Name: Miasta jako pogranicza zagrożeń zoonotycznych: rozwój nowojorskiego systemu nadzoru miejskiego kleszczy i dzikiej fauny (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-03-10T13:30:00.000+00:00
Duration: 10 min 17 s
Description: Poznaj metody nadzoru kleszczy i dzikiej fauny w miastach, łączące pułapki fotograficzne z systematycznym zbieraniem kleszczy. To podejście pomaga badać ryzyko chorób zoonotycznych w środowiskach miejskich.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To dzieło zostało wsparte przez Narodowe Fundacje Naukowe w ramach Grantu na Badania Doktoranckie (grant #10328000) oraz przez program Narodowej Fundacji Naukowej Zintegrowane Systemy Przyrodniczo-Ludzkie 2/Dynamika Zintegrowanych Systemów Społeczno-Środowiskowych (CNH2/DISES) (Nagroda #1924061). Finansowanie zapewniły również Centra ds. Kontroli i Zapobiegania Chorobom w ramach wsparcia dla Northeast Regional Center for Excellence in Vector-Borne Diseases: Teaching & Evaluation Center (NEVBD-TEC) (Nagroda #NU50CK000633). Jego treść leży wyłącznie w gestii autorów i niekoniecznie reprezentuje oficjalne poglądy Centrów ds. Kontroli i Zapobiegania Chorobom, Departamentu Zdrowia i Opieki Społecznej lub Narodowej Fundacji Naukowej.
Chcielibyśmy również wyrazić wdzięczność za wsparcie Urban Wildlife Information Network, z szczególnym podziękowaniem dla Dr. Setha Magle, Dr. Masona Fidino oraz Kimberly Rivera za pomoc w ustawianiu naszej ścieżki pułapek kamerowych na dzikie zwierzęta. Dziękujemy członkom laboratorium ekologii oraz studentom Columbia i Barnard College, którzy pomagają w doradzaniu, ustawianiu, prowadzeniu badań terenowych, identyfikacji kleszczy i/lub oznaczaniu zdjęć, w tym Dr. Meredith VanAcker, Dr. Nichar Gregory, Sung-Joo Lee, Alexis Angulo, Hanna Chen, Molly Durawa, Rebecca Garcia, Aidyn Levin, Jake Miller, Safa Muhammad, Devorah Gordin i Adara Anisman. Dodatkowo dziękujemy Miejskiemu Parkowi i Rekreacji Nowego Jorku, Hrabstwu Nassau, Miejscowości North Hempstead, North Shore Land Alliance, New York State DEC, New York State Parks, cmentarzowi Green-Wood, cmentarzowi Evergreens, cmentarzowi Maple Grove, Old Westbury Gardens, SUNY Old Westbury oraz zarządcom golfowym przyjaznym środowisku za dostęp do prowadzenia badań w ich zielonych przestrzeniach. Badania te prowadzono na ziemiach indiańskich Lenape, Matinecock, Merrick, Nissaquogue i Massapequas.

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do zadeklarowania.

Dzięki inicjatywie TWUSS, ten protokół pokazuje, jak zaprojektować sparowany transekt do monitorowania kleszczy i dzikiej przyrody, który uchwyci gradient urbanizacji. Wyniki reprezentatywne z tego systemu pozwoliły na zidentyfikowanie czynników wpływających na zagrożenie kleszczami w skali krajobrazu i gospodarzy dzikiej przyrody w obszarach miejskich25. Kluczowe dane dotyczące gospodarzy kleszczy z pojedynczego systemu kamer do badania dzikiej przyrody zostały również wykorzystane do zidentyfikowania obszarów w Nowym Jorku, które mogą być w nowo podwyższonym ryzyku25. Podkreśla to znaczenie ciągłego monitorowania kleszczy i dzikiej przyrody w miastach w miarę globalnego wzrostu urbanizacji, podkreślając potrzebę standardowego projektu i metodologii nadzoru70. Replikowanie TWUSS w miastach, gdzie pojawiają się zagrożenia związane z chorobami przenoszonymi przez kleszcze, pozwoliłoby na porównanie na dużą skalę między miastami wskaźników krajobrazu miejskiego wpływających na rozprzestrzenianie się kleszczy i gospodarzy dzikiej przyrody25,70.
Transekt TWUSS obejmuje różne rodzaje zieleni, praktyki zarządzania i jurysdykcje zarządzania terenami, z 20 różnymi grupami zarządzania terenami wymagającymi umieszczenia kamer do badania dzikiej przyrody i pozyskiwania kleszczy. Dlatego TWUSS opiera się na uczestnictwie różnorodnych współpracowników, a dowody sugerują, że zaangażowanie lokalnych uczestników może poprawić długoterminowy sukces systemów nadzoru nad kleszczami94,95 oraz wysiłki na rzecz ochrony dzikiej przyrody i bioróżnorodności, w tym w kontekście miejskim96,97,98,99. Współpraca z miejskimi parkami i departamentami zdrowia przyczyniła się do zwiększenia liczby tablic informacyjnych w zielonych obszarach, gdzie pobiera się kleszcze o długich nogach, oraz ukierunkowanego nadzoru wektorów przez miejski departament zdrowia tam, gdzie nowo zidentyfikowano zagrożenia związane z kleszczami.
Z dużą ilością zebranych danych wiąże się duże zadanie przetwarzania danych, identyfikacji kleszczy i identyfikacji gatunków dzikiej przyrody na zdjęciach. Utrzymanie zorganizowanej współdzielonej bazy danych projektu (krok 9.2) zawierającej wszystkie informacje i dane z projektu było kluczowym elementem sukcesu TWUSS, ponieważ obowiązki zarządzania projektem zmieniały się w trakcie jego realizacji. Dodatkowo, klasyfikacja kleszczy i dane fotograficzne mogą być skutecznym sposobem na zaangażowanie młodych naukowców i wolontariuszy w projekt oraz zwiększenie zainteresowania zarówno gatunkami dzikiej przyrody, jak i zagrożeniami związanymi z kleszczami zamieszkującymi ich lokalne tereny zielone. Dzięki TWUSS, możliwości edukacyjne dla studentów zostały zintegrowane z projektem poprzez uczestnictwo w przetwarzaniu danych z transektu. W ciągu dwóch lat od uruchomienia TWUSS, ponad 30 młodych naukowców (studentów na poziomie licencjatu i magisterskim) wniosło wkład do klasyfikacji obrazów i identyfikacji kleszczy, a dla wielu z nich była to pierwsza doświadczenia z badaniami. Oprócz tworzenia możliwości dla studentów uniwersytetów, przeprowadzono kilka inicjatyw dotyczących zaangażowania społeczności z Akademią Nauki w Nowym Jorku i Harcerkami. Dzięki tym działaniom, aktywni naukowcy zaangażowani w transekt są sparowani z organizacjami społecznymi, aby ułatwić praktyczne nauka i entuzjazm wobec lokalnych kleszczy i miejskiej dzikiej przyrody. Dzięki tym projektom, młodzi wolontariusze nauczyli się, jak umieszczać kamery do badania dzikiej przyrody, zbierać dane i podsumowywać obserwacje.
W przyszłości istnieje potencjał dla dodatkowych transektów w Nowym Jorku. Ponieważ TWUSS nadal się rozwija, ogromna ilość danych obrazów zebranych przez każdą kamerę do badania dzikiej przyrody może ograniczać postęp badań ze względu na powolny proces klasyfikacji obrazów100. Ostatnie osiągnięcia technologiczne, w tym włączenie algorytmów uczenia maszynowego do przetwarzania danych z kamer do badania dzikiej przyrody, mogą pomóc zmniejszyć ten opóźnienie101. TWUSS wykorzystuje platformę internetową (krok 8.1), która wykorzystuje modele uczenia maszynowego do początkowej klasyfikacji obrazów i zwiększyła efektywność zarządzania, analizy i udostępniania danych z kamer do badania dzikiej przyrody z TWUSS.
Oprócz tych pozytywnych wyników, TWUSS zmierzył się z wyzwaniami związanymi z pracą terenową w mieście, takimi jak wandalizm lub kradzież kamer do badania dzikiej przyrody. W pierwszych dwóch latach zbierania danych (kwiecień 2022–styczeń 2024), cztery kamery zostały skradzione, a trzy uszkodzone (czyli całkowicie lub częściowo rozbite), co prowadzi do wskaźnika wymiany kamer do badania dzikiej przyrody na poziomie 2% na jedno wdrożenie, co jest zgodne z innymi badaniami nad miejską d

