Name: Skuteczną i szybką metodę HPLC-QQQ-MS do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w roślinach leczniczych (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2026-06-12T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 10 s
Description: Poznaj szybką metodę HPLC-QQQ-MS do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w Anisodus tanguticus. Technika zapewnia wysoką czułość i precyzję przy analizie fitochemicznej roślin leczniczych.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

To dzieło jest wspierane przez Prowincjonalną Administracji Medycyny Tradycyjnej Chińskiej w Syczuanie (nr 2024MS562) oraz Xinglin Talent Program Uniwersytetu Medycyny Tradycyjnej Chińskiej w Chengdu (nr MPRC2022035). Bardzo cenimy sobie wsparcie Innowacji Instytutu Medycyny Chińskiej i Farmacji, Uniwersytetu Medycyny Tradycyjnej Chińskiej w Chengdu.

1. Przygotowanie próbki
<ol>
	<li>Przygotowanie roztworów standardowych
	<ol>
		<li>Dokładnie odważyć po 10,0 mg standardów odniesienia hyoscyaminy, hydrobromku anizodaminy i hydrobromku skopolamina za pomocą analitycznej wagi o dokładności jednej setnej tysiącznej i umieścić je odpowiednio w osobnych 10 mL kolbach objętościowych.</li>
		<li>Dodać metanol o klasie chromatograficznej do linii oznaczenia i dokładnie rozpuścić standardy za pomocą leczenia ultradźwiękowego w celu przygotowania pojedynczych roztworów standardowych o stężeniu 1,0 mg/mL.</li>
		<li>Przenieść roztwory macierzyste do brązowych butelek reagentów, przechowywać je w temperaturze 4 °C w ciemności. 
		UWAGA: Stosowanie alkaloidów jest wysoce toksyczne. Podczas manipulacji próbkami standardowymi należy zachować ostrożność. Wszystkie roztwory były przygotowywane świeżo przed analizą i przechowywane w temperaturze 4 °C w ciemności, aby uniknąć degradacji.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie mieszanych roztworów roboczych
	<ol>
		<li>Przenieść po 100 μL każdego wspomnianego roztworu macierzystego do 10 mL kolby objętościowej i rozcieńczyć do linii oznaczenia metanolem o klasie chromatograficznej w celu przygotowania mieszanego standardowego roztworu pośredniego o stężeniu 10 μg/mL.</li>
		<li>Zgodnie z wymaganiami zakresu liniowego dalsze rozcieńczać roztwór pośredni etapami metanolem w celu uzyskania serii mieszanych roztworów roboczych.</li>
		<li>Przenieść po 50 μL, 200 μL i 500 μL odpowiednio. Uzyskać stężenia 0,5 μg/mL, 2 μg/mL, 5 μg/mL i 10 μg/mL. Przygotowywać świeże przed użyciem.</li>
		<li>Przenieść 100 μL pośredniego roztworu 10 μg/mL do 1 mL kolby objętościowej w celu przygotowania 1 μg/mL roztworu rozcieńczonego.</li>
		<li>Następnie przenieść 100 μL 1 μg/mL roztworu do kolejnej 1 mL kolby objętościowej i rozcieńczyć do objętości metanolem.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Przygotowanie próbki
	<ol>
		<li>Przeprowadzić liofilizację świeżych materiałów Sophora flavescens, a następnie zmielenić do jednorodnego proszku za pomocą szybkotarzącego młynka.</li>
		<li>Przesiewać proszek przez standardową sitę próbkową o średnicy 0,25 mm. Dokładnie odważyć 20 mg tego proszku, przenieść go do 100 mL kolby objętościowej i dodać metanol o klasie chromatograficznej prawie do linii oznaczenia.</li>
		<li>Przeprowadzić ekstrakcję ultradźwiękową w temperaturze pokojowej przez 30 min. Po ekstrakcji wyjąć kolbę objętościową, pozwolić jej ostygnąć do 25 °C w temperaturze pokojowej, uzupełnić metanol o klasie chromatograficznej do linii oznaczenia 100 mL i mieszać 2 min w wirówce.</li>
		<li>Przenieść 1 mL powyższego ekstraktu do 100 mL kolby objętościowej i rozcieńczyć do linii oznaczenia metanolem (100-krotne rozcieńczenie). Po dokładnym przemieszaniu służy jako roztwór macierzysty do wstrzyknięcia HPLC (Rysunek 2). 
		UWAGA: Podczas obsługi szybkotarzącego młynka należy zakładać okulary ochronne i maskę antykurzową; kontrolować ilość i czas mielenia, aby zapobiec przegrzaniu.</li>
	</ol>
	</li>
	<li>Filtracja i przechowywanie próbek
	<ol>
		<li>Przygotować 1 mL jednorazowej strzykawki bez igły (specjalistycznej do chromatografii, nieadsorbującej) i 0,22 μm mikroporowaną membranę fazy organicznej.</li>
		<li>Napełnić 1,2 mL roztworu macierzystego do wstrzyknięcia i powoli przepuścić go przez filtr.</li>
		<li>Zbierać kolejny filtrat do 2 mL fiolki próbkowej z wewnętrznym wkładem i szczelnie zamykać korkiem. 
		UWAGA: Częstotliwość ultradźwiękowego oczyszczacza jest ustalona na 40 kHz. Unikać luzowania korka kolby objętościowej podczas ekstrakcji, aby zapobiec lotności rozpuszczalnika. Dostosować czynnik rozcieńczenia zgodnie z odpowiedzią szczytu próbki w preeksperymencie, aby upewnić się, że obszar docelowego szczytu znajduje się w zakresie liniowym krzywej standardowej. Wszystkie próbki należy natychmiast przechowywać w lodówce w temperaturze 4 °C.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>
2. Przygotowanie do HPLC, ustanowienie metody i akwizycja MS
<ol>
	<li>Przygotowanie faz ruchomych
	<ol>
		<li>Przygotować fazę ruchomą A: Odmiar 1000 mL ultraczystej wody, dodanie 1,0 mL chromatograficznego kwasu mrówkowego (udział objętościowy: 0,1% v/v) i mieszanie jednorodnie za pomocą rusztu magnetycznego przez 10 min.</li>
		<li>Przygotować fazę ruchomą B: Stosować bezpośrednio metanol o klasie chromatograficznej bez dodatkowego przetwarzania.</li>
		<li>Wlać fazy ruchome A i B odpowiednio do urządzeń do ultradźwiękowego odgazowania i przeprowadzić ultradźwiękowe odgazowanie o częstotliwości 40 kHz przez 15 min.</li>
		<li>Natychmiast po odgazowaniu przenieść odgazowaną fazę ruchomą do butelek z rozpuszczalnikami, uszczelnić je i podłączyć do odpowiednich linii rozpuszczalników A i B układu HPLC. 
		UWAGA

