Name: Ustanowienie zmodyfikowanej zakrzepicy zatoki strzałkowej wywołanej chlorkiem żelaza (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2025-12-30T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Poznaj zmodyfikowaną metodę zakrzepicy zatoki strzałkowej u szczurów z użyciem chlorku żelaza. Technika zmniejsza uszkodzenie kory mózgowej i umożliwia zaawansowane obrazowanie ultrasonograficzne trombu.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

Prace te były wspierane przez Narodową Fundację Nauk Przyrodniczych Chin (82401527).

Protokół ten został zatwierdzony przez Komitet ds. Eksperymentów na Zwierzętach i Dobrostanu Zwierząt Doświadczalnych Capital Medical University z numerem Zatwierdzenia. AEEI-2025-138. Odczynniki i używany sprzęt są wymienione w Tabeli Materiałów.
1. Ustanowienie zmodyfikowanego modelu SSST szczura indukowanego FeCl3
<ol>
	<li>Do eksperymentu użyj samców szczurów Sprague-Dawley (SD) w wieku 6-7 tygodni, ważących 220-250 g. Przed zabiegiem chirurgicznym przyzwyczaj szczury przez tydzień i wstrzymaj jedzenie przez 12 godzin.</li>
	<li>Przygotuj następujące odczynniki, narzędzia i sprzęt: 2% roztwór pentobarbitalu, 40% roztwór FeCl3 , 5% jodona povidonu, 75% alkohol, sól fizjologiczną, maść okulistyczną, jednorazowe żyletki, skalpele, nożyczki chirurgiczne, kleszcze, szwy jedwabne 2-0 i 4-0, igły do cięcia odwrotnego, uchwyty na igły, strzykawki 1 mL i 5 mL, taśmy medyczne, platforma operacyjna dla gryzoni, poduszka grzewcza z sondą temperatury odbytu, oraz mikro ręczną wiertłę czaszkową.</li>
	<li>Po ważeniu podaj przedoperacyjne środki przeciwbólowe za pomocą podskórnego zastrzyku buprenorfiny (0,1 mg/kg). Po 15–20 minutowym odstępie znieczulaj szczura, podając dootrzewnowy 2% pentobarbitalu (50 mg/kg) (zgodnie z zatwierdzonymi protokołami instytucjonalnymi). Następnie uszczypnij skórę kończyny tylnej szczypcami, aby potwierdzić brak reakcji odstawienia i bólu.</li>
	<li>Nałóż maść okulistyczną i ogol włosy szczura na skórze głowy jednorazową żyletką.</li>
	<li>Zabezpiecz szczura w pozycji leżącej na platformie operacyjnej dla gryzoni za pomocą taśm medycznych, utrzymuj temperaturę ciała na poziomie 37 ± 0,2 °C za pomocą poduszki grzewczej, a następnie stale monitoruj temperaturę rdzenia sondą odbytniczą.</li>
	<li>Dezynfekuj skórę głowy naprzemiennie podawaniem 5% povidon-jodu, następnie 75% alkoholu i powtarzaj po trzy razy każda.</li>
	<li>Wykonaj 15-milimetrowe nacięcie na skórze głowy w kształcie paramedian, a następnie tępo rozcinaj powięzi i okost pod spodem, aby całkowicie odsłonić czaszkę.</li>
	<li>Przecieńczaj czaszkę wiertłem czaszkowym aż SSS będzie wyraźnie odsłonięty, zaczynając od lambda i rozciągając się 10 mm do przodu wzdłuż szwu strzałkowego. Stosuj technikę wiercenia przerywanego, aby uniknąć uszkodzenia podłoża twardego i SSS, oraz wielokrotnie nawadniaj wiertło solą fizjologiczną, aby zapobiec uszkodzeniom termicznym kory mózgowej.</li>
	<li>Nałóż 10-mm segment szwu 2-0 z jedwabiu nasączonego roztworem 40% FeCl3 na odsłoniętą powierzchnię SSS przez 5 minut, a następnie zamień szew na nowo namoczony segment na kolejne 5 minut.</li>
	<li>Przepłucz pole operacyjne 0,5 ml soli fizjologicznej trzy razy, aby usunąć pozostałości FeCl3.</li>