Większość ludności świata zamieszkuje obszary miejskie, które nieustannie rozrastają się zarówno pod kątem liczby mieszkańców, jak i zasięgu geograficznego1. Choć ekspansja miast jest jednym z głównych zagrożeń dla globalnej różnorodności biologicznej1,2,3, obszary zurbanizowane są coraz częściej zagospodarowywane w celu zapewnienia siedlisk dla dzikich zwierząt poprzez zazielenianie miast, ponieważ naturalne siedliska ulegają przekształceniu i fragmentacji4,5,6,7. Współistnienie gęsto zaludnionych obszarów miejskich z dziką przyrodą może prowadzić do interakcji między ludźmi a zwierzętami o charakterze zarówno pozytywnym (np. poczucie związku z naturą)8, jak i szkodliwym (np. transmisja chorób odzwierzęcych)9. Historycznie dzika fauna w systemach miejskich była niedostatecznie zbadana10, co stworzyło krytyczną lukę w zrozumieniu trwałości populacji zwierząt, ryzyka wystąpienia chorób odzwierzęcych11 oraz koegzystencji ludzi i dzikich zwierząt12 w zmieniającym się świecie.
Północno-wschodnie Stany Zjednoczone (U.S.) są intensywnie zurbanizowane13 i stanowią ognisko występowania kleszczy wirginijskich (Ixodes scapularis) oraz pojawiania się chorób przenoszonych przez kleszcze14, przy czym ryzyko to wykazuje różnice przestrzenne w obrębie regionu15. Choroby przenoszone przez kleszcze, takie jak borelioza, są najczęściej zgłaszanymi chorobami wektorowymi w U.S., z liczbą prawie 500 000 przypadków rocznie14. W stanie Nowy Jork kleszcze wirginijskie przenoszą kilka patogenów istotnych dla zdrowia publicznego, w tym Borrelia burgdorferi (czynnik etiologiczny boreliozy), Anaplasma phagocytophilum (czynnik etiologiczny anaplazmozy), Babesia microti (czynnik etiologiczny babeszjozy) oraz wirus Powassan (czynnik etiologiczny choroby z wirusa Powassan)16. Oprócz kleszcza wirginijskiego, po niedawnym zawleczeniu, w północno-wschodniej części kraju szybko utrwaliła się populacja kleszcza długorogiego (Haemaphysalis longicornis)17,18, a inne rodzime kleszcze-wektory, takie jak kleszcz samotna gwiazda (Amblyomma americanum), który może wywołać zespół alfa-gal19, zwiększają liczebność i rozszerzają swój zasięg na północ20,21, co stwarza nowe wyzwania dla zdrowia publicznego.
Choć zagrożenia związane z kleszczami w obszarach zurbanizowanych rosną15,22, większość badań nad kleszczami koncentrowała się na obszarach wiejskich i podmiejskich22,23,24, co doprowadziło do powstania istotnych luk w zrozumieniu ekologii patogenów przenoszonych przez kleszcze wzdłuż gradientów urbanizacji oraz w miejskich przestrzeniach zielonych15,25. Aktywny nadzór nad kleszczami, dzikimi żywicielami oraz drapieżnikami tych żywicieli jest niezbędny w celu opracowania lokalnych praktyk zarządzania opartych na dowodach26.
Nowy Jork (NYC) posiada największą populację ludzi spośród wszystkich miast w USA13. W 2020 roku szacowano, że w pięciu dzielnicach NYC mieszkało &gt;8,4 miliona osób13, a w szerszym obszarze metropolitalnym &gt;20,1 miliona osób13. Chociaż NYC ma wyższą średnią gęstość zabudowy (około 4700 jednostek mieszkalnych na km2) niż jakiekolwiek inne miasto w USA13, miasto to posiada również ponad 29 000 akrów (14% powierzchni lądowej) terenów parkowych zarządzanych przez NYC Department of Parks and Recreation27, które stanowią istotne siedliska i refugia dla setek gatunków dzikich zwierząt28,29. Miasto leży wzdłuż szlaku migracyjnego Atlantic Flyway, będącego drogą przelotu dla milionów ptaków30,31, i zostało niedawno ponownie zasiedlone przez kilka gatunków średnich ssaków, w tym w szczególności przez kojota wschodniego (Canis latrans x Canis lycaon)32, skunksa pręgowanego (Mephitis mephitis)33 oraz jelenia białogoniego (Odocoileus virginianus)34.
W związku z inwestycjami Nowego Jorku w ponowną zazielenie miasta35, prawdopodobnie wzrośnie częstotliwość interakcji między ludźmi a dziką przyrodą36. Choć wzrost bioróżnorodności miejskiej może być oznaką zdrowego ekosystemu37 i może przywrócić poczucie kontaktu z naturą w życiu miejskim38, interakcje z dzikimi zwierzętami w miastach mogą również prowadzić do transmisji patogenów zoonotycznych11,39. Ssaki przystosowane do warunków miejskich, takie jak szop podsiewka (Procyon lotor), są w tym względzie gatunkami interesującymi, ponieważ mogą wykazywać większą tolerancję na urbanizację niż inne duże ssaki40,41 i mogą pośredniczyć w transmisji patogenów zoonotycznych na obszarach miejskich42. Kolejnym gatunkiem budzącym zainteresowanie są jelenie ogoniaste, gdyż stwierdzono, że ich obecność w miejskich terenach zielonych zwiększa liczebność kleszczy i potęguje ryzyko zachorowania na boreliozę25,43.
W granicach miasta Nowy Jork działa rozbudowany program nadzoru nad wektorami, prowadzony przez Departament Zdrowia; jednak kleszcze nie są badane w tak szerenym zakresie w najbardziej zurbanizowanych terenach zielonych miasta44,45,46. Wysiłki w zakresie nadzoru nad kleszczami w sąsiednich hrabstwach różnią się pod względem intensywności47,48, co utrudnia porównania międzygminne. Przeprowadzono wiele badań nad zagrożeniami związanymi z kleszczami w środowisku miejskim17,18,43,46,49 oraz dziką fauną33,34,50,51 w granicach miasta, co dostarczyło cennych informacji na temat tego, jak kleszcze, patogeny przenoszone przez kleszcze i dzikie zwierzęta mogą reagować na środowiska miejskie i je wykorzystywać. Jednak skutki urbanizacji w odniesieniu do zagrożeń przenoszonych przez kleszcze i społeczności dzikich zwierząt wykraczają poza centrum miasta, rozciągając się wzdłuż gradientów urbanizacji15,52,53,54. Według najlepszej wiedzy autorów nie istnieją miejskie systemy nadzoru nad kleszczami, które monitorowałyby sposób pojawiania się kleszczy i ich gospodarzy z dzikiej fauny w środowiskach wzdłuż gradientów urbanizacji. Aby pomóc mieszkańcom Nowego Jorku reagować na pojawiające się zagrożenia przenoszone przez kleszcze i współistnieć z dziką fauną, zróżnicowana grupa partnerów z Nowego Jorku opracowała Miejski System Nadzoru nad Kleszczami i Dziką Fauną (Tick and Wildlife Urban Surveillance System, TWUSS), obejmujący gradient urbanizacji od Nowego Jorku przez Long Island, NY.
<img alt="Schemat analizy wpływu urbanizacji; zbieranie kleszczy, monitorowanie dzikiej przyrody, proces raportowania danych." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69755/69755fig1.jpg" data-altupdatedat="1787025648000" data-alt="Rysunek 1"> 
