Ocena słabości w modelu starzejącej się myszy

Starzenie się wiąże się z postępującą utratą normalnych funkcji i różni się w zależności od osoby. Kruchość odzwierciedla niezdolność do utrzymania funkcji przy stresorach. Badanie słabości może poprawić zrozumienie zmienności i postępu starzenia.

Pomimo częstego stosowania klinicznych ocen słabości, wiele przedklinicznych projektów starzenia się nie uwzględnia słabości jako zmiennej zainteresowania, prawdopodobnie ze względu na przeszkody w wdrożeniu narzędzia oceny słabości. Ten wskaźnik słabości nie wymaga specjalistycznego sprzętu ani testów obciążających u myszy. Jest on konfigurowalny, co pozwala badaczom dostosować oceny do konkretnych wymiarów słabości istotnych dla ich obszarów badań.

Mamy nadzieję, że przedstawienie możliwości uproszczenia i wdrożenia indeksu słabości zachęci innych do wykorzystywania słabości jako zmiennej zainteresowania, co sprawi, że projekty będą bardziej klinicznie istotne. Na początek podziel ocenę na badanie otwarte, badanie manualne oraz ważenie. Do egzaminu na otwartym terenie przenieś interesującą nas mysz do otwartego środowiska.

Zbadaj cechy fizyczne, w tym łysienie, utratę koloru sierści, zapalenie skóry, zły stan sierści, kifozę, sztywność ogona, zaburzenia chodu, drżenie oraz nieprawidłowe oddychanie. Do badania ręcznego delikatnie podrapać myszkę za szyję. Zbadaj łysienie, utratę koloru sierści, zapalenie skóry, guzy, powiększony brzusz, zaćmę, wydzielinę z oka, wypadanie odbytnicy, wypadanie pochwy lub prącia oraz słaby wynik kondycji ciała.

Zmierz wagę po badaniach na otwartym polu i manualnych o stałej porze dnia, w ciągu dwóch do czterech godzin od rozpoczęcia okresu nieaktywności. Podczas badania na otwartym polu oceny pod kątem zaburzeń chodu. Przeciąganie kończyn, krążenie, chwiejne chwiejanie lub szerokie postawy to oznaki zaburzeń chodu.

Aby lepiej ocenić zaburzenia chodu, umieść mysz na pokrywie dużej klatki i przechyl ją. Delikatnie pogładzaj tył myszy, aby zachęcić ją do wspinaczki. Następnie pozwól myszy się zaaklimatyzować i obserwuj ją w spoczynku pod kątem zmian w tempie i głębokości oddychania.

Delikatnie głaszcz ogon palcem, aby ocenić jego sztywność. Podczas badania na otwartym polu należy ocenić kryteria skórne, w tym łysienie, utratę koloru sierści, zapalenie skóry oraz zły stan sierści. Łysienie występuje często z tyłu szyi i jest widoczne, gdy mysz swobodnie się porusza.

Kifozę najlepiej oceniać, obserwując krzywiznę kręgosłupa myszy podczas badania na otwartym polu, zarówno w spoczynku, jak i w ruchu. Kifoza ocenia się na podstawie zakresu nieprawidłowego wykrzywienia kręgosłupa widocznego podczas ruchu oraz pochylonej postawy w spoczynku. Sprawdź ręcznie, chwytając myszkę za szyję.

Używaj palców, aby ocenić zakres utraty tłuszczu i mięśni wokół kości łonowej i dolnej części kręgosłupa, co służy do oceny kondycji ciała. Trzymając mysz, obejrzyj oczy pod kątem oznak wydzieliny, skorupy lub przebarwienia oraz zaćmy. Obserwuj okolice klatki piersiowej i brzucha, aby wykryć dodatkowe oznaki łysienia – które często występują wokół stawów, zmiany futra, koloru skóry i zapalenia skóry.

Delikatnie przesuwaj palcem po brzuchu, aby ocenić obecność guzów lub spuchniętego brzucha. Ostrożnie pochyl głowę myszy w dół, aby ocenić obecność wypadania odbytniczej i pochwy lub prącia. Jeśli podejrzewa wypadanie, delikatnie opuszczaj mysz na otwarte pole.

Gdy już się uspokoi, delikatnie unieś ogon, aby potwierdzić wypadanie, jeśli nie ma żadnego obciążenia spowodowanego manipulacją. Po badaniach na otwartym polu i manualnych zważ mysz. Wyzeruj wagę między zwierzętami i zapisuj wagę do najbliższego 0,1 grama.

Podczas oceny każdej myszy przypisz każdemu wskaźnikowi kruchości wynik 0, 0,5 lub 1,0. Zanotuj wagę i oblicz średnią wszystkich 16 miar, aby uzyskać ostateczny wynik słabości. Notuj wszelkie zmiany zdrowotne lub behawioralne wymagające dalszej reakcji, a także wszelkie nieprawidłowe zachowania po utrzymaniu się.

Wartości indeksu słabości rosły stopniowo wraz z wiekiem we wszystkich grupach ocenianych w wieku 12, 18, 24 i 30 miesięcy. W wieku 18 miesięcy łysienie, kifoza i utrata koloru sierści były najczęściej obserwowanymi deficytami, szczególnie u samców myszy. W wieku 24 miesięcy powszechne stały się wyniki kondycji ciała i słabe problemy z sierścią.

Dane podłużne wykazały, że kruchość wzrastała wraz z wiekiem u obu płci, przy czym samce myszy miały wyższe wartości słabości w podobnym wieku. Bardzo niewielu mężczyzn obserwowano powyżej 120. tygodnia życia, co wskazuje na obniżoną przeżywalność u samców. Myszy, które doświadczyły utraty masy ciała o ponad 10%, były w zaawansowanym wieku i miały wskaźnik słabości przekraczający 0,15.

Większość myszy miała minimalne zmiany indeksu słabości poniżej 0,05 w odstępach dwutygodniowych. Większe wzrosty słabości były częstsze w starszym wieku i towarzyszyła im znaczna utrata masy ciała. Zaobserwowano cztery fenotypy zmiany masy ciała w formie kruchości, z których najczęstszy to wzrost słabości bez zmiany masy, obecny u 46% zwierząt śledzonych.

30% nie wykazało żadnej zmiany w kruchości ani masie. 12% myszy wykazywało wzrost słabości wraz z przyrostem masy ciała lub wzrost słabości wraz z utratą masy ciała.