30 grudnia 2025
Niniejsze badanie przedstawia protokół umożliwiający ustanowienie powtarzalnego, minimalnie inwazyjnego modelu zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej u szczura wywołanego chlorkiem żelaza, wykorzystując metodę szu jedwabnego w połączeniu z laserowym obrazowaniem z rozróżnieniem oraz ultrasonografią wysokiej rozdzielczości do oceny.
W naszej dziedzinie stosuje się kilka metod modelowania zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej. Jednak metoda indukcji chlorku żelaza jest szeroko stosowana ze względu na swoją prostotę i niskie koszty. Naszym celem jest udoskonalenie modelu zakrzepicy zatoki strzałkowej wywołanej chlorkiem żelaza poprzez zmniejszenie urazów kory i wizualizację zakrzepu zatokowego.
Na początek nałóż maść okulistyczną na oba oczy znieczulonego szczura i starannie ogol włosy na skórze głowy. Następnie zabezpiecz szczura w pozycji leżącej na platformie operacyjnej dla gryzoni, używając taśmy medycznej. Utrzymuj temperaturę ciała na poziomie około 37 stopni Celsjusza za pomocą termoforu.
Dokładnie zdezynfekuj ogoloną skórę głowy za pomocą 5% povidone-jodu, następnie 75% alkoholu, i powtórz po trzy razy każdy. Po potwierdzeniu głębokości znieczulenia za pomocą odruchu szczypania palców wykonaj 15-milimetrowe nacięcie okołośrodkowe na skórze głowy. Za pomocą tępego rozwarstwienia, oddziel powięzi pod spodem i okost, aby całkowicie odsłonić czaszkę.
Przerzedź czaszkę wiertłem czaszkowym aż zatoka strzałkowa górna będzie wyraźnie odsłonięta, zaczynając od lambdy i rozciągając się 10 milimetrów do przodu szwu strzałkowego. Stosuj technikę wiercenia przerywanego, aby uniknąć uszkodzenia podłoża twardego i zatoki strzałkowej górnej, a także wielokrotnie płukaj wiertło solą fizjologiczną, aby zapobiec uszkodzeniom termicznym kory mózgowej. Po obrazowaniu warunków wyjściowych nałóż 10-milimetrowy segment jedwabnego szwu 2-0, nasączonego roztworem chlorku żelaza 40% na odsłoniętą powierzchnię zatoki strzałkowej górnej przez pięć minut.
Zamień szew na świeżo namoczony segment i nałóż przez kolejne pięć minut. Następnie przepłucz pole operacyjne 0,5 mililitra soli fizjologicznej trzy razy, aby usunąć pozostałości chlorku żelaza. Zamknij skórę za pomocą szwów przerwanych za pomocą szwów 4-0 z jedwabiu i zdezynfekuj okolicę povidon-jodem.
Obserwuj szczura, aż całkowicie się obudzi, a następnie odłóż go do klatki. Włącz system laserowego obrazowania z kontrastem plamkowym oraz odpowiednie oprogramowanie, RF LSI w piątej wersji. Naciśnij przycisk trybu online, aby włączyć obrazowanie na żywo.
Reguluj wysokość i pozycję instrumentu, aż laser wskaźnikowy zostanie wycentrowany w polu widzenia. Umieść szczura na platformie z pianki i dostosuj jego pozycję, aż zatoka strzałkowa górna wyrówna się z laserem wskaźnikowym. Reguluj powiększenie i ostrość, aż obraz będzie wyraźnie wyświetlany.
Ustaw dolne i górne granice progu pseudokolorów, aby zoptymalizować wizualny wygląd pseudokolorowego obrazu. Ustaw okrągły zwrot zwrotu na zatokę strzałkową górną, zapisz przepływ żylny i zapisz oryginalne oraz pseudokolorowe obrazy. Przygotuj izofluran, żel USG, jednorazowe żyletki, taśmy medyczne i sprawdź wszystkie potrzebne narzędzia.
Zainstaluj trójwymiarowy silnik akwizycji na systemie obrazowania. Następnie zainstaluj przetwornik UHF 57X i inicjalizuj silnik. Po znieczuleniu szczura połóż go w pozycji leżącej na płycie termostatycznej ustawionej na 37 stopni Celsjusza i delikatnie zabezpiecz głowę oraz kończyny taśmami medycznymi.