Rysunek 1. Etapy projektowania, wdrażania i utrzymywania Systemu Miejskiego Nadzoru nad Kleszczami i Dziką Przyrodą. Strzałki sprzężenia zwrotnego zostały naniesione między wyborem potencjalnych terenów zieleni, uzyskaniem zgód na dostęp do terenu a wyborem miejsc do zbierania kleszczy i rozmieszczenia fotopułapek. Rysunek wykonany w programie BioRender. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/69755fig1large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
Przed ustanowieniem TWUSS powołano komitet doradczy składający się z kluczowych partnerów z zakresu zarządzania dziką przyrodą oraz ekspertów w dziedzinie ekologii zagrożeń przenoszonych przez kleszcze, którzy przekazali sugestie i uwagi dotyczące projektu transektów (Rycyna 1). Odbywano comiesięczne spotkania w celu ustalenia celów projektu, uzgadniając, że głównym celem naukowym było uwzględnienie stanowisk obejmujących gradient urbanizacji, łączności siedlisk oraz wielkości płatów. Włączenie wielu doradców pozwoliło na wykorzystanie głębokiej lokalnej wiedzy o obszarze. Na przykład wymiana uwag między partnerami pomogła zaplanować możliwość uchwycenia przez sieć dynamiki ekspansji i rozprzestrzeniania się kojotów na Long Island32. Opinie partnerów ułatwiły również włączenie stanowisk, w których zarządcy wyrazili gotowość do zapewnienia dostępu, grupy społecznościowe mogły pomóc w obsłudze fotopułapek i/lub fotoznakowaniu, a członkowie zespołu posiadali osobiste kontakty umożliwiające dostęp do terenu.
Fotopułapki do monitorowania dzikiej przyrody (nazywane również kamerami terenowymi lub łowieckimi; w dalszej części tekstu określane jako kamery do monitorowania dzikiej przyrody) zostały powszechnie przyjęte jako nieinwazyjna i stosunkowo tania metoda zbierania danych o zwierzętach, co zmieniło rutynowy sposób prowadzenia badań nad dziką przyrodą55,56. Kamery do monitorowania dzikiej przyrody umożliwiają gromadzenie ogromnych ilości danych obrazowych, co nie byłoby możliwe przy zastosowaniu tradycyjnych metod obserwacji terenowych57. Urban Wildlife Information Network (UWIN) opracowała schemat transektów dla fotopułapek, który jest udostępniany partnerskim miastom członkowskim na całym świecie w celu monitorowania rozmieszczenia lokalnej dzikiej przyrody wzdłuż gradientów miejskich58. Schemat transektów UWIN został zaadaptowany, a kamery do monitorowania dzikiej przyrody połączono z pobieraniem kleszczy w ramach stworzenia TWUSS (Rysunek 1). Do pobierania próbek kleszczy wykorzystano metodę „przeciągania tkaniny” (tzw. tick drags) jako standardowy sposób szacowania zagęszczenia kleszczy59. Próbkowanie koncentrowało się na stadium nimfy, ponieważ nimfy kleszczy są głównym wektorem patogenów przenoszonych przez kleszcze na ludzi. Próbkowanie kleszczy prowadzono zatem od końca maja do końca lipca, zgodnie z szczytem aktywności nimf kleszczy I. scapularis w północno-wschodniej części USA60.
Aby partner miejski mógł dołączyć do sieci UWIN, głównym wymogiem jest wyznaczenie co najmniej jednego transektu, który pomieści 25–30 lokalizacji stacji z fotopułapkami58; nie istnieje wymóg co do minimalnej długości, ani wymóg, aby transekt biegł w linii prostej. Zgodnie z wymogami sieci UWIN, stacje z fotopułapkami mogą być rozmieszczone w każdym obszarze użytkowanym przez dziką przyrodę, w tym w ogrodach przydomowych58. Jednakże program TWUSS koncentruje się na publicznych lub półpublicznych terenach zielonych, takich jak parki miejskie, cmentarze, rezerwaty leśne, pola golfowe lub duże ogrody, w celu rozmieszczenia fotopułapek pozwalających na uchwycenie rozprzestrzenienia bardziej wrażliwych gatunków docelowych, takich jak jelenie białogoniowe i skunksy6. Transekt w Nowym Jorku (NYC) ma długość 55 km i szerokość 4 km, podzielony na dziesięć odcinków o długości 5 km każdy. W 2022 roku w każdym odcinku utworzono cztery stacje z fotopułapkami, co łącznie dało 40 lokalizacji poboru próbek fauny, rozciągających się od Brooklynu po hrabstwo Nassau w stanie Nowy Jork. W 2023 roku dodano kolejny odcinek na Staten Island w stanie Nowy Jork. W przypadku zbiorów kleszczy wykluczono pola golfowe ze względu na stosowanie insektycydów i aktywne zwalczanie kleszczy, co mogłoby zakłócić dane61, w wyniku czego 29 lokalizacji stacji z fotopułapkami stało się również miejscami zbioru kleszczy.
TWUSS różni się od innych systemów nadzoru nad kleszczami zastosowaniem projektu transekcyjnego w gradiencie urbanizacji oraz parowaniem zestandaryzowanych metod gromadzenia danych o kleszczach i dzikich zwierzętach26,62,63. W nadzór nad kleszczami zaangażowanych jest wiele instytucji rządowych i pozarządowych64. Jednak większość działań w zakresie nadzoru nad kleszczami ma ograniczony cel w postaci wykrywania obecności kleszczy i opiera się na pasywnych, niestandaryzowanych metodach nadzoru62,63,65. Metody nadzoru pasywnego (tzn. zgłoszenia o kleszczach na platformach nauki obywatelskiej) mają przewagę nad metodami nadzoru aktywnego ze względu na niskie koszty i relatywnie niewielki nakład pracy potrzebny do ich utrzymania62,66, lecz nie pozwalają na głębokie zrozumienie trendów przestrzennych i czasowych63. W 2020 roku Centers for Disease Control and Prevention (CDC) opublikowało kompleksowy przewodnik po aktywnym nadzorze nad kleszczami, który zawiera szczegółowe instrukcje przeprowadzania przeciągów kleszczowych, lecz zawiera jedynie ogólne wytyczne dotyczące wyboru lokalizacji59, co jest krytycznym krokiem w ocenie zagrożenia kleszczami67. Ponadto obecne metody nadzoru nad kleszczami rzadko obejmują powiązany monitoring dzikich zwierząt, mimo że ekologia kleszczy jest ściśle powiązana z ich żywicielami wśród dzikich zwierząt68,69. Urban Wildlife Institute podjął znaczne wysiłki w celu zestandaryzowania monitoringu dzikich zwierząt w obrębie gradientów urbanizacji poprzez utworzenie UWIN58, a istnieje potencjał do rozszerzenia takich sieci w celu realizacji celów One Health70. Dzięki połączeniu zestandaryzowanych metod zbierania kleszczy i monitorowania dzikich zwierząt w gradiencie urbanizacji, TWUSS umożliwia istotne porównania dynamiki populacji kleszczy i ich żywicieli wśród dzikich zwierząt tam, gdzie działania w zakresie aktywnego nadzoru były ograniczone22.
Projekt TWUSS jest najbardziej odpowiedni dla obszarów miejskich, w których występują, rozszerzają swój zasięg lub pojawiają się dzikie zwierzęta, kleszcze oraz przenoszone przez nie patogeny64,70. Kluczowym ograniczeniem, o którym należy wspomnieć, jest zależność od zgód partnerów oraz duży nakład pracy wymagany do utrzymania transektu. W niniejszej pracy przedstawiamy proces ustanawiania transdyscyplinarnej współpracy w celu zaprojektowania, wdrożenia i utrzymania spójnego systemu fotopułapek dla dzikich zwierząt oraz nadzoru nad kleszczami.

