td></td><td>Gruntowanie powierzchni czaszki do środka cementującego</td></tr><tr><td>Silikonowa kapsla do fiolek kolekcjonerskich</td><td>BASi (Joanneum)</td><td>MF-5283</td><td>Frakcjonowane przechowywanie próbek</td></tr><tr><td>Rama sterotaktyczna</td><td>Stoelting</td><td>51725</td><td></td></tr></tbody></table>

wykorzystanie mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do podłużnego pobierania płynu śródmiąższowego w zwierzęcym modelu glejaka

Use of Cerebral Open-Flow Microperfusion for the Longitudinal Collection of Interstitial Fluid in an Animal Model of Glioblastoma

Choroby ośrodkowego układu nerwowego (OUN) objawiają się poprzez złożoną, dynamiczną sieć komunikacji międzykomórkowej. Glejak (GBM), najczęstszy i najbardziej agresywny pierwotny guz mózgu, jest symbolem tej złożoności, ze swoim szybkim postępem i fatalną prognozą mierzoną w miesiącach, a nie latach. Biologia GBM opiera się na złożonych wymianach cząsteczek sygnałowych między komórkami neoplastycznymi a stromalnymi, co stanowią podstawę agresywnego postępu choroby. Tutaj opisujemy szczegółowy protokół mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu (cOFM) w modelach myszy GBM, umożliwiający monitorowanie w czasie rzeczywistym podłużnego dynamiki mikrośrodowiska guza w płynie śródmiąższowym (ISF). Nasze podejście opisuje implantację trwałych kaniuli prowadzących na głowę, ich zastosowanie do wszczepienia glejaka śródmózgowego bezpośrednio przez przewodnik oraz zbieranie próbek cOFM o wysokiej wierności do analiz metabolomicznych i proteomicznych LC-MS. Co istotne, cOFM przezwycięża ograniczenia wielkości cząsteczki tradycyjnej mikrodializy. Poza GBM, metodologia cOFM obiecuje przełomowe wglądy w spektrum zaburzeń OUN, w tym neurodegeneracyjne, padaczkowe i neuropsychiatryczne, dzięki zdolności do dostarczania biomarkerów etiologicznych i reaktywnych na leczenie w ich modelach zwierzęcych.

Różne metody oceny mające na celu określenie sukcesu eksperymentu mogą być stosowane na etapach pośrednich lub końcowych, w zależności od specyficznego charakteru patologii podstawowej i modelu zwierzęcego badającego. Do badań biologii GBM obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) może być stosowane jako pośrednia miara oceny skuteczności przeszczepu komórek nowotworowych za pośrednictwem przewodnika cOFM (Rysunek 4A). Jednak jest to stosowane do prostych, dychotomicznych ocen obecnych lub nieobe...

In vivo komunikacja międzykomórkowa leżąca u podstaw wielu chorób ośrodkowego układu nerwowego, takich jak glejak (GBM), jest notorycznie trudna do zmierzenia i scharakteryzowania. Opisujemy tutaj procedury mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu (cOFM), które można zastosować do pobierania próbek składników płynu międzymiąższowego w podłużnym modelu zwierzęcym GBM.

Wykorzystanie mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do podłużnego pobierania płynu śródmiąższowego w zwierzęcym modelu glejaka

Diseases of the central nervous system (CNS) manifest through a complex, dynamic network of intercellular communication. Glioblastoma (GBM), the most ...