	<li>Skórę zamykaj szwami przerwanymi za pomocą szwów jedwabnych 4-0, a następnie dezynfekcję povidonem jodem.</li>
	<li>Obserwuj szczura, aż całkowicie się obudzi, a następnie wróć go do klatki.</li>
</ol>
2. Ocena skutecznego ustanowienia modelu
UWAGA: Podczas zabiegu chirurgicznego LSCI było używane do pomiaru przepływu krwi żylnej w SSS po utworzeniu okna czaszkowego, przed zastosowaniem FeCl3 , a następnie ponownie po aplikacji FeCl3 i płukaniu pola chirurgicznego, ale przed zamknięciem skóry. Model ten jest uznawany za dobrze opracowany, gdy przepływ krwi żylnej w SSS wykazuje znaczne spadki.
<ol>
	<li>Włącz LSCI i odpowiednie oprogramowanie (RFLSI v5.0), a następnie naciśnij przycisk trybu online .</li>
	<li>Reguluj wysokość i pozycję instrumentu, aż laser wskaźnikowy zostanie wyśrodkowany w polu widzenia.</li>
	<li>Umieść szczura na platformie z pianki i dostosuj pozycję, aż SSS wyrówna się z laserem wskaźnikowym.</li>
	<li>Dostosuj powiększenie i ostrość, aż obraz będzie widoczny wyraźnie. Ustaw dolne i górne granice progu pseudokolorów na 10 i 200, aby zoptymalizować wizualny wygląd pseudokolorowego obrazu.</li>
	<li>Naciśnij przycisk Ustaw ROI , wybierz narzędzie okrągłe i wyznacz obszar SSS.</li>
	<li>Naciśnij przycisk Nagrywaj , aby uzyskać przepływ krwi żylnej i uchwycić zarówno oryginalne, jak i pseudokolorowe obrazy.</li>
</ol>
3. Ocena powierzchni/objętości zakrzepa oraz zmian hemodynamicznych
UWAGA: Kilka dni do kilku tygodni po zabiegu użyj ultrasonografii wysokiej rozdzielczości do oceny zmian zakrzepów i rekanalizacji naczyniowej.
<ol>
	<li>Przygotuj następujące leki, instrumenty i sprzęt: izofluran, żel ultradźwiękowy, jednorazowe żyletki, taśmy medyczne, aparat do znieczulenia dla małych zwierząt, wysokorozdzielczy system ultrasonografii i obrazowania fotoakustycznego dla małych zwierząt, liniowy przetwornik UHF57x o ultrawysokiej częstotliwości 70 MHz oraz silnik akwizycji 3D.</li>
	<li>Zamontuj silnik 3D akwizycji oraz przetwornik UHF57x. Następnie inicjalizuj silnik.</li>
	<li>Znieczulaj szczura w komorze indukcyjnej z 3% izofluranem zmieszanym z 1 L/min tlenu.</li>
	<li>Umieść szczura w pozycji leżącej na 37 °C na termostatycznej płycie obrazowej, delikatnie zabezpieczając głowę i kończyny taśmami medycznymi, a następnie utrzymuj znieczulenie 1,5%-2% izofluranem przez stożek nosa.</li>
	<li>Ogol włosy na skórze głowy jednorazową żyletką, aby odsłonić obszar detekcji, a następnie nałóż żel USG.</li>
	<li>Dostosuj pozycję i orientację szczura względem przetwornika, aż SSS i zakrzep śródświatłowy będą wyraźnie widoczne.</li>
	<li>Wykonanie sekwencyjnych obrazów tomograficznych SSS zarówno w płaszczyźnie strzałkowej, jak i koronowej za pomocą obrazowania 3D w trybie B z krokiem 0,04 mm.</li>
	<li>Użyj trybu Color Doppler, aby obserwować przepływ krwi w SSS, a następnie zastosuj tryb Dopplerowski z falą impulsową (PW), aby zmierzyć prędkość przepływu krwi.</li>
	<li>Odłóż znieczulenie i odłóż szczura do klatki po całkowitym przebudzeniu.</li>
	<li>Eksportuj obrazy i analizuj je za pomocą oprogramowania Vevo LAB. Zapisz maksymalne obszary przekroju strzałkowego i koronnego oraz objętość zakrzepa w SSS, a także maksymalną prędkość przepływu krwi w zatoce.</li>
</ol>