<table><tbody><tr><td>1x1 m white corduroy or flannel drag cloth</td><td>Ecoloogy Supplies</td><td>0015T</td><td>Można kupić gotowy lub zbudować zgodnie z wskazówkami zawartymi przez CDC 2020 lub Salomon et al. 2020.</td></tr><tr><td>32+ GB SD memory card</td><td>SanDisk</td><td>SDSDXXO-032G-GN4IN</td><td>Do przechowywania zdjęć</td></tr><tr><td>Batteries (most cameras require AA)</td><td>Duracell</td><td>MN1500B20&nbsp;</td><td>Do zasilania aparatów</td></tr><tr><td>Camera adjustable locking cable</td><td>Moultrie (Python brand)</td><td>MCA-21667</td><td>Do zabezpieczania aparatów</td></tr><tr><td>Camera security box</td><td>Browning</td><td>BTC-SB-SM</td><td>Do zabezpieczania aparatów</td></tr><tr><td>Camera trap mounting strap</td><td>Moultrie</td><td>MCA-12667</td><td>Do umieszczania aparatów</td></tr><tr><td>Clear plastic packing tape</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Do etykietowania skrzynek na aparaty do obserwacji dzikiej przyrody i do zbierania dużej ilości larw. Każda marka działa.</td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td>AmScope</td><td>SM-1BSX-64S</td><td>Do identyfikacji kleszczy</td></tr><tr><td>DNA/RNA Sheild</td><td>Zymo research</td><td>R1100-250</td><td>Do przechowywania kleszczy</td></tr><tr><td>Eppendorf Safe-Lock Tubes 1.5 mL - Microtube</td><td>Fisher scientific</td><td>05-402-94</td><td>1,5 ml fiolki do przechowywania kleszczy</td></tr><tr><td>Ethanol 200 proof</td><td>Thermo scientific</td><td>T038181000</td><td>Do przechowywania kleszczy</td></tr><tr><td>Fanny pack</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Do przechowywania/organizowania materiałów do zbierania kleszczy w terenie. Każda marka działa.</td></tr><tr><td>Fine tipped permanent markers</td><td>Staedtler</td><td>55580-PK10</td><td>Do etykietowania rurek na kleszcze</td></tr><tr><td>Forceps</td><td>Fisher scientific</td><td>12-000-121</td><td>Do zbierania kleszczy z ubrania i identyfikacji pod mikroskopem&nbsp;</td></tr><tr><td>GIS Software</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Można użyć ArcGIS, QGIS lub R w zależności od preferencji użytkownika</td></tr><tr><td>Kestrel 3000 Weather Meter</td><td>Kestrel Meters</td><td>830</td><td>Do pomiaru warunków klimatycznych / pogodowych</td></tr><tr><td>Motion-triggered camera trap (Browning strike force pro recommended)</td><td>Browning</td><td>BTC-5PX-1080</td><td>Do fotografowania dzikich zwierząt&nbsp;</td></tr><tr><td>Writing utensil (pen or pencil)</td><td>NA</td><td>NA</td><td>Do wypełniania arkuszy danych. Każda marka działa.</td></tr></tbody></table>