<ol><li>Ji, P., Yang, X., Zhao, X. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+metabolomics+in+quality+control+of+traditional+Chinese+medicines%3A+a+review%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Application of metabolomics in quality control of traditional Chinese medicines: a review.</a> Front Plant Sci. 15, 1463666(2024).</li>
<li>Li, S. -S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Phytochemical+variation+among+the+traditional+Chinese+medicine+mu+dan+pi+from+Paeonia+suffruticosa+%28tree+peony%29%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Phytochemical variation among the traditional Chinese medicine mu dan pi from Paeonia suffruticosa (tree peony).</a> Phytochemistry. 146, 16-24 (2018).</li>
<li>Wang, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pinelliae+rhizoma+alleviated+acute+lung+injury+induced+by+lipopolysaccharide+via+suppressing+endoplasmic+reticulum+stress-mediated+NLRP3+inflammasome%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">Pinelliae rhizoma alleviated acute lung injury induced by lipopolysaccharide via suppressing endoplasmic reticulum stress-mediated NLRP3 inflammasome.</a> Front Pharmacol. 13, 883865(2022).</li>
<li>Pughaih, T., et al. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aPughaih%2C+T+%22Tropane+Alkaloids%3A+Sources%2C+Chemistry%2C+Pharmacology+and+Biotechnology%22">Tropane Alkaloids: Sources, Chemistry, Pharmacology and Biotechnology</a>. , Nature, Springer. Singapore. (2025).</li>
<li>Chen, C., Wang, B., Xiao, Y., Xiong, F., Zhou, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Geographical+origin+discrimination+of+Anisodus+tanguticus+%28Maxim.%29%3A+chemometrics+methods+applied+to+ICP-OES+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Arab+J+Chem%22%5BJournal%5D)">Geographical origin discrimination of Anisodus tanguticus (Maxim.): chemometrics methods applied to ICP-OES analysis.</a> Arab J Chem. 17 (5), 105730(2024).</li>
<li>Cardillo, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Scopolamine%2C+anisodamine+and+hyoscyamine+production+by+Brugmansia+candida+hairy+root+cultures+in+bioreactors%5BTitle%5D)+AND+%22Process+Biochem%22%5BJournal%5D)">Scopolamine, anisodamine and hyoscyamine production by Brugmansia candida hairy root cultures in bioreactors.</a> Process Biochem. 45 (9), 1577-1581 (2010).</li>
<li>Yuan, B., Zheng, C., Teng, H., You, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+atropine%2C+anisodamine%2C+and+scopolamine+in+plant+extract+by+nonaqueous+capillary+electrophoresis+coupled+with+electrochemiluminescence+and+electrochemistry+dual+detection%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of atropine, anisodamine, and scopolamine in plant extract by nonaqueous capillary electrophoresis coupled with electrochemiluminescence and electrochemistry dual detection.</a> J Chromatogr A. 1217 (1), 171-174 (2010).</li>
<li>Zhang, P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+atropine%2C+scopolamine%2C+and+anisodamine+from+Hyoscyamus+niger+L.+in+rat+plasma+by+high-performance+liquid+chromatography+with+tandem+mass+spectrometry+and+its+application+to+a+pharmacokinetics+study%3A+liquid+chromatography%5BTitle%5D)+AND+%22J+Sep+Sci%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of atropine, scopolamine, and anisodamine from Hyoscyamus niger L. in rat plasma by high-performance liquid chromatography with tandem mass spectrometry and its application to a pharmacokinetics study: liquid chromatography.</a> J Sep Sci. 37 (19), 2664-2674 (2014).</li>
<li>Chen, C., Wang, B., Li, J., Xiong, F., Zhou, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multivariate+statistical+analysis+of+metabolites+in+Anisodus+tanguticus+%28Maxim.%29+Pascher+to+determine+geographical+origins+and+network+pharmacology%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Plant+Sci%22%5BJournal%5D)">Multivariate statistical analysis of metabolites in Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher to determine geographical origins and network pharmacology.</a> Front Plant Sci. 13, 927336(2022).</li>
<li>Chen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Multivariate+statistical+analysis+of+tropane+alkaloids+in+Anisodus+tanguticus+%28Maxim.%29+Pascher+from+different+regions+to+trace+geographical+origins%5BTitle%5D)+AND+%22Acta+Chromatogr%22%5BJournal%5D)">Multivariate statistical analysis of tropane alkaloids in Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher from different regions to trace geographical origins.</a> Acta Chromatogr. 34 (4), 422-429 (2022).</li>
<li>Sawabe, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+determination+of+atropine+and+scopolamine+content+in+Scopolia+extract+powder+by+HPLC%5BTitle%5D)+AND+%22J+Nat+Med%22%5BJournal%5D)">Rapid determination of atropine and scopolamine content in Scopolia extract powder by HPLC.</a> J Nat Med. 65 (2), 395-399 (2011).</li>
<li>Baj, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Application+of+HPLC-QQQ-MS%2FMS+and+new+RP-HPLC-DAD+system+utilizing+the+chaotropic+effect+for+determination+of+nicotine+and+its+major+metabolites+cotinine%2Cand+trans-3%E2%80%B2-hydroxycotinine+in+human+plasma+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Application of HPLC-QQQ-MS/MS and new RP-HPLC-DAD system utilizing the chaotropic effect for determination of nicotine and its major metabolites cotinine,and trans-3′-hydroxycotinine in human plasma samples.</a> Molecules. 27 (3), 682(2022).</li>