Charakteryzujemy rozpuszczalne składniki sygnalizacyjne w płynie śródmiąższowym guza mózgu, które przyczyniają się do postępu choroby i odpowiedzi na leczenie. Ocena absolutnych stężeń substancji rozpuszczonych w śródmiąższowym guzie mózgu pozostaje wyzwaniem badawczym wymagającym zastosowania zaawansowanych metod eksperymentalnych. Na początek, używając sterylnego skalpela, wykonaj strzałkowe nacięcie środkowe wzdłuż powierzchni czaszki, zaczynając między oczami i rozciągając się kaudalnie na 8 do 10 milimetrów.Następnie użyj sterylnych kleszczy, aby bocznie cofnąć skórę od nacięcia środkowego. Upewnij się, że zarówno bregma, jak i lambda są widoczne, i w razie potrzeby przedłuż nacięcie. Następnie sterylnym skalpelem naciń okost i cofnij tkankę bocznie za pomocą kleszczy.Nałóż od 1% do 3% nadtlenku wodoru sterylnym aplikatorem z bawełnianym końcówką, aby oczyścić powierzchnię czaszki. Teraz użyj strzykawki insulinowej o pojemności 0,3 do 1,0 mililitra, aby równomiernie nałożyć 20 do 40 mikrolitrów samotrawiającego kleju dentystycznego na powierzchnię czaszki. Następnie wystaw ją na światło do utwardzania zębów, aby wytrawić klej.Po utwardzeniu usuń nadmiar kleju sterylnymi aplikatorami z bawełnianymi końcówkami i solą fizjologiczną. Przesuń wiertło do współrzędnej prowadnicy cOFM. Ustaw wiertarkę na 15 000 obrotów na minutę i wywierć otwór na zadzior, używając mikromanipulatora DV.Często monitoruj grubość czaszki podczas wiercenia i przepłukuj solą fizjologiczną, aby usunąć zanieczyszczenia i zmniejszyć temperaturę. Powtórz procedurę wiercenia przy każdej współrzędnej śruby kotwicznej. Teraz zamontuj śruby kotwiące za pomocą sterylnych kleszczy i sterylnego śrubokręta, aż włożysz je na głębokość jednego lub dwóch gwintów.Następnie zamontuj prowadnicę cOFM i zespół atrapowy w uchwytie prowadnicy i przymocuj uchwyt do ramy stereotaktycznej. Umieść końcówkę prowadzącą nad otworem na zadziornie i powoli opuszczaj ją do ustalonej głębokości z prędkością 1 milimetra na minutę. Nakładaj środek cementujący na czaszkę cienkimi, jednolitymi warstwami, pokrywając obszary pod i wokół prowadnicy cOFM oraz śrub.Użyj światła do utwardzania zębów, aby utwardzić każdą warstwę przed nałożeniem kolejnej. Upewnij się, że cement pokrywa cały obszar między komponentami, unikając klina blokującego. Odłącz uchwyt prowadnicy od prowadnicy cOFM i powoli ją podnieś za pomocą pokrętła DV mikromanipulatora.Używając kleszczy, usuń klin blokujący z prowadnicy cOFM i zespołu atrapy. Delikatnie wyjmij manekina z prowadnicy. Użyj pokręteł mikromanipulatora ML i AP, aby wyrównać zespół wkładki do infuzji strzykawki na prowadnicy cOFM.Opuść wkład infuzyjną za pomocą pokrętła DV i zabezpieczyć go mocno, ponownie wkładając klin blokujący za pomocą kleszczy. Teraz wstrzyknij 3 mikrolitry zawiesiny komórkowej ze strzykawki o stężeniu 1 mikrolitra na minutę. Monitoruj okolice przewodnika cOFM, aby upewnić się, że żadna zawiesina komórkowa nie wydostaje się z zespołu.Użyj kleszczy, aby usunąć klin blokujący z prowadnicy i zespołu wkładki infuzyjnej. Następnie ostrożnie wyjmij wkład infuzacyjny z przewódki, używając pokrętła DV. Napełnij przewody rurek push and pull sztucznym płynem mózgowo-rdzeniowym za pomocą gazoszczelnych szklanych strzykawek.Zamontuj perystaltyczną część rury w