miasta jako interfejsy pojawiania się zoonoz: rozwój systemu nadzoru miejskiej populacji kleszczy i dzikich zwierząt w nowym jorku

Cities As Interfaces of Zoonotic Hazard Emergence: Development of the New York City Tick and Wildlife Urban Surveillance System

Zagrożenia związane z kleszczami w miejskich krajobrazach wzrastają, ale nadal istnieją krytyczne luki w rozumieniu ryzyka chorób przenoszonych przez kleszcze wśród ludzi na różnych poziomach urbanizacji. Wraz z utratą naturalnego siedliska na całym świecie, zielone przestrzenie miejskie mogą stanowić krytyczne siedlisko dla dzikich zwierząt, co ma różne konsekwencje dla pojawiania się chorób przenoszonych przez kleszcze. Obszar metropolitalny Nowego Jorku ma najwyższą gęstość zaludnienia i największy zasięg geograficzny spośród wszystkich miast w Stanach Zjednoczonych, zawierając jednocześnie rozległą sieć przestrzeni zielonych. Te miejskie przestrzenie zielone różnią się otaczającą pokrywą lądową i łącznością, zapewniając ważne schronienie i siedlisko dla setek gatunków dzikich zwierząt miejskich, które były historycznie niedostatecznie badane. Zgodnie z wiedzą autorów, nie ma systemów nadzoru nad kleszczami miejskimi, które monitorowałyby, jak kleszcze i ich dzikie gospodarze reagują i pojawiają się w środowiskach miejskich. Aby wypełnić tę lukę, na obszarze od Nowego Jorku przez Long Island w stanie Nowy Jork, zbudowano długoterminowy system nadzoru nad kleszczami i dzikimi zwierzętami wzdłuż gradientu urbanizacji. Opisujemy proces współpracy z różnorodną grupą partnerów w celu zaprojektowania, wdrożenia i utrzymania połączonego systemu pułapek na dzikich zwierzęta i nadzoru nad kleszczami. Proces rozpoczął się od utworzenia komitetu doradczego składającego się z ekspertów od chorób przenoszonych przez kleszcze i partnerów zajmujących się zarządzaniem dzikimi zwierzętami, którzy dostarczyli wskazówek i opinii, aby wspólnie przepracować następujące kroki: 1) początkowe wizualizacja i wyznaczenie gradientu urbanizacji, 2) potencjalny wybór przestrzeni zielonych, 3) pozwolenia na terenie, 4) wybór miejsca dla kamer na dzikich zwierząt i miejsca pobierania kleszczy, 5) umieszczanie kamer na dzikich zwierzętach, 6) pobieranie kleszczy, 7) identyfikacja kleszczy, 8) identyfikacja fotograficzna dzikich zwierząt, 9) utrzymanie szlaków i raportowanie wyników. W miarę jak Nowy Jork i inne miasta na całym świecie nadal się rozwijają, projekty współpracy takie jak System Nadzoru Miejskiego nad Kleszczami i Dzikimi Zwierzętami mogą generować wiedzę, która pomoże ludziom reagować na nowe zagrożenia zoonotyczne w środowiskach miejskich.