<li>Chen, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Qualitative+and+quantitative+analysis+of+the+major+constituents+in+Shexiang+tongxin+dropping+pill+by+HPLC-Q-TOF-MS%2FMS+and+UPLC-QqQ-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Qualitative and quantitative analysis of the major constituents in Shexiang tongxin dropping pill by HPLC-Q-TOF-MS/MS and UPLC-QqQ-MS/MS.</a> Molecules. 20 (10), 18597-18619 (2015).</li>
<li>Huang, Y. -F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Simultaneous+determination+of+twenty-nine+active+compounds+in+Fuzhengjiedu+granules+by+HPLC-QQQ-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Heliyon%22%5BJournal%5D)">Simultaneous determination of twenty-nine active compounds in Fuzhengjiedu granules by HPLC-QQQ-MS/MS.</a> Heliyon. 9 (2), e13675(2023).</li>
<li>Zhang, K. -X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improved+quality+control+method+for+prescriptions+of+Polygonum+capitatum+through+simultaneous+determination+of+nine+major+constituents+by+HPLC+coupled+with+triple+quadruple+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Improved quality control method for prescriptions of Polygonum capitatum through simultaneous determination of nine major constituents by HPLC coupled with triple quadruple mass spectrometry.</a> Molecules. 18 (10), 11824-11835 (2013).</li>
<li>Ding, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Comprehensive+chemical+profiling+and+quantification+of+Shexiang+xintongning+tablets+by+integrating+liquid+chromatography-mass+spectrometry+and+gas+chromatography-mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Arab+J+Chem%22%5BJournal%5D)">Comprehensive chemical profiling and quantification of Shexiang xintongning tablets by integrating liquid chromatography-mass spectrometry and gas chromatography-mass spectrometry.</a> Arab J Chem. 16 (3), 104527(2023).</li>
<li>Zhu, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+QuEChERS+method+coupled+to+HPLC-QQQ-MS%2FMS+for+the+determination+of+25+banned+pesticide+residues+in+ethnic+medicines%5BTitle%5D)+AND+%22Res+Sq%22%5BJournal%5D)">The QuEChERS method coupled to HPLC-QQQ-MS/MS for the determination of 25 banned pesticide residues in ethnic medicines.</a> Res Sq. , (2022).</li>
<li>Cinelli, M. A., Cline, J., Watson, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Applications+of+liquid+chromatography-tandem+mass+spectrometry+in+natural+products+research%3A+Tropane+alkaloids+as+a+case+study%5BTitle%5D)+AND+%22J+Vis+Exp%22%5BJournal%5D)">Applications of liquid chromatography-tandem mass spectrometry in natural products research: Tropane alkaloids as a case study.</a> J Vis Exp. (205), e66620(2024).</li>
<li>Pang, Y., Huang, Y. -K., Li, F., Yang, F. -Q., Xia, Z. -N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rapid+screening+and+evaluation+of+antioxidants+in+alkaloid+natural+products+by+capillary+electrophoresis+with+chemiluminescence+detection%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Methods%22%5BJournal%5D)">Rapid screening and evaluation of antioxidants in alkaloid natural products by capillary electrophoresis with chemiluminescence detection.</a> Anal Methods. 8 (35), 6545-6553 (2016).</li>
<li>Voeten, R. L. C., Ventouri, I. K., Haselberg, R., Somsen, G. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Capillary+electrophoresis%3Atrends+and+recent+advances%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chem%22%5BJournal%5D)">Capillary electrophoresis:trends and recent advances.</a> Anal Chem. 90 (3), 1464-1481 (2018).</li>
<li>Pellati, F., Benvenuti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Chromatographic+and+electrophoretic+methods+for+the+analysis+of+phenetylamine+alkaloids+in+Citrus+aurantium%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Chromatographic and electrophoretic methods for the analysis of phenetylamine alkaloids in Citrus aurantium.</a> J Chromatogr A. 1161 (1), 71-88 (2007).</li>
<li>Cirlini, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+sensitive+UHPLC-ESI-MS%2FMS+method+for+the+determination+of+tropane+alkaloids+in+herbal+teas+and+extracts%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Control%22%5BJournal%5D)">A sensitive UHPLC-ESI-MS/MS method for the determination of tropane alkaloids in herbal teas and extracts.</a> Food Control. 105, 285-291 (2019).</li>
<li>Wojakowska, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Structural+analysis+and+profiling+of+phenolic+secondary+metabolites+of+Mexican+lupine+species+using+LC-MS+techniques%5BTitle%5D)+AND+%22Phytochemistry%22%5BJournal%5D)">Structural analysis and profiling of phenolic secondary metabolites of Mexican lupine species using LC-MS techniques.</a> Phytochemistry. 92, 71-86 (2013).</li>
<li>Shimizu, T., Watanabe, M., Fernie, A. R., Tohge, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Targeted+LC-MS+analysis+for+plant+secondary+metabolites%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+Mol+Biol%22%5BJournal%5D)">Targeted LC-MS analysis for plant secondary metabolites.</a> Methods Mol Biol. 1778, 171-181 (2018).</li>
<li>Mennickent, S., De Diego, M. Analytical Method Validation as the First Step in Drug Quality Control. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aMennickent%2C+S+%22Quality+Management+and+Quality+Control+-+New+Trends+and+Developments%22">Quality Management and Quality Control - New Trends and Developments</a>. , IntechOpen. London, UK. (2019).</li>
<li>Yang, S. H., Wang, J., Zhang, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Validation+of+a+two-dimensional+liquid+chromatography+method+for+quality+control+testing+of+pharmaceutical+materials%5BTitle%5D)+AND+%22J+Chromatogr+A%22%5BJournal%5D)">Validation of a two-dimensional liquid chromatography method for quality control testing of pharmaceutical materials.</a> J Chromatogr A. 1492, 89-97 (2017).</li>