głowicy pompy mikroperfuzyjnej. Podłącz woreczek perfuzacyjny do rurki pchającej za pomocą złącza Luer lock. Następnie podłącz wkładkę próbkową do rurki za pomocą złączek z kołnierzem.Przyczep dłuższy wał wlotowy do końca wyjściowego rury pchającej, a krótszy wał wylotowy do końca wejścia rury ciągniącej. Umieść podłączoną wkładkę do pobrania próbki do sterylnej rurki mikrowirówki zawierającej 750 mikrolitrów sztucznego płynu mózgowo-rdzeniowego. Podłącz iglicę kolektora frakcji do linii wyjściowej rury ciągniętej za pomocą złącza rury z kołnierzem.Następnie wykonaj przepłukanie rurki przez 20 minut przy 10 mikrolitrach na minutę, aby wyeliminować pęcherzyki powietrza. Następnie wstępnie napełnij rurkę wyciągającą sztucznym płynem mózgowo-rdzeniowym za pomocą gazoszczelnych strzykawek. Ponownie zamontuj rurkę perystaltyczną w głowicy pompy mikroperfuzyjnej.Podłącz wkładkę do próbki ponownie, używając złączek rur z kołnierzem. Podłącz wlot do końca wyjściowego rurki ciągnącej, a wylot do końca wejścia rurki ciągnącej. Włóż wkładkę do sterylnej mikrowirówki z 750 mikrolitrami sztucznego płynu mózgowo-rdzeniowego.Wykonaj kolejne 20-minutowe przepłukanie rur przy 10 mikrolitrach na minutę, aby usunąć wszelkie pozostałości pęcherzyków powietrza. Umieść znieczulone zwierzę w odpowiednio dopasowanej kurtce. Przeciągnij przednie kończyny całkowicie przez otwory na ramiona i mocno przypnij kurtkę na grzbiet zwierzęcia.Użyj kleszczy, aby usunąć klin blokujący z prowadnicy i atrapy. Następnie ostrożnie wyjmij wkładkę atrapową z prowadnicy. Delikatnie zamontuj wkładkę próbkową w prowadnicy i ponownie włóż klin blokujący.Wyjmij zwierzę z narkozy i umieść je w obracającym się systemie klatki. Przymocuj linę klatki do kurtki zwierzęcej i aktywuj system obrotowej klatki. Po pobraniu próbek cOFM dezaktywuj system obrotowej klatki i odłącz linę klatki od kurtki zwierzęcia.Teraz użyj kleszczy, aby usunąć klin blokujący z prowadnicy i zestawu wkładki próbkowej. Ostrożnie wyjmij wkładkę próbkową z prowadnicy, następnie delikatnie włóż wkładkę atrapową z powrotem do prowadnicy i ponownie włóż klin blokujący. Odpiąć zapięcia z tyłu kurtki zwierzęcej i delikatnie zdejmij kurtkę z ciała.Obrazowanie bioluminescencyjne potwierdziło obecność guzów u zwierząt z przeszczepem komórek nowotworowych za pomocą przewodnika cOFM. Analiza głównych składników proteomicznych płynu śródmiąższowego pobranego z próbki cOFM wykazała wyraźne rozdzielenie między grupami zwierzęcymi poddawanymi temozolomidem a grupami poddawanymi dimetylosulfoxid. Globalne rozkłady sygnałów metabolomowych pokrywały się niemal idealnie między próbkami temozolomidu i dimetylosulfotlenku.Pomimo nakładania się sygnałów, analiza wulkanów metabolomicznych wykazała wyraźne przesunięcie wywołane przez temozolomid. Ilościowe porównania wartości metabolomicznych u tych samych zwierząt wykazały, że konfiguracje recyrkulacyjne poprawiały stężenia analitów, zachowując względne proporcje metabolitów. Względna dostępność składników odżywczych w mikrośrodowisku guza mózgu pozostaje słabo poznana.Ten protokół jest wykorzystywany do wypełniania tej luki. Scharakteryzowanie dostępności składników odżywczych i sygnalizacji w mikrośrodowisku guza może wyjaśnić mechanizmy postępu glejaka oraz adaptacyjnej oporności na leczenie.