<ol><li>Saposnik, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnosis+and+management+of+cerebral+venous+thrombosis%3A+a+scientific+statement+from+the+American+Heart+Association%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Diagnosis and management of cerebral venous thrombosis: a scientific statement from the American Heart Association.</a> Stroke. 55 (3), e77-e90 (2024).</li>
<li>Cohen, O., Pegoraro, S., Ageno, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+venous+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Minerva+Med%22%5BJournal%5D)">Cerebral venous thrombosis.</a> Minerva Med. 112 (6), 755-766 (2021).</li>
<li>Li, M., Chen, J., Meng, R., Ji, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rhythmic+deep-brain+magnetic+stimulation+promotes+angiogenesis+and+inhibits+apoptosis+by+regulating+the+JAK2%2FSTAT3+pathway+in+rats+with+superior+sagittal+sinus+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Res%22%5BJournal%5D)">Rhythmic deep-brain magnetic stimulation promotes angiogenesis and inhibits apoptosis by regulating the JAK2/STAT3 pathway in rats with superior sagittal sinus thrombosis.</a> Brain Res. 1852, 149509(2025).</li>
<li>Röttger, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+new+model+of+reversible+sinus+sagittalis+superior+thrombosis+in+the+rat%3A+magnetic+resonance+imaging+changes%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosurgery%22%5BJournal%5D)">A new model of reversible sinus sagittalis superior thrombosis in the rat: magnetic resonance imaging changes.</a> Neurosurgery. 57 (3), 573-580 (2005).</li>
<li>Schoenwaelder, S. M., Jackson, S. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ferric+chloride+thrombosis+model%3A+unraveling+the+vascular+effects+of+a+highly+corrosive+oxidant%5BTitle%5D)+AND+%22Blood%22%5BJournal%5D)">Ferric chloride thrombosis model: unraveling the vascular effects of a highly corrosive oxidant.</a> Blood. 126 (24), 2652-2653 (2015).</li>
<li>Hachenberger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Aluminium+chloride+instead+of+ferric+chloride+for+inducing+superior+sagittal+sinus+thrombosis+to+reduce+ferromagnetic+artifacts+on+MRI+imaging+in+experimental+models%5BTitle%5D)+AND+%22Sci+Rep%22%5BJournal%5D)">Aluminium chloride instead of ferric chloride for inducing superior sagittal sinus thrombosis to reduce ferromagnetic artifacts on MRI imaging in experimental models.</a> Sci Rep. 14 (1), 10998(2024).</li>
<li>Gotoh, M., Ohmoto, T., Kuyama, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Experimental+study+of+venous+circulatory+disturbance+by+dural+sinus+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Neurochir+%28Wien%29%22%5BJournal%5D)">Experimental study of venous circulatory disturbance by dural sinus occlusion.</a> Acta Neurochir (Wien). 124 (2-4), 120-126 (1993).</li>
<li>Mu, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+rat+model+for+cerebral+venous+sinus+thrombosis%3A+verification+of+similarity+to+human+disease+via+clinical+analysis+and+experimental+validation%5BTitle%5D)+AND+%22J+Transl+Med%22%5BJournal%5D)">A novel rat model for cerebral venous sinus thrombosis: verification of similarity to human disease via clinical analysis and experimental validation.</a> J Transl Med. 20 (1), 174(2022).</li>
<li>Fries, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Occlusion+of+the+pig+superior+sagittal+sinus%2C+bridging+and+cortical+veins%3A+multistep+evolution+of+sinus-vein+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Occlusion of the pig superior sagittal sinus, bridging and cortical veins: multistep evolution of sinus-vein thrombosis.</a> J Neurosurg. 77 (1), 127-133 (1992).</li>