Linia transekcyjną została wyznaczona tak, aby objąć gradient urbanizacji obejmujący trzy hrabstwa, od miasta Nowy Jork przez Long Island w stanie NY (Rycina 2).
<img alt="Mapy analizy miejskiej; schematy powierzchni nieprzepuszczalnych, gęstości zabudowy mieszkaniowej, koron drzew, dane z transektu." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69755/69755fig2.jpg" data-altupdatedat="1787025648000" data-alt="Rysunek 2"> 
Rysunek 2. Mapy transektu wzdłuż gradientu urbanizacji. (A) Intensywność urbanizacji reprezentowana przez procent powierzchni nieprzepuszczalnych według NLCD. (B) Gęstość zabudowy mieszkaniowej na podstawie jednostek bloków spisowych. (C) Procentowe pokrycie koron drzew wyznaczone na podstawie danych NLCD. (D) Obrazy satelitarne przedstawiające transekt wykorzystany do odłowu kleszczy i rozmieszczenia fotopułapek dla dzikich zwierząt. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/69755fig2large.jpg" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
Wszystkie punkty rozmieszczenia fotopułapek oraz punkty pobierania kleszczy dla transektu w NYC (odpowiednio n = 44 i n = 38) zostały zlokalizowane w parkach publicznych (n = 21, n = 23), na polach golfowych (n = 6, n = 0), na cmentarzach (n = 5, n = 3), w rezerwatach przyrody (n = 9, n = 9) oraz w ogrodach publicznych (n = 3, n = 3) (Tabela 1).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td >Typ terenów zielonych</td>
			<td >Liczba lokalizacji fotopułapek</td>
			<td >Liczba lokalizacji zbioru kleszczy</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Park publiczny</td>
			<td >21</td>
			<td >23</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Rezerwat przyrody</td>
			<td >9</td>
			<td >9</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Ogród publiczny</td>
			<td >3</td>
			<td >3</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Cmentarz</td>
			<td >5</td>
			<td >3</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Pole golfowe</td>
			<td >6</td>
			<td >0</td>
		</tr >
		<tr >
			<td >Suma lokalizacji</td>
			<td >44</td>
			<td >38</td>
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 1: Podsumowanie liczby punktów rozmieszczenia fotopułapek oraz punktów zbioru kleszczy w zależności od typu terenu zielonego.
Obliczenia procentowego pokrycia koron drzew, procentowej powierzchni nieprzesiąkliwej oraz gęstości zabudowy w promieniu 2 km od każdego miejsca rozmieszczenia fotopułapki wykazały, że rozmieszczenie kamer w obrębie każdego segmentu transektu skutecznie uchwyciło średnią i rozrzut (cztery lokalizacje) wskaźników miejskich wzdłuż gradientu urbanizacji od Nowego Jorku przez Long Island w stanie Nowy Jork (Rysunek 5). Ponieważ w każdym segmencie transektu wybrano dwie lokalizacje silnie zalesione i dwie słabo zalesione, zmienność procentowego pokrycia koron drzew w odległości 100 m od każdej fotopułapki wykazała, że lokalna jakość siedlisk wokół każdej kamery nie różniła się znacząco (niski R2) wzdłuż gradientu urbanizacji (Rysunek 5D).
<img alt="Analiza użytkowania terenu przedstawiająca wykresy segmentów transektu; powierzchnia nieprzepuszczalna, gęstość zabudowy mieszkaniowej, korony drzew." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69755/69755fig5.jpg" data-altupdatedat="1787025648000" data-alt="Rysunek 5"> 
Rysunek 5. Charakterystyka środowiskowa wokół fotopułapek na całym trasekcie. W każdym 5 km segmencie transektu (1-10) od zachodu na wschód umieszczono cztery fotopułapki, a (A) procentowa powierzchnia nieprzepuszczalna, (B) gęstość zabudowy mieszkaniowej oraz (C) pokrycie koronami drzew są przedstawione w promieniu 2 km od każdej fotopułapki. (D) Pokrycie koronami drzew w promieniu 100 m od miejsca rozmieszczenia fotopułapki reprezentuje różnorodność jakości mikrosiedliska w wybranych terenach zielonych. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/69755fig5large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić większą wersję tego rysunku.</a>
Od momentu uruchomienia systemu TWUSS wiosną 2022 roku do lata 2023 roku, gromadzenie danych terenowych zaowocowało 4 928 dniami fotopułapkingsiwych zwierząt oraz zebraniem 3 421 nimf kleszczy *Ixodes scapularis*, 575 nimf kleszczy *Amblyomma americanum* oraz 329 nimf kleszczy *Haemaphysalis longicornis* ze wszystkich lokalizacji (Tabela 2).
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody>
		<tr>
			<td>Gatunki kleszczy w stadium nimfy</td>
			<td>Całkowita liczba zebranych próbek</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Amblyomma americanum (Kleszcz samotna gwiazda)</td>
			<td>575</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Haemaphysalis longicornis (Długorogi)</td>
			<td>329</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Ixodes scapularis (czarnonogiego)</td>
			<td>3421</td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Wszystkie kleszcze w stadium nimfy</td>
			<td>4325</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
Tabela 2: Podsumowanie zbiorów nimf kleszczy z podziałem na gatunki we wszystkich 38 lokalizacjach i w dwóch latach pobierania próbek (2022-2023).
Na podstawie zdjęć z fotopułapek zidentyfikowano 34 unikalne gatunki we wszystkich urządzeniach (pełną listę gatunków przedstawiono w Pliku uzupełniającym 3), w tym 16 gatunków ssaków i 16 gatunków ptaków (Rycina 6). Fotopułapki zostały skonfigurowane tak, aby monitorować aktywność średnich ssaków, i zaobserwowano siedem następujących gatunków średnich ssaków: kojota (Canis latrans var.), lisa rudego (Vulpes vulpes), szopa pracza (Procyon lotor), oposa wirgińskiego (Didelphis virginiana), skunksa pręgowanego (Mephitis mephitis), jelenia ogonacza (Odocoileus virginianus) oraz świstaka (Marmota monax).
<img alt="Schemat kategoryzacji zwierząt; obejmuje średnie ssaki, ptaki, małe ssaki, zwierzęta domowe." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69755/69755fig6.jpg" data-altupdatedat="1787025648000" data-alt="Figure 6"> 
Rysunek 6. Zbiór reprezentatywnych obrazów zarejestrowanych wzdłuż transektu, obejmujący średnie ssaki, małe ssaki, ptaki, zwierzęta domowe oraz ludzi. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/69755fig6large.jpg" target="_blank">Kliknij tutaj, aby wyświetlić powiększoną wersję tego rysunku.</a>
Dzięki wdrożeniu protokołu TWUSS ustanowiono pierwszy sprzężony transekt monitorujący zagrożenie kleszczami w obszarach miejskich oraz monitoring dzikiej przyrody wzdłuż gradientu urbanizacji. Wcześniej opublikowane badanie oparte na tym systemie nadzoru powiązało wskaźniki urbanizacji wzdłuż gradientu, dane dotyczące kluczowego gospodarza kleszczy (jelenia ogoniaczego) uzyskane z fotopułapek oraz dane z odłowu kleszczy w celu zidentyfikowania kaskadowego wpływu urbanizacji na zasiedlenie gospodarzy z dzikiej przyrody oraz intensywność zagrożenia kleszczami25. Badanie to wykazało, że zwiększona łączność terenów zielonych, zwiększony udział koron drzew oraz zmniejszenie powierzchni nieprzepuszczalnych hierarchicznie zwiększały prawdopodobieństwo występowania jelenia ogoniaczego, co stanowiło istotny czynnik predykcyjny dla liczebności nimf kleszczy I. scapularis w obrębie każdego terenu zielonego (Ryc. 7, Tabela 3)25.
<img alt="Wykresy łączności funkcjonalnej i zajmowania terenu przez jelenie; próg, korelacja liczby kleszczy w badaniu ekologicznym." class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/69755/69755fig7.jpg" data-altupdatedat="1787025648000" data-alt="Rysunek 7"> 
Rysunek 7. Reprezentatywne wyniki wykresów modelowych z projektu parowania fotopułapek dla dzikiej przyrody i transektów zbioru kleszczy. (A) Łączność funkcjonalna jako najsilniejszy predyktor prawdopodobieństwa zajmowania terenu przez jelenia ogoniaczego. (B) Liczba nimf kleszcza pospolitego jako istotna funkcja zajmowania terenu przez jelenia ogoniaczego. Dla wykresu A model zajmowania terenu wygenerowano na podstawie zdjęć jelenia ogoniaczego z fotopułapek ustawionych w latach 2022-2023. Dla wykresu B punkty wskazują liczbę kleszczy zebranych w terenie w latach 2022-2023 na 1600 m2 próby, a linia regresji i błąd standardowy reprezentują predykcję modelu dwumianowego ujemnego. Oś y jest ograniczona do &lt;300 kleszczy w celu lepszej wizualizacji. Rysunek zaadaptowany i zreprodukowany za zgodą Lilly et al. 202525 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/69755fig7large.jpg" target="_blank">Aby zobaczyć powiększoną wersję tego rysunku, kliknij tutaj.</a>
<table border="1" fo:keep-together.within-page="1" fo:keep-with-next.within-page="always">
	<tbody >
		<tr >
			<td colspan="3">Typ modelu</td>
			<td colspan="2">Zmienna odpowiedzi</td>
			<td colspan="2">Komponent modelu</td>
			<td >Estymacja</td>
			<td >SE</td>
			<td >z</td>
			<td >P( &gt;|z|)</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3">Model zajętości jednosezonowy</td>
			<td colspan="2">Zajętość przez jelenie</td>
			<td colspan="2">(Przechwyt)</td>
			<td >3.04</td>
			<td >1.79</td>
			<td >1.7</td>
			<td >0.09</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3"></td>
			<td colspan="2"></td>
			<td colspan="2">Łączność funkcjonalna</td>
			<td >11.09</td>
			<td >4.08</td>
			<td >2.72</td>
			<td >&lt; 0.01</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3">Model zajętości jednosezonowy</td>
			<td colspan="2">Zajętość przez jelenie</td>
			<td colspan="2">(Przechwyt)</td>
			<td >−1.53</td>
			<td >1.04</td>
			<td >−1.48</td>
			<td >0.14</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3"></td>
			<td colspan="2"></td>
			<td colspan="2">Procentowe pokrycie koron drzew</td>
			<td >6.15</td>
			<td >2.27</td>
			<td >2.7</td>
			<td >&lt; 0.01</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3">Model zajętości jednosezonowy</td>
			<td colspan="2">Zajętość przez jelenie</td>
			<td colspan="2">(Przechwyt)</td>
			<td >−1.26</td>
			<td >0.91</td>
			<td >−1.39</td>
			<td >0.16</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3"></td>
			<td colspan="2"></td>
			<td colspan="2">Procent powierzchni nieprzepuszczalnych</td>
			<td >−5.85</td>
			<td >2.24</td>
			<td >−2.62</td>
			<td >&lt; 0.01</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3">Uogólniony liniowy model mieszany z rozkładem dwumianowym ujemnym. Jako efekty losowe uwzględniono lokalizację i rok.</td>
			<td colspan="2">Obfitość nimf kleszcza pospolitego</td>
			<td colspan="2">(Przechwyt)</td>
			<td >−9.04</td>
			<td >0.81</td>
			<td >−11.17</td>
			<td >&lt; 0.001</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3"></td>
			<td colspan="2"></td>
			<td colspan="2">Procentowe pokrycie koron drzew w obrębie terenów zielonych</td>
			<td >4.43</td>
			<td >0.57</td>
			<td >7.79</td>
			<td >&lt; 0.001</td>
		</tr >
		<tr >
			<td colspan="3"></td>
			<td colspan="2"></td>
			<td colspan="2">Zajętość przez jelenie</td>
			<td >0.03</td>
			<td >0.01</td>
			<td >2.33</td>
			<td >0.02</td>
		</tr >
	</tbody >
</table>
Tabela 3: Reprezentatywne wyniki z modelu dla projektu parowania transektów z fotopułapkami i punktów zbioru kleszczy. Wyniki modelu zajętości wykazujące najważniejsze predyktory obecności jeleni; wyniki uogólnionego liniowego modelu mieszanego z rozkładem dwumianowym ujemnym, przedstawiające liczebność nimf kleszcza *Ixodes scapularis* jako funkcję zajętości przez jelenie oraz procentowego pokrycia koron drzew w obrębie terenów zielonych. Tabela zaadaptowana i powielona za zgodą autorów z publikacji Lilly et al. 202525
Plik uzupełniający 1. Przykład etykiety skrzynki zabezpieczającej fotopułapkę. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/Supplementary%20File%201.docx" target="_blank">Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.</a>
Plik uzupełniający 2. Przykładowy arkusz danych dotyczących zbioru kleszczy. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/Supplementary%20File%202.docx" target="_blank">Prosimy kliknąć tutaj, aby pobrać ten plik.</a>
Plik uzupełniający 3. Lista 34 unikalnych gatunków uchwyconych przez kamery pułapki w ramach NYC Wildlife Transect i zidentyfikowanych wizualnie przez badaczy. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/69755/Supplementary%20File%203.docx" target="_blank">Kliknij tutaj, aby pobrać ten plik.</a>