<li>Zhang, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((HPLC+with+chiral+stationary+phase+for+separation+and+kinetics+study+of+aspartic+acid+epimerization+in+peroxiredoxin+2+active+site+peptide%5BTitle%5D)+AND+%22J+Pharm+Biomed+Anal%22%5BJournal%5D)">HPLC with chiral stationary phase for separation and kinetics study of aspartic acid epimerization in peroxiredoxin 2 active site peptide.</a> J Pharm Biomed Anal. 247, 116247(2024).</li>
<li>Lu, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolite+measurement%3A+pittfalls+to+avoid+and+practices+to+follow%5BTitle%5D)+AND+%22Annu+Rev+Biochem%22%5BJournal%5D)">Metabolite measurement: pittfalls to avoid and practices to follow.</a> Annu Rev Biochem. 86, 277-304 (2017).</li>
<li>Leopold, J., Popkova, Y., Engel, K. M., Schiller, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+developments+of+useful+MALDI+matrices+for+the+mass+spectrometric+characterization+of+lipids%5BTitle%5D)+AND+%22Biomolecules%22%5BJournal%5D)">Recent developments of useful MALDI matrices for the mass spectrometric characterization of lipids.</a> Biomolecules. 8 (4), 173(2018).</li>
<li>Parasuraman, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((An+overview+of+liquid+chromatography-mass+spectroscopy+instrumentation%5BTitle%5D)+AND+%22Pharm+Methods%22%5BJournal%5D)">An overview of liquid chromatography-mass spectroscopy instrumentation.</a> Pharm Methods. 5 (2), 47-55 (2014).</li>
<li>Alanazi, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+liquid+chromatography%E2%80%93mass+spectrometry+%28LC%E2%80%93MS%29+applications+in+biological+and+applied+sciences%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Sci+Adv%22%5BJournal%5D)">Recent advances in liquid chromatography–mass spectrometry (LC–MS) applications in biological and applied sciences.</a> Anal Sci Adv. 6 (1), e70024(2025).</li>
<li>Cortese, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Compensate+for+or+minimize+matrix+effects%3F+Strategies+for+overcoming+matrix+effects+in+liquid+chromatography-mass+spectrometry+technique%3A+A+tutorial+review%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Compensate for or minimize matrix effects? Strategies for overcoming matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry technique: A tutorial review.</a> Molecules. 25 (13), 30-47 (2020).</li>
<li>Wang, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+interplay+between+herbal+medicines+and+gut+microbiota+in+metabolic+diseases%5BTitle%5D)+AND+%22Front+Pharmacol%22%5BJournal%5D)">The interplay between herbal medicines and gut microbiota in metabolic diseases.</a> Front Pharmacol. 14, 1105405(2023).</li>
<li>Musharraf, S. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Screening+of+inhibitors+of+angiotensin-converting+enzyme+%28ACE%29+employing+high+performance+liquid+chromatography-electrospray+ionization+triple+quadrupole+mass+spectrometry+%28HPLC-ESI-QqQ-MS%29%5BTitle%5D)+AND+%22Eur+J+Pharm+Sci%22%5BJournal%5D)">Screening of inhibitors of angiotensin-converting enzyme (ACE) employing high performance liquid chromatography-electrospray ionization triple quadrupole mass spectrometry (HPLC-ESI-QqQ-MS).</a> Eur J Pharm Sci. 101, 182-188 (2017).</li>
<li>Liu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Integrating+qualitative+and+quantitative+assessments+of+Yougui+pill%2C+an+effective+traditional+Chinese+medicine%2C+by+HPLC-LTQ-orbitrap-MSn+and+UPLC-QqQ-MS%2FMS%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Methods%22%5BJournal%5D)">Integrating qualitative and quantitative assessments of Yougui pill, an effective traditional Chinese medicine, by HPLC-LTQ-orbitrap-MSn and UPLC-QqQ-MS/MS.</a> Anal Methods. 9 (23), 3485-3496 (2017).</li>
<li>Parks, H. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Redirecting+tropane+alkaloid+metabolism+reveals+pyrrolidine+alkaloid+diversity+in+Atropa+belladonna%5BTitle%5D)+AND+%22New+Phytol%22%5BJournal%5D)">Redirecting tropane alkaloid metabolism reveals pyrrolidine alkaloid diversity in Atropa belladonna.</a> New Phytol. 237 (5), 1810-1825 (2023).</li>
<li>Yan, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Triterpenoid+saponins+profiling+by+adducts-targeted+neutral+loss+triggered+enhanced+resolution+and+product+ion+scanning+using+triple+quadrupole+linear+ion+trap+mass+spectrometry%5BTitle%5D)+AND+%22Anal+Chim+Acta%22%5BJournal%5D)">Triterpenoid saponins profiling by adducts-targeted neutral loss triggered enhanced resolution and product ion scanning using triple quadrupole linear ion trap mass spectrometry.</a> Anal Chim Acta. 819, 56-64 (2014).</li>
<li>Sosa-Ferrera, Z., Mahugo-Santana, C., Santana-Rodríguez, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Analytical+methodologies+for+the+determination+of+endocrine+disrupting+compounds+in+biological+and+environmental+samples%5BTitle%5D)+AND+%22Biomed+Res+Int%22%5BJournal%5D)">Analytical methodologies for the determination of endocrine disrupting compounds in biological and environmental samples.</a> Biomed Res Int. 2013, 674838(2013).</li>
<li>Heyde, B. J., Barthel, A., Siemens, J., Mulder, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+fast+and+robust+method+for+the+extraction+and+analysis+of+quaternary+alkyl+ammonium+compounds+from+soil+and+sewage+sludge%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A fast and robust method for the extraction and analysis of quaternary alkyl ammonium compounds from soil and sewage sludge.</a> PLoS One. 15 (8), e0237020(2020).</li>
</ol>