<li>Wang, J., Ji, X., Ling, F., He, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+anticoagulation+and+thrombolysis+treatments+in+a+rat+model+of+superior+sagittal+sinus+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Int+J+Neurosci%22%5BJournal%5D)">Comparison of anticoagulation and thrombolysis treatments in a rat model of superior sagittal sinus thrombosis.</a> Int J Neurosci. 124 (7), 532-541 (2014).</li>
<li>Ye, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impacts+on+thrombus+and+chordae+Willisii+during+mechanical+thrombectomy+in+the+superior+sagittal+sinus%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Neurol%22%5BJournal%5D)">Impacts on thrombus and chordae Willisii during mechanical thrombectomy in the superior sagittal sinus.</a> Front Neurol. 12, 639018(2021).</li>
<li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Photothrombosis+combined+with+thrombin+injection+establishes+a+rat+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Photothrombosis combined with thrombin injection establishes a rat model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> Neuroscience. 306, 39-49 (2015).</li>
<li>Rahal, J. P., Malek, A. M., Heilman, C. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Toward+a+better+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22World+Neurosurg%22%5BJournal%5D)">Toward a better model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> World Neurosurg. 82 (1-2), 50-53 (2014).</li>
<li>Kim, D. E., Schellingerhout, D., Jaffer, F. A., Weissleder, R., Tung, C. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Near-infrared+fluorescent+imaging+of+cerebral+thrombi+and+blood-brain+barrier+disruption+in+a+mouse+model+of+cerebral+venous+sinus+thrombosis%5BTitle%5D)+AND+%22J+Cereb+Blood+Flow+Metab%22%5BJournal%5D)">Near-infrared fluorescent imaging of cerebral thrombi and blood-brain barrier disruption in a mouse model of cerebral venous sinus thrombosis.</a> J Cereb Blood Flow Metab. 25 (2), 226-233 (2005).</li>
<li>Srivastava, A. K., Kalita, J., Haris, M., Gupta, R. K., Misra, U. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiological+and+histological+changes+following+cerebral+venous+sinus+thrombosis+in+a+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Neurosci+Res%22%5BJournal%5D)">Radiological and histological changes following cerebral venous sinus thrombosis in a rat model.</a> Neurosci Res. 65 (4), 343-346 (2009).</li>
<li>Wang, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Establishment+of+a+rat+model+of+superior+sagittal-sinus+occlusion+and+recanalization+via+a+thread-embolism+method%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Establishment of a rat model of superior sagittal-sinus occlusion and recanalization via a thread-embolism method.</a> Neuroscience. 416, 41-49 (2019).</li>
<li>Hachenberger, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comparison+of+edoxaban+and+enoxaparin+in+a+rat+model+of+AlCl3-induced+thrombosis+of+the+superior+sagittal+sinus%5BTitle%5D)+AND+%22Naunyn+Schmiedebergs+Arch+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Comparison of edoxaban and enoxaparin in a rat model of AlCl3-induced thrombosis of the superior sagittal sinus.</a> Naunyn Schmiedebergs Arch Pharmacol. 396 (12), 3887-3892 (2023).</li>
</ol>