Równomiernie nakładaj żel ultrasonograficzny na odsłoniętą skórę głowy. Dostosuj pozycję i orientację szczura względem przetwornika, aż zatoka strzałkowa górna i zakrzep śródświatłowy będą wyraźnie widoczne. Wykonaj sekwencyjne obrazy tomograficzne zatoki strzałkowej górnej w płaszczyźnie strzałkowej za pomocą obrazowania trójwymiarowego w trybie B o kroku 0,04 milimetra, a następnie tomograficzne obrazy w płaszczyźnie koronowej przy tych samych ustawieniach.
Użyj kolorowego trybu Dopplera, aby obserwować przepływ krwi w zatoce strzałkowej górnej, oraz zastosuj pulsacyjny tryb Dopplera, aby zmierzyć prędkość przepływu krwi. Odłóż znieczulenie i obserwuj szczura, aż całkowicie się obudzi. Następnie odłóż szczura do klatki.
Na koniec eksportuj pozyskane obrazy i analizuj je za pomocą oprogramowania Vevo LAB. Zapisz maksymalne przekróje strzałkowe i koronalne oraz objętość zakrzepa w zatoce strzałkowej górnej, a także maksymalną prędkość przepływu krwi w zatoce. Po miejscowym zastosowaniu chlorku żelaza, laserowe obrazowanie z kontrastem plamkowym wykazało istotne zmniejszenie lokalnego przepływu krwi w zatoce strzałkowej górnej w porównaniu do stanu wyjściowego.
Siódmego dnia po operacji USG u małych zwierząt potwierdziło powstanie zakrzepów w zatoce strzałkowej górnej z częściową rekanalizacją luminalną. Pulsacyjne badanie Dopplera wykazało mierzalną prędkość przepływu krwi w pozostałym świetle zatoki strzałkowej górnej. Trójwymiarowe obrazowanie ultrasonograficzne umożliwiło pomiar objętościowy zakrzepa zatoki strzałkowej za pomocą przekrojów obrazów szeregowych o grubości 0,04 milimetra.
Nasz udoskonalony model jest mniej inwazyjny i bardziej kompatybilny z obrazowaniem ultrasonograficznym, co umożliwia bardziej niezawodny i bezpośredni rozwój oraz ocenę terapii. Upewnij się, że międzyoperacyjne laserowe obrazowanie z kontrastem plamkowym potwierdza sukces modelu, a pooperacyjne ultradźwięki o wysokiej rozdzielczości dynamicznie monitorują powstawanie zakrzepów, lizę i reanalizację lumenów.
Wyświetl pełny transkrypt i uzyskaj dostęp do tysięcy filmów naukowych
Niniejszy artykuł przedstawia udoskonalony model szczura w zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej (SSS) z wykorzystaniem techniki szwu nasączonego FeCl3. Protokół ten minimalizuje uszkodzenia kory i zwiększa kompatybilność z metodami obrazowania, zapewniając powtarzalną i małoinwazyjną platformę do badania zakrzepicy żył mózgowych (CVT) oraz oceny potencjalnych terapii.
Niezawodne modele przedkliniczne zakrzepicy żył mózgowych (CVT) są niezbędne w badaniach translacyjnych i ocenie terapeutycznej w procesie odkrywania leków neuro naczyniowych. Zmodyfikowany model zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej indukowanej FeCl3 umożliwia powtarzalne, małoinwazyjne i kompatybilne z obrazowaniem badania, co zwiększa pewność prognostyczną we wczesnej fazie walidacji celów terapeutycznych i ograniczania ryzyka mechanistycznego. Platforma ta wspiera podejmowanie decyzji dotyczących portfela projektów, dostarczając ilościowych danych podłużnych na temat formowania się zakrzepu i rekanalizacji.
Model ten integruje się z continuum od etapu odkrywania do badań przedklinicznych, łącząc wczesne badania mechanistyczne z translacyjną oceną skuteczności w wskazaniach naczyniowo-neurologicznych.