Autorzy nie mają żadnych sporów interesów do ujawnienia.

Wraz ze wzrostem zainteresowania metabolitami wtórnymi roślin, techniki analityczne do wykrywania alkaloidów zyskały znaczną uwagę. Podczas gdy podstawowy system chromatograficzny do analizy alkaloidów tropanowych (TA) został ustalony18, ostatnie osiągnięcia, takie jak przyjęcie elektroforezy kapilarnej (CE), ulepszona wydajność instrumentów w GC–MS i HPLC–MS oraz identyfikacja nowych związków strukturalnych, w tym konwolwiny i topinonowych toksyn podobnych do tropinonów, podkreślają potrzebę syst...

Terapeutyczna skuteczność tradycyjnej medycyny chińskiej (TCM) w dużej mierze zależy od jej wtórnych metabolitów, takich jak alkaloidy, flawonoidy, terpenoidy i inne aktywne składniki1,2,3. W związku z tym, precyzyjna i wrażliwa analiza jakościowa i ilościowa określonych metabolitów docelowych w tych złożonych mieszaninach jest kluczowym etapem w zapewnieniu jakości TCM, wyjaśnianiu materialnej podstawy jej skuteczności i rozwijaniu współczesnych badań3. Jednak różnorodność i złożoność składników TCM, w połączeniu z niezwykle niskimi stężeniami wielu kluczowych aktywnych składników, stanowią znaczne wyzwania dla osiągnięcia wydajnego i dokładnego wykrywania.
Anisodus tanguticus (Maxim.) Pascher reprezentuje główne botaniczne źródło alkaloidów tropanowych (TA)4, znane z bogatego zawartości farmakologicznie aktywnych związków tropanowych5. Kluczowe charakterystyczne alkaloidy obejmują anizodaminę, skopolaminę i hioscyjaminę, które mają wspólną rdzeń tropanową, ale wykazują odmienne podstawienia grup funkcyjnych (Rysunek 1), co prowadzi do różnych profili farmakologicznych6,7,8. Chociaż ich podobieństwa strukturalne komplikują rozdzielanie chromatograficzne, oferują również wartościowy model do porównawczych badań fitochemicznych i metabolicznych. Ostatnie badania zbadają skład chemiczny i zróżnicowanie geograficzne A. tanguticus przy użyciu podejść metabolomiki i farmakologii sieciowej9,10. Obecne metody analityczne dla metabolitów A. tanguticus polegają głównie na chromatografii cieczowej wysokiej efektywności (HPLC)11. Niemniej jednak, poziomy alkaloidów tropanowych w siewkach A. tanguticus mogą być tak niskie jak 0,01% (jedna część na dziesięć tysięcy), a konwencjonalne metody HPLC są często ograniczone przez ograniczoną rozdzielczość, wrażliwość i przepustowość analityczną. Te ograniczenia utrudniają pełne rozdzielenie strukturalnie podobnych homologów alkaloidów i utrudniają wykrywanie śladowych składników, w ten sposób ograniczając dokładność analityczną i ograniczając wsparcie dla bardziej zaawansowanych zastosowań badawczych. W ostatnich latach postępy w HPLC połączone z tandemową spektrometrią masową dostarczyły potężnych narzędzi do rozwiązania tych węzłów analitycznych. Chromatografia cieczowa wysokiej efektywności z triple spektrometrią masową kwadrupolów (HPLC-QQQ-MS) oferuje znacznie lepszą rozdzielczość chromatograficzną, wydajność rozdzielania i wyjątkową wrażliwość12,13,14. Ta technologia stała się najnowocześniejszą platformą do badania wtórnych metabolitów w TCM, umożliwiając wydajne i dokładne kwalifikacje oraz ilościowe określenie śladowych analitów docelowych w złożonych macierzach biologicznych11,15,16,17. W związku z tym, zapewnia solidne techniczne podstawy dla kompleksowego profilowania chemicznego i oceny jakości roślin leczniczych, takich jak A. tanguticus. W niniejszym badaniu podejmujemy trwałe wyzwania w wykrywaniu alkaloidów tropanowych w A. tanguticus, ze szczególnym uwzględnieniem dokładnej identyfikacji i ilościowego określania składników na poziomie śladowym. Poprzez systematyczną optymalizację warunków chromatograficznych i spektrometrii mas, opracowałeśmy i zweryfikowaliśmy nową metodę HPLC-QQQ-MS do jednoczesnego określania wielu głównych alkaloidów tropanowych. Zoptymalizowane podejście znacznie poprawia wrażliwość, selektywność i solidność metodologiczną, przez co zwalcza typowe ograniczenia związane z konwencjonalnymi badaniami spektrometrii masowej - takimi jak nieodpowiednia wrażliwość, efekty matrycowe i interferencje współelujących - często spotykane podczas analizy śladowych związków alkaloidowych.