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do zgłoszenia.

CVT to rzadki, ale potencjalnie zagrażający życiu specyficznytyp choroby naczyniowej 1. Aby dalej zbadać jego mechanizmy patologiczne i opracować skuteczne strategie interwencji, naukowcy opracowali różne modele zwierzęce SSST, głównie w tym podwiązanie lub zamknięcie SSS 7,8,9, iniekcję z substancji protoklawowej10, inkcję do skrzepów krwi autologiczną11, i...

Zakrzepica żylna mózgu (CVT) to szczególny typ choroby naczynia mózgowego, stanowiący 0,5-3% wszystkich udarów i będący ważną przyczyną udaru u młodych dorosłych1. Podstawową zmianą patologiczną tej choroby jest zakrzepica w żyłach oponowych i/lub żyłach mózgowych, która prowadzi do upośledzenia drenażu żylnego mózgu, a następnie do zwiększonego ciśnienia wewnątrzczaszkowego, obrzęku mózgu, zawału żylnego lub krwotoku2. Aby lepiej wyjaśnić jej mechanizmy i ocenić nowe interwencje terapeutyczne, niezbędne są wiarygodne i powtarzalne modele zwierzęce. Biorąc pod uwagę, że zatoka górna strzałkowa (SSS) jest najczęściej dotkniętym miejscem, a jej powierzchowne położenie ułatwia procedury operacyjne 2,3, obecne eksperymenty na zwierzętach wykorzystują głównie model zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej (SSST).
Spośród różnych metod modelowania, metoda indukcji chlorkiem żelaza (FeCl3) stała się jedną z najczęściej stosowanych ze względu na swoją prostotę operacyjną i opłacalność4. W tym modelu miejscowe zastosowanie roztworu FeCl3 bezpośrednio uszkadza śródbłonek zatoki żylnej, odsłaniając macierz podśródbłonkową dzięki silnym właściwościom oksydacyjnym. To narażenie aktywuje agregację płytek krwi i kaskadę krzepnięcia, ostatecznie indukując zakrzepicę zatoki żylnej5. Jednak w porównaniu z innymi metodami, tradycyjny model papieru FeCl z3 filtrami ma również kilka wad. Najważniejszym problemem jest to, że właściwości paramagnetyczne i wysoka podatność magnetyczna FeCl3 generują znaczne artefakty podczas obrazowania rezonansem magnetycznym, co poważnie obniża dokładność oceny zakrzepu i obserwacji reanalizacji zatoki żylnej6. Ponadto kształt papieru filtrującego nie pasuje dobrze do SSS, co czyni go podatnym na uszkodzenie mięźmiaszka mózgu otaczającego zatokę. Dlatego trudno jest ustalić, czy uszkodzenie mięźmiaszkowe wokół SSS wynika z samej zakrzepicy, czy z bezpośredniego uszkodzenia chemicznego spowodowanego przez FeCl3.
Głównym celem niniejszej pracy jest opracowanie zmodyfikowanego modelu SSST indukowanego FeCl3, który zmniejsza bezpośrednie uszkodzenia kory spowodowane przez FeCl3 oraz umożliwia ocenę przepływu krwi i wielkości zakrzepa w SSS. Badanie wprowadza podejście paramedialne połączone z techniką szywania nasączonego FeCl3, która minimalizuje bezpośrednie uszkodzenia chemiczne kory spowodowane FeCl3 oraz umożliwia monitorowanie w czasie rzeczywistym, nieinwazyjnego i ilościowego przepływu krwi i powstawania zakrzepów w zatokach żylnych za pomocą ultrasonografii wysokiej rozdzielczości.