use-cerebral-open-flow-microperfusion-for-longitudinal-collection

Research

JoVE Journal

Cancer Research

Badania nad rakiem

Mikroskopia wewnątrzżyciowa do śledzenia czasowych i przestrzennych zdarzeń hemodynamicznych i zapalnych w mikrokrążeniu opony miękkiej.

Mikroskopia intravitalna mikrokrążenia mózgu myszy z wykorzystaniem zamkniętego okna czaszkowego

Ustaliliśmy korowy model glejaka ortotopowego u myszy do przyżyciowej mikroskopii dwufotonowej, który podsumowuje ograniczenia biofizyczne, które normalnie występują podczas wzrostu guza. Przewlekłe szklane okienko zastępujące czaszkę nad guzem umożliwia śledzenie postępu guza w czasie za pomocą mikroskopii dwufotonowej.

Ortotopowy mysi model glejaka wielopostaciowego utrzymujący fizyczne ograniczenia miąższu mózgu i nadający się do przyżyciowej mikroskopii dwufotonowej

Tutaj opisujemy skuteczny i wszechstronny protokół do indukcji, monitorowania i analizy nowych glejaków (GBM) za pomocą transpozonu DNA wstrzykiwanego do komór noworodków myszy. Komórki strefy podkomorowej, które pobierają plazmid, przekształcają się, namnażają i generują guzy o histopatologicznej charakterystyce ludzkiego GBM.

Integracja plazmidowego DNA za pośrednictwem transpozonu ze strefą podkomorową noworodków myszy w celu wygenerowania nowych modeli glejaka

Przedstawiona tutaj jest prosta metoda izolacji i analizy metodą cytometrii przepływowej komórek jednojądrzastych krwi obwodowej naciekającej glejak, która dostarcza zależnych od czasu danych ilościowych na temat liczby i statusu aktywacji komórek odpornościowych wchodzących do wczesnego mikrośrodowiska guza mózgu.

Izolacja i analiza cytometryczna przepływowa jednojądrzastych komórek krwi obwodowej naciekających glejaka

Przezczaszkowe obrazowanie optyczne umożliwia szerokie obrazowanie transportu płynu mózgowo-rdzeniowego w korze mózgowej żywych myszy przez nienaruszoną czaszkę.

Obrazowanie in vivo transportu płynu mózgowo-rdzeniowego przez nienaruszoną czaszkę myszy za pomocą makroskopii fluorescencyjnej

Mikrodysekcja laserowa (LMD) jest czułą i wysoce powtarzalną techniką, która może być wykorzystana do odkrycia ścieżek pośredniczących w heterogeniczności i inwazji glejaka. W tym miejscu opisujemy zoptymalizowany protokół izolacji dyskretnych obszarów z tkanki glejaka za pomocą laserowego LMD, a następnie analizy transkryptomicznej.

Mikrodysekcja podregionów glejaka do wychwytywania laserowego w celu przestrzennej i molekularnej charakterystyki heterogeniczności wewnątrznowotworowej, onkostrumieni i inwazji

Ta praca opisuje rozwój elastycznych elektrod międzypalcowych do implementacji w modelach 3D guzów mózgu, a mianowicie w hodowli in vitro, modelu in ovo i modelu mysim in vivo. Proponowana metoda może być wykorzystana do oceny wpływu pulsacyjnych pól elektrycznych na nowotwory na różnych poziomach złożoności.

Elastyczne organiczne urządzenia elektroniczne do terapii pulsacyjnym polem elektrycznym glejaka

Prezentujemy nowatorskie podejście do dwufotonowej mikroskopii dostarczania przez nowotwór znakowanych fluorescencyjnie nanocząstek tlenku żelaza do glejaka w modelu mysim.

Dwufotonowa mikroskopia przyżyteczna glejaka w modelu mysim

Prezentujemy metodę replikacji mikrośrodowiska guza glejaka na froncie inwazyjnym, która obejmuje przepływ płynu śródmiąższowego. Ten model to hydrożel hialuronowo-kolagenowy I we wkładzie do hodowli tkankowej, w którym można zastosować głowicę ciśnieniową płynu. Inwazję można określić ilościowo, a komórki można wyizolować lub poddać lizie.

Fotopolimeryzowalny model inwazyjnego mikrośrodowiska glejaka z przepływem śródmiąższowym z kwasem hialuronowym i kolagenem

Zrozumienie złośliwego zachowania raka wymaga stworzenia dokładnych modeli interakcji komórek nowotworowych z elementami mikrośrodowiska guza, takimi jak makrofagi. W tym miejscu opisujemy dwie metody badania interakcji komórek glejaka z makrofagami związanymi z nowotworem i mikroglejem, w których oceniany jest wpływ na inwazję glejaka.

Testy kokulturowe w celu zbadania stymulacji makrofagów i mikrogleju inwazji glejaka

Poznaj metodę mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do pobierania płynu śródmiąższowego w modelu glejaka. Ta technika umożliwia analizę składników sygnałowych i ocenę odpowiedzi na leczenie temozolomidem.

Wykorzystanie mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do podłużnego pobierania płynu śródmiąższowego w zwierzęcym modelu glejaka (Wideo) | JoVE Journal

Wykorzystanie mikroperfuzji otwartego przepływu mózgu do podłużnego pobierania płynu śródmiąższowego w zwierzęcym modelu glejaka

Przeglądaj więcej filmów