<table><tbody><tr><td>Agilent MassHunter software</td><td>Agilent Technologies</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Agilent ZORBAX SB-C18 column</td><td>Agilent Technologies</td><td>880975-902</td><td>C18 reversed-phase column, 4.6 &times; 250 mm, 5 &mu;m</td></tr><tr><td>Anisodamine hydrobromide</td><td>Chengdu glip Biotechnology Co., Ltd</td><td>101-31-5</td><td>HPLC>98%</td></tr><tr><td>Formic Acid</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>5.33002</td><td></td></tr><tr><td>freeze dryer</td><td>EYELA, Tokyo, Japan</td><td>FDU-2110</td><td></td></tr><tr><td>High-speed universal grinder</td><td>Taisite Instrument Co., Ltd., Tianjin, China</td><td>6010210100</td><td>FW-100,24,000 rpm, 100 g capacity, 80 mesh</td></tr><tr><td>Hyoscyamine</td><td>Chengdu glip Biotechnology Co., Ltd</td><td>55449-49-5</td><td>HPLC>98%</td></tr><tr><td>Methanol</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>022909.K2</td><td></td></tr><tr><td>Microporous Membrane 0.22&mu;m</td><td>Millipore</td><td>SLGV033RB</td><td></td></tr><tr><td>Milli-Q Direct 8 water system</td><td>MilliporeSigma, Burlington, MA, USA</td><td>ZRQSVP0JP</td><td></td></tr><tr><td>Scopolamine hydrobromide</td><td>Chengdu glip Biotechnology Co., Ltd</td><td>114-49-8</td><td>HPLC>98%</td></tr></tbody></table>

skuteczną i szybką metodę hplc-qqq-ms do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w roślinach leczniczych

An Efficient and Rapid HPLC-QQQ-MS Method for the Quantitation of Tropane Alkaloids in Medicinal Plants

Anisodus tanguticus to ważna tybetańska roślina lecznicza. Alkaloidy tropanowe (TA), takie jak hioscylamina, anizodamina i skopolamina, wykazują znaczne działanie przeciwbólowe i uspokajające, co sprawia, że ten gatunek jest cenny jako naturalne źródło do ekstrakcji tych aktywnych biologicznie związków. Jednak skład chemiczny A. tanguticus jest bardzo złożony. Obejmuje dużą liczbę związków o niewyjaśnionych strukturach, co sprawia, że systematyczna identyfikacja i charakterystyka strukturalna jego aktywnych składników jest szczególnie ważna. Mimo że chroma tograf ia cieczowa wysokiej rozdzielczości (HPLC) była szeroko stosowana do separacji ekstraktów z tej rośliny, wiele nieznanych składników nadal jest trudnych do dokładnego zidentyfikowania, nawet z wykorzystaniem dopasowywania do bazy danych spektralnej.
Niniejsze badanie ustanowiło metodę analityczną opartą na chroma tograf ii cieczowej wysokiej rozdzielczości skojarzonej z potrójnym spektrometr ie masowym z kwadrypolem (HPLC-QQQ-MS) do oznaczania alkaloidów tropanowych w A. tanguticus. Metoda obejmuje serię systematycznych procedur, w tym standaryzowane przygotowanie próbek, konfigurację parametrów spektrometrii masowej, wstępne równoważenie LC, ustanowienie metody, pozyskiwanie danych MS, skanowanie wieloetapowe spektrometrii masowej (MSⁿ) oraz ręczną interpretację danych. Stosując tę strategię, z powodzeniem zidentyfikowano trzy reprezentatywne alkaloidy tropanowe w A. tanguticus: hioscyaminę, anizodaminę i skopolamina. Ponadto waliduje się precyzję ustalonej metody HPLC-QQQ-MS, potwierdzając, że metoda jest szybka, wrażliwa, wykonalna i dokładna w ilościowym oznaczaniu alkaloidów tropanowych (TA) w A. tanguticus. Ustalona metoda wykazuje dobrą wszechstronność i niezawodność oraz nadaje się do wysokowydajnej identyfikacji i ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w A. tanguticus i innych roślinach leczniczych.