<table><tbody><tr><td>1 mL strzykawki</td><td>Shenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.</td><td>21-3020</td><td></td></tr><tr><td>Szwy jedwabne 2-0</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co.,Ltd</td><td>A224</td><td></td></tr><tr><td>Silnik akwizycji 3D</td><td>Fujifilm VisualSonics</td><td>https://www.visualsonics.com/gallery/extended-3d-motor</td><td></td></tr><tr><td>Szwy jedwabne 4-0</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co.,Ltd</td><td>A222</td><td></td></tr><tr><td>5% jodu povidonu</td><td>Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.</td><td>https://www.lircon.cn/products_details/100.html</td><td></td></tr><tr><td>5 mL strzykawki</td><td>Shenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.</td><td>21-3023</td><td></td></tr><tr><td>Jednorazowa żyletka</td><td>Dongyang Jinmin Trading Co., Ltd.</td><td>ST300</td><td></td></tr><tr><td>FeCl3</td><td>Macklin</td><td>I811935</td><td></td></tr><tr><td>Poduszka grzewcza</td><td>Shenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.</td><td>36-0001</td><td></td></tr><tr><td>Izofluran</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>R510-22-10</td><td></td></tr><tr><td>System obrazowania laserowego plamkowego</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>RFLSI III</td><td></td></tr><tr><td>Przetwornik matrycowy liniowy</td><td>Fujifilm VisualSonics</td><td>UHF57x</td><td></td></tr><tr><td>Taśma medyczna</td><td>Suzhou Konlida Medical Supplies Co., Ltd.</td><td>B02</td><td></td></tr><tr><td>Mikro ręczna wiertła czaszkowa</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>78001</td><td></td></tr><tr><td>Uchwyt na igły</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>F31025-13</td><td></td></tr><tr><td>Sól fizjologiczna normalna</td><td>Shanghai Beyotime Biotechnology Co., Ltd.</td><td>ST341-500ml</td><td></td></tr><tr><td>Maść okulistyczna</td><td>Shenzhen Huayon Biotechnology Co., Ltd.</td><td>19-7223</td><td></td></tr><tr><td>Druty do cięcia odwrotnego</td><td>Shanghai Pudong Jinhuan Medical Products Co.,Ltd</td><td>TJ-3-514</td><td></td></tr><tr><td>Platforma operacyjna dla gryzoni</td><td>Shanghai Yuyan Scientific Instrument Co., Ltd.</td><td>30150</td><td></td></tr><tr><td>Ostrze skalpela</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>S31015-01</td><td></td></tr><tr><td>Rękojeść skalpela</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>S32003-12</td><td></td></tr><tr><td>Aparat do znieczulenia dla małych zwierząt</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>R500</td><td></td></tr><tr><td>System ultrasonografii i obrazowania fotoakustycznego dla małych zwierząt</td><td>Fujifilm VisualSonics</td><td>Vevo F2</td><td></td></tr><tr><td>Gładkie kleszcze</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>F12013-10</td><td></td></tr><tr><td>Pentobarbital sodu</td><td>Sigma-Aldrich (Shanghai) Trading Co., Ltd.</td><td>P3761</td><td></td></tr><tr><td>Nożyczki chirurgiczne</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>S14014-10</td><td></td></tr><tr><td>Ząbkowe kleszcze</td><td>Nauki o życiu z napędem na tylne koła</td><td>F12011-13</td><td></td></tr><tr><td>Żel ultradźwiękowy</td><td>Shandong Lircon Medical Technology Co., Ltd.</td><td>https://www.lircon.cn/products_details/230.html</td><td></td></tr></tbody></table>

ustanowienie zmodyfikowanej zakrzepicy zatoki strzałkowej wywołanej chlorkiem żelaza

Establishment of a Modified Ferric Chloride-Induced Superior Sagittal Sinus Thrombosis

Zakrzepica żylna mózgu (CVT) to rzadkie, ale potencjalnie zagrażające życiu zaburzenie neurologiczne. Modele zwierzęce stanowią kluczowe platformy do badania ich patofizjologii i oceny potencjalnych terapii. W niniejszym badaniu przedstawiamy zmodyfikowany model zakrzepicy zatoki strzałkowej (SSS) u szczurów, wykorzystując technikę szu nasączonego FeCl₃. Samce szczurów Sprague-Dawley (220-250 g) przeszły nacięcie przyśrodkowe na skórze głowy i stworzenie 1 cm okna kości czaszkowej nad SSS. W porównaniu do tradycyjnego nacięcia środkowego, to podejście zapobiega zrostom między naciętą skórą, oknem kostnym oraz poddany mięśniem twardym. Dodatkowo unika zakłóceń spowodowanych węzłami szwowymi umieszczonymi nad SSS, poprawiając tym samym jakość obrazowania ultradźwiękowego. Na odsłoniętą zatokę nakładano bezpośrednio na odsłoniętą zatokę szew 2-0 nasączony 40% FeCl3 przez dwa kolejne 5-minutowe odstępy. W porównaniu do tradycyjnej metody papieru FeCl z3 filtrami, ta technika minimalizuje bezpośrednie uszkodzenia chemiczne kory przysagittalnej. Do oceny perfuzji żylnej mózgu przed i po zastosowaniu FeCl3 zastosowano laserowe obrazowanie z kontrastem plamkowym (speckle contrast). Znaczące zmniejszenie przepływu krwi potwierdziło skuteczną zakrzepicę. Siedem dni po operacji formowanie się zakrzepów i zmiany hemodynamiczne zostały ocenione za pomocą ultrasonografii wysokiej rozdzielczości i przeanalizowane za pomocą oprogramowania Vevo LAB, które dostarczyło danych objętościowych i hemodynamicznych zakrzepa. Ten zmodyfikowany model oferuje powtarzalne, minimalnie inwazyjne i zgodne z obrazowaniem podejście do przedklinicznych badań CVT.