Istnieje krytyczna potrzeba monitorowania, jak kleszcze i ich dzikie gospodarze reagują na urbanizację. Ten protokół opisuje kroki rozwoju standaryzowanego Systemu Urbanistycznej Nadzoru nad Kleszczami i Dzikimi Zwierzętami, który umożliwi adaptacyjne zarządzanie w odpowiedzi na nowe zagrożenia związane z kleszczami w środowiskach miejskich.

Miasta jako interfejsy pojawiania się zoonoz: Rozwój systemu nadzoru miejskiej populacji kleszczy i dzikich zwierząt w Nowym Jorku

Tick-borne hazards in urban landscapes are increasing, yet critical gaps remain in understanding human tick-borne disease risk across urbanization ...

Badaniami sprawdzamy, jak urbanizacja i dzika przyroda wpływają na zagrożenia związane z kleszczami, aby zrozumieć dynamiki przenoszenia patogenów i ryzyko dla zdrowia publicznego. Ten protokół wypełni lukę w naszej wiedzy na temat roli dzikich zwierząt w chorobach przenoszonych przez kleszcze. Obie te dziedziny mają bardzo specyficzne, standaryzowane metody, które do tej pory nie były połączone w taki sposób, abyśmy mogli zrozumieć, jak społeczności dzikiej przyrody wpływają na choroby przenoszone przez kleszcze w obszarach miejskich.Po wybraniu miejsc obserwacji dzikich zwierząt w mieście i miejsc kontroli kleszczy, uporządkuj całe wymagane wyposażenie i upewnij się, że są dostępne odpowiednie kamery do obserwacji dzikich zwierząt, karty pamięci, zamki i pudełka na zamki dla każdego wdrożenia. Przygotuj wystarczającą liczbę świeżych baterii, upewniając się, że każda kamera do obserwacji dzikich zwierząt ma zainstalowany pełny zestaw nowych baterii. Większość kamer do obserwacji dzikich zwierząt wymaga od sześciu do ośmiu baterii AA.Przed każdym nadchodzącym wdrożeniem kamer do obserwacji dzikich zwierząt, upewnij się, że wszystkie dane z poprzedniego sezonu zostały pobrane z kart pamięci i odpowiednio zapisane. Stwórz etykietę, która zawiera krótki opis projektu i informacje kontaktowe, takie jak stały adres e-mail projektu. Wydrukuj etykietę i zamocuj ją bezpiecznie na górze każdego pudełka na zamki do kamer do obserwacji dzikich zwierząt za pomocą przezroczystej taśmy pakunkowej.Oznacz każdą kamerę do obserwacji dzikich zwierząt unikalnym numerem identyfikacyjnym kamery. Następnie oznacz kartę SD tym samym identyfikatorem kamery, idealnie kojarząc ją z nazwą miejsca. Ustaw poprawną datę i godzinę na każdej kamerze do pułapki na dzikie zwierzęta.Dostosuj ustawienia na każdej kamerze do obserwacji dzikich zwierząt, aby używać trybu wieloklatkowego z trzema zdjęciami, 30-sekundową przerwą między uchwyceniami, 24-godzinnym okresem działania i minimalną rozdzielczością obrazu 16 megapikseli. Podczas wizyty w miejscu wybierz drzewa w promieniu 50 metrów od losowo wygenerowanego punktu, które są odpowiednie do umieszczenia kamery do obserwacji dzikich zwierząt. Po wybraniu odpowiedniego drzewa do umieszczenia kamery, usuń wszelkie duże kawałki trawy, liście lub przedmioty, które mogą przesłaniać pole widzenia kamery i zakłócać jej działanie, które mają odległość wykrywania do 80 stóp.To zmniejsza fałszywe wyzwalania spowodowane ruchem wiatru. Umieść kamerę do obserwacji dzikich zwierząt na wysokości kolan, około 50 centymetrów, w miejscu, które jest ukryte przed szlakami, skieruj kamerę od obszarów o natężeniu ruchu ludzi, takich jak szlaki lub chodniki, aby zminimalizować wykrywania ludzi. Unikaj umieszczania kamery w kierunku wprost na wschód lub zachód, aby zapobiec oślepieniu słońcem.Następnie sprawdź, czy kamera do obserwacji dzikich zwierząt jest wyrównana równolegle do ziemi. Wdrażaj kamery do obserwacji dzikich zwierząt w każdym wybranym miejscu przez co najmniej 28 dni, upewniając się, że wdrożenia następują w styczniu, kwietniu, lipcu i październiku, aby uchwycić sezonowe zmiany w użytkowaniu siedlisk i zajmowaniu ich przez dzikie zwierzęta. Przygotuj wszystkie wymagane materiały do procedury ciągnięcia kleszczy.Nosząc jednorazowe rękawiczki laboratoryjne, takie jak rękawice lateksowe lub nitro, napełnij dwa do trzech fiolek na transekcie roślin co najmniej 500 mikrolitri 85% etanolu lub osłony RNA DNA. Następnie wydrukuj wystarczającą liczbę arkuszy danych, aby odpowiadały każdemu planowanemu transektowi. Umieść wszystkie materiały do pobierania kleszczy, w tym pincety, trwałe znaczniki, przygotowane fiolki, przezroczystą taśmę z plastiku do pobierania obfitego larw i narzędzie do pisania do robienia notatek, do worka na biodra do użytku w terenie.Przygotuj jeden worek na biodra na każdego zbieracza danych terenowych. Oszacuj długość kroku każdego zbieracza danych terenowych, prosząc go o przejście trzy razy transektu o długości 10 metrów, a następnie oblicz średnią długość kroku. Dla bezpieczeństwa osobistego podczas pobierania kleszczy przygotuj odzież o długich rękawach w jasnym kolorze, taką jak białe kombinezony, aby poprawić widoczność kleszczy na personelu.Co najmniej 24 godziny przed pobieraniem kleszczy w terenie, traktuj ubrania i buty produktami owadobójczymi zawierającymi 0,5% permetryny i pozwól im wyschnąć. Przed przybyciem na miejsce w terenie włóż spodnie w skarpety, aby zapobiec wejściu kleszczy. Przeznacz 30 minut do jednej godziny na zakończenie każdego transektu o długości 100 metrów, dostosowując czas w zależności od gęstości kleszczy.Zapisz szczegóły, w tym godzinę dnia i warunki pogodowe, takie jak temperatura, wiatr i wilgotność względna, za pomocą miernika pogody. Zapisz współrzędne geograficzne na początku transektu za pomocą telefonu lub urządzenia GPS z dokładnością co najmniej 10 metrów. Następnie rozłóż na ziemi biały,