HPLC-QQQ-MS chromatographic separation and identification of TAs 
Typowy chromatogram MRM uzyskany w analizie mieszaniny standardowej i ekstraktu z korzeni A.tanguticus przedstawiono na Rysunku 3 oraz Rysunku 4. W zoptymalizowanych warunkach HPLC, wszystkie trzy docelowe alkaloidy tropanowe: hioscyjamina, anizodamina i skopolamina, zostały pomyślnie oddzielone w ciągu 20 minut, co wykazało wysoką efe...

Niniejsze badanie opracowało metodę chromatografii cieczowej wysokiej rozdzielczości połączoną ze spektrometrią mas z potrójnym kwarcykiem (HPLC-QQQ-MS) w celu identyfikacji i ilościowego określania alkaloidów tropanowych (hioscyjamina, anizodamina, skopolamina) w Anisodus tanguticus. Metoda ta okazała się szybką, dokładną i niezawodną dla analizy wysokowydajnej roślin leczniczych.

Skuteczną i szybką metodę HPLC-QQQ-MS do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w roślinach leczniczych

Anisodus tanguticus is an important Tibetan medicinal plant. The tropane alkaloids (TAs), such as hyoscyamine, anisodamine, and scopolamine, exhibit ...

Opracowałeś metodę HPLC-QQQ-MS do szybkiej ilościowej analizy trzech głównych alkaloidów tropanowych w Anisodus tanguticus. Konwencjonalne HPLC nie ma wystarczającej czułości na alkaloidy tropanowe. Ta metoda wykorzystuje wysoce czułą spektrometrię masową, aby rozwiązać ten problem.Na początek dokładnie odważyć 10,0 miligramów standardów odniesienia hioscyaminy, anizodaminy hydrobromku i skopolaminy hydrobromku. Umieść je w osobnej 10-mililitrowej kolbie miareczkowej. Dodaj metanolu klasy chromatograficznej do oznakowanej linii w każdej kolbie miareczkowej.Rozpuść standardy dokładnie za pomocą leczenia ultradźwiękowym, aby przygotować pojedyncze roztwory macierzyste standardów o stężeniu 1,0 miligrama na mililitr. Następnie przenieś roztwory macierzyste do brązowych butelek reaktywów i przechowuj je w czterech stopniach Celsjusza w ciemności. Aby przygotować mieszany roztwór standardowy o stężeniu 10 mikrogramów na mililitr, pipetą przenieś 100 mikrolitrów każdego wcześniej przygotowanego roztworu macierzystego do 10-mililitrowej kolby miareczkowej.Następnie dodaj metanolu klasy chromatograficznej do oznakowanej linii, aby rozcieńczyć roztwór. Następnie wykonaj liofilizację świeżego materiału Sophora flavescens. Następnie za pomocą szybkotłoczni rozdrobni wysuszony materiał do uzyskania jednorodnej mazi.Przesiej proszek przez standardową sitę próbkową o średnicy 0,25 milimetra. Dokładnie odważyć 20 miligramów przesiewanego proszku. Przenieś go do 100-mililitrowej kolby miareczkowej i dodaj metanolu klasy chromatograficznej tuż poniżej oznakowanej linii.Następnie wykonaj ekstrakcję ultradźwiękową w temperaturze pokojowej przez 30 minut. Następnie usuń kolbę miarecznikową i pozwól, aby ostygła do 25 stopni Celsjusza w temperaturze pokojowej. Dodaj metanolu klasy chromatograficznej do oznakowanej linii 100 mililitrów i wiruj, aby wymieszać przez dwie minuty.Następnie pipetą przenieś jeden mililitr przygotowanego ekstraktu do 100-mililitrowej kolby miareczkowej. Dodaj metanolu do oznakowanej linii. Dobrze wstrząśnij, aby dokładnie wymieszać i uzyskać roztwór macierzysty do wstrzyknięcia HPLC.Do filtracji próbki przygotuj jednomililitrową igłę bez igły do pojedynczego użytku i 0,22 mikrometrową mikroporowatą membranę fazy organicznej. Zasysaj 1,2 mililitra roztworu macierzystego do wstrzyknięcia do strzykawki i przefiltruj roztwór, powoli przesuwając go przez membranę. Zbierz filtratem do dwumilitrowego pojemniczka próbki z wewnętrznym wkładem i szczelnie zamknij pojemnik korkową zamknięciem.Przygotuj fazę ruchomą A, mierząc 1000 mililitrów ultraczystej wody. Dodaj 1,0 mililitra chromatograficznego kwasu mrówkowego i mieszaj jednolicie za pomocą miksera magnetycznego przez 10 minut. Następnie przygotuj fazę ruchomą B, używając bezpośrednio metanolu klasy chromatograficznej bez dodatkowego traktowania.Odgazuj fazy ruchome A i B na 40 kilohercach przez 15 minut za pomocą oddzielnych urządzeń do degazacji ultradźwiękowej. Podłącz odgazowaną fazę ruchomą w oddzielnych butelkach rozpuszczalników do odpowiednich linii A i B systemu HPLC. Do separacji chromatograficznej użyj kolumny C18.Równoważ kolumnę metanolu i wodą w proporcji 80 do 20 przez 30 minut przy przepływie 0,3 mililitra na minutę. Ustaw temperaturę pieca kolumny na 30 stopni Celsjusza i nagrzewaj wstępnie przez 10 minut. Następnie ustaw prędkość przepływu na 0,60 mililitra na minutę, objętość wstrzyknięcia na dwa mikrolitrów, a długość fali detekcji na 210 nanometrów.Następnie ustaw program elucji gradientowej z prezentowanymi warunkami. Wykonaj wykrywanie spektrometryczne mas za pomocą potrójnego spektrometru mas wyposażonego w elektrorozpylacz pracujący w trybie dodatniego jonizowania. Ustaw ciśnienie rozpylacza na 15 funtów na cal kwadratowy, napięcie kapilarkowe na 4 000 woltów, temperaturę gazu na 300 stopni Celsjusza i przepływ gazu na 11 litrów na minutę.Następnie ustaw parametry dla wielu par izotopów reakcji wielokrotnych. Aby zidentyfikować jony prekursorowe, bezpośrednio wtryskuj pojedyncze roztwory standardowe w trybie skanowania MS2. Po walidacji metody wykonaj nabywanie danych w trybie wielokrotnego monitorowania reakcji.Użyj zoptymalizowanych parametrów, w tym jonów prekursorowych, przejść jonów produktu, napięcia fragmentora i energii zderzeniowej dla każdego analitu, jak przedstawiono tutaj. Uruchom oprogramowanie do analizy jakościowej. Wybierz plik i wybierz import danych, aby zaimportować wszystkie zebrane pliki danych.Sprawdź symetrię szczytu i spójność czasu retencji docelowych szczytów w każdym wyciągniętym chromatogramie jonów. W module ilościowym wybierz przejście MRM. Wprowadź pary jonów prekursorowych i produktowych dla każdego składnika i wyciągnij odpowiednie chromatogramy jonów wyciągniętych.Oblicz powierzchnię szczytu do analizy ilościowej. Wszystkie trzy docelowe alkaloidy tropanowe zostały pomyślnie oddzielone w ciągu 20 minut w zoptymalizowanych warunkach HPLC. Rozdzielczość między skopolaminą i anizodaminą wynosiła 8,67