Schematyczny diagram zmodyfikowanego modelu SSST indukowanego FeCl3 przedstawiono na Rysunku 1. Wyniki eksperymentalne wykazały, że po zastosowaniu szwu nasyconegoFeCl 3 jedwabiem do SSS, LSCI wykryło istotne zmniejszenie lokalnego przepływu krwi, co wskazuje na skuteczne zatkanie zatoki żylnej i potwierdza wrażliwość LSCI na wykrywanie dynamicznych zmian perfuzji (Rysunek 2). W 7. dniu pooperacyjnym USG u małych zwierząt potwierdziło powst...

Niniejsze badanie przedstawia protokół umożliwiający ustanowienie powtarzalnego, minimalnie inwazyjnego modelu zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej u szczura wywołanego chlorkiem żelaza, wykorzystując metodę szu jedwabnego w połączeniu z laserowym obrazowaniem z rozróżnieniem oraz ultrasonografią wysokiej rozdzielczości do oceny.

Ustanowienie zmodyfikowanej zakrzepicy zatoki strzałkowej wywołanej chlorkiem żelaza

Cerebral venous thrombosis (CVT) is a rare but potentially life-threatening neurological disorder. Animal models offer critical platforms for ...

W naszej dziedzinie stosuje się kilka metod modelowania zakrzepicy zatoki strzałkowej górnej. Jednak metoda indukcji chlorku żelaza jest szeroko stosowana ze względu na swoją prostotę i niskie koszty. Naszym celem jest udoskonalenie modelu zakrzepicy zatoki strzałkowej wywołanej chlorkiem żelaza poprzez zmniejszenie urazów kory i wizualizację zakrzepu zatokowego.Na początek nałóż maść okulistyczną na oba oczy znieczulonego szczura i starannie ogol włosy na skórze głowy. Następnie zabezpiecz szczura w pozycji leżącej na platformie operacyjnej dla gryzoni, używając taśmy medycznej. Utrzymuj temperaturę ciała na poziomie około 37 stopni Celsjusza za pomocą termoforu.Dokładnie zdezynfekuj ogoloną skórę głowy za pomocą 5% povidone-jodu, następnie 75% alkoholu, i powtórz po trzy razy każdy. Po potwierdzeniu głębokości znieczulenia za pomocą odruchu szczypania palców wykonaj 15-milimetrowe nacięcie okołośrodkowe na skórze głowy. Za pomocą tępego rozwarstwienia, oddziel powięzi pod spodem i okost, aby całkowicie odsłonić czaszkę.Przerzedź czaszkę wiertłem czaszkowym aż zatoka strzałkowa górna będzie wyraźnie odsłonięta, zaczynając od lambdy i rozciągając się 10 milimetrów do przodu szwu st

establishment-modified-ferric-chloride-induced-superior-sagittal

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Neuronauka

Model zakrzepicy indukowanej FeCl3 u myszy jest opisany tutaj. Przedstawiono metodę monitorowania wzrostu skrzepliny za pomocą obserwacji mikroskopowej przyżyciowej naczynia krezkowego oraz pomiaru przepływu krwi w tętnicy szyjnej.

Mysi model zakrzepicy wywołanej chlorkiem żelaza na tętnicy szyjnej i naczyniu krezkowym

Opisujemy udoskonaloną procedurę modeli zakrzepicy indukowanej chlorkiem żelaza (FeCl3) na tętnicy szyjnej i krezkowej oraz żyle, scharakteryzowaną efektywnie za pomocą mikroskopii przyżyciowej do monitorowania czasu do powstania skrzeplin okluzyjnych.

Modele zakrzepicy myszy indukowanej chlorkiem żelaza

Tutaj tworzymy nowatorski szczurzy model zakrzepicy zatoki strzałkowej (SSS) metodą Sprague'a-Dawleya (SD) za pomocą metody embolizacji nici, a stabilność i niezawodność modelu zostały zweryfikowane.<br...