cities-as-interfaces-zoonotic-hazard-emergence-development-new-york

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Miasta jako interfejsy pojawiania się zoonoz: Opracowanie systemu nadzoru miejskiej populacji kleszczy i dzikich zwierząt w Nowym Jorku

Badania nad boreliozą często wymagają uzyskania kleszczy zakażonych patogenem Borrelia burgdorferi, co jest procesem trwającym zazwyczaj kilka tygodni. W niniejszym materiale prezentujemy procedurę zakażania kleszczy metodą mikroiniekcji, którą można przeprowadzić w ciągu kilku godzin. Przedstawiamy również metodę immunofluorescencji do lokalizacji in situ B. burgdorferi wewnątrz kleszczy.

Metody szybkiego przenoszenia i lokalizacji patogenów choroby z Lyme w jelicie kleszcza

Zwalidowano i rozszerzono metodę konserwacji, detekcji i sekwencjonowania RNA wirusów grypy ptasiej, wykorzystując naturalne próbki odchodów ptaków. Technika ta eliminuje konieczność zachowania łańcucha chłodniczego oraz obchodzenia się z zakaźnymi wirusami i może być zastosowana w wysokoprzepustowym układzie 96-dołkowym.

Nadzór nad grypą ptaków z wykorzystaniem kart FTA: rozwiązanie problemów związanych z metodami terenowymi, bezpieczeństwem biologicznym i transportem

Pozyskiwanie hemolimfy, gruczołów ślinowych i śliny z zakażonych kleszczy jest istotne dla badania mechanizmów wywoływania chorób przez patogeny przenoszone przez kleszcze. W niniejszym protokole demonstrujemy sposób pobierania hemolimfy i gruczołów ślinowych z żerujących nimf Ixodes scapularis. Przedstawiamy również metodę pobierania śliny od dorosłych samic I. scapularis.

Pozyskiwanie śliny, wydzieliny gruczołów ślinowych oraz hemolimfy z kleszczy Ixodes scapularis

Borelioza jest najczęściej zgłaszaną chorobą przenoszoną przez wektory w Ameryce Północnej.  Czynnik sprawczy, Borrelia burgdorferi, jest bakterią krętkową przenoszoną przez kleszcze Ixodid.  Przenoszenie i wykrywanie infekcji w modelach zwierzęcych jest optymalizowane przez zastosowanie żywienia kleszczy, które opisujemy tutaj.

Karmienie kleszczy zwierząt w celu przeniesienia i ksenodiagnozy w badaniach nad boreliozą

Tutaj prezentujemy protokół do przestrzennej i czasowej oceny obecności żywotnej mikroflory w jelitach kleszczy przy użyciu zmodyfikowanego podejścia do hybrydyzacji in situ.

Wizualizacja mikrobioty w jelitach kleszczy poprzez hybrydyzację in situ w całości

Tutaj prezentujemy protokół sekwencjonowania nowej generacji dla sekwencjonowania 16S rRNA, który umożliwia identyfikację i charakterystykę społeczności mikrobiologicznych w wektorach. Metoda ta obejmuje ekstrakcję DNA, amplifikację i kodowanie kreskowe próbek za pomocą PCR, sekwencjonowanie na komórce przepływowej oraz bioinformatykę w celu dopasowania danych sekwencji do informacji filogenetycznej.

Charakterystyka mikrobiomu kleszczowego za pomocą sekwencjonowania amplikonów 16S rRNA nowej generacji

Bezpośredni szybki test immunohistochemiczny (DRIT) stanowi uznaną przez Światową Organizację Zdrowia Zwierząt i Światową Organizację Zdrowia (OIE/WHO) alternatywę dla testu na przeciwciała fluorescencyjne (DFA) do diagnozowania wścieklizny. Test ten pozwala na zastosowania w terenie, które można wykonać w ciągu około 1 godziny po pobraniu wycisków mózgu za pomocą mikroskopii świetlnej.

Wzmocniony nadzór nad wścieklizną za pomocą bezpośredniego szybkiego testu immunohistochemicznego

Prezentowany protokół może określić kompetencję wektorową populacji komarów Aedes aegypti dla danego wirusa, takiego jak Zika, w warunkach powstrzymywania.

Wektorowe analizy kompetencyjne komarów Aedes aegypti z wykorzystaniem wirusa Zika

Przedstawiona tutaj jest metoda nawożenia kleszczy krwią in vitro za pomocą systemu sztucznej błony, aby umożliwić częściowe lub pełne zagęszczenie różnych etapów życia kleszcza.

Karmienie sztuczną membraną kleszcza dla Ixodes scapularis

Ten artykuł przedstawia metodologię wystawiania ludzi na działanie larw Ixodes scapularis do badań klinicznych. Technika jest stosunkowo prosta, tolerowana przez ochotników biorących udział w badaniu i może być modyfikowana w zależności od potrzeb eksperymentalnych. Takie badania z udziałem ludzi muszą być prowadzone zgodnie z protokołami badań klinicznych zatwierdzonymi przez właściwe organy regulacyjne.

Model eksperymentalnego narażenia ludzi na larwy kleszczy Ixodes scapularis

Przedstawiamy protokół polegający na zbieraniu śliny, hemolimfy, gruczołów ślinowych oraz śródjelita po sekcji pojedynczego karmionego kleszcza, aby badać specyficzną lokalizację patogenów przenoszonych przez kleszcze w tkankach i pogłębić zrozumienie kompetencji wektorów oraz interakcji patogen-mikrobiom.

Ekstrakcja śliny, hemolimfy, gruczołów ślinowych i jelita środkowego od pojedynczych kleszczy (Acari: Ixodidae)

Poznaj metody nadzoru kleszczy i dzikiej fauny w miastach, łączące pułapki fotograficzne z systematycznym zbieraniem kleszczy. To podejście pomaga badać ryzyko chorób zoonotycznych w środowiskach miejskich.

Miasta jako interfejsy pojawiania się zoonoz: Rozwój systemu nadzoru miejskiej populacji kleszczy i dzikich zwierząt w Nowym Jorku

Przeglądaj więcej filmów