Ustalenie szczurzego modelu niedrożności zatoki strzałkowej górnej za pomocą metody zatorowości gwintowanej

Opisano metodę analizy migracji wyizolowanych komórek (komórek grzbietu neuronalnego tułowia). Metoda ta jest niedroga, łagodna i pozwala odróżnić chemotaksję zarówno od chemokinezy, jak i od innych czynników wpływających na polaryzację migracyjną, takich jak oddziaływania międzykomórkowe w pierwotnej kulturze komórek grzbietu neuronalnego tułowia.

Analiza migracji komórek grzbietowych neuralnych tułowia z wykorzystaniem zmodyfikowanego testu w komorze Zigmonda

Ostatnie ulepszenia w organotypowych preparatach do wycinania mózgu pozwoliły na ich wykorzystanie do zastosowań biotechnologicznych. Plastry organotypowe zachowują lokalne cechy strukturalne biologii in vivo, w tym funkcjonalne połączenia synaptyczne. Tutaj przedstawiamy regioselektywną biolistyczną metodę dostarczania do znakowania i genetycznej manipulacji tymi wycinkami.

Regioselektywne celowanie biolistyczne w organotypowych wycinkach mózgu przy użyciu zmodyfikowanego pistoletu genowego

Wewnątrzkomórkowa przebudowa Ca2+ w procesie starzenia się może przyczyniać się do ekscytotoksyczności i uszkodzenia neuronów, procesów, w których pośredniczy przeciążenie Ca2+. Naszym celem było zbadanie przebudowy Ca2 + w starzejącym się mózgu za pomocą obrazowania fluorescencyjnego i bioluminescencyjnego cytozolowego i mitochondrialnego Ca2 + w długoterminowych hodowlach neuronów hipokampa szczura, modelu starzenia się neuronów.

Obrazowanie fluorescencyjne i bioluminescencyjne subkomórkowego Ca2+ w starzejących się neuronach hipokampa

Ten manuskrypt zawiera protokoły, które wykorzystują elektroporację in utero (IUE) do opisania strukturalnej łączności neuronów na poziomie pojedynczej komórki i pobudliwości neuronów znakowanych fluorescencyjnie. Histologia służy do charakteryzowania projekcji dendrytycznych i aksonalnych. Zapis całych komórek w ostrych wycinkach służy do badania pobudliwości.

In Utero (w macicy) Podejścia elektroporacyjne do badania pobudliwości subpopulacji neuronalnych i połączeń pojedynczych komórek

Analiza chodu kinematycznego w płaszczyźnie strzałkowej dostarcza bardzo precyzyjnych informacji o tym, jak wykonywany jest ruch. Opisujemy zastosowanie tych technik do identyfikacji deficytów chodu u myszy poddanych demielinizacji o podłożu autoimmunologicznym. Metody te mogą być również wykorzystane do scharakteryzowania deficytów chodu dla innych modeli myszy z upośledzoną lokomocją.

Analiza kinematyczna chodu w płaszczyźnie strzałkowej u myszy C57BL/6 poddanych eksperymentalnemu autoimmunologicznemu zapaleniu mózgu i rdzenia wywołanemu MOG35-55

Tutaj prezentujemy protokół wprowadzający szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej (MMPM).

Szczurzy model zmęczenia centralnego przy użyciu zmodyfikowanej metody wieloplatformowej

Prezentowany tutaj jest protokół do ustalenia ostrego zawału mostu w modelu szczurzym za pomocą stymulacji elektrycznej za pomocą pojedynczego impulsu.

Ustalenie ostrego zawału mostu u szczurów za pomocą stymulacji elektrycznej

Poznaj zmodyfikowaną metodę zakrzepicy zatoki strzałkowej u szczurów z użyciem chlorku żelaza. Technika zmniejsza uszkodzenie kory mózgowej i umożliwia zaawansowane obrazowanie ultrasonograficzne trombu.

Ustanowienie zmodyfikowanej zakrzepicy zatoki strzałkowej wywołanej chlorkiem żelaza

Przeglądaj więcej filmów