an-efficient-rapid-hplc-qqq-ms-method-for-quantitation-tropane

Research

JoVE Journal

Chemistry

Chemia

Przedstawiono metodę identyfikacji gatunków materiału botanicznego poprzez bezpośrednią analizę w czasie rzeczywistym - spektrometria mas o wysokiej rozdzielczości i wielowymiarowa analiza statystyczna.

Szybka, wysokoprzepustowa identyfikacja gatunków materiału botanicznego za pomocą bezpośredniej analizy w czasie rzeczywistym Spektrometria mas o wysokiej rozdzielczości

Tutaj opisujemy wysokoprzepustową metodę kompleksowego nadzoru nad narkotykami, która pozwala na lepszą rozdzielczość i wykrywanie dużych paneli nadużywanych narkotyków i ich metabolitów, z kontrolą jakości opartą na wielosegmentowej elektroforezie kapilarnej i spektrometrii mas.

Wysokowydajny i kompleksowy nadzór nad lekami za pomocą wielosegmentowej elektroforezy kapilarnej i spektrometrii mas

Tu opisano jest precyzyjna i możliwa do powtórzenia metoda ilościowego oceny nukleozydów/nukleotydów in vivo w roślinach. Ta metoda wykorzystuje HPLC-MS/MS.

Przygotowanie próbki roślinnej do pomiaru zawartości nukleozydów/nukleotydów za pomocą HPLC-MS/MS

Obecny protokół opisuje zanieczyszczenie alkaloidów pirolizydynowych (PA) w próbkach herbaty pochodzących z chwastów wytwarzających PA w ogrodach herbacianych.

Źródło i droga zanieczyszczenia alkaloidami pirolizydyny w próbkach herbaty

Tutaj opisana jest metoda chromatografii gazowej z tandemową kwadrupolową spektrometrią mas (HS-GC-MS/MS) odpowiednia do oznaczania trimetyloaminy (TMA) w lekach pochodzenia zwierzęcego. Protokół obejmuje wstępną obróbkę próbki, obróbkę w przestrzeni nad głową, warunki analizy, walidację metodologiczną oraz oznaczanie TMA w lekach pochodzenia zwierzęcego.

Ulepszona technika wykrywania trimetyloaminy w medycynie pochodzenia zwierzęcego za pomocą chromatografii gazowej z tandemową kwadrupolową spektrometrią mas w przestrzeni czołowej

Prezentujemy metodę szybkiej spektrometrii mas (MS)/spektrometrii mas (MS) opartej na adnotacji i klasyfikacji alkaloidów tropanowych, przydatną zarówno do wstępnej dereplikacji próbek zawierających tropan jak i odkrywania nowych alkaloidów do izolacji.

Zastosowania tandemowej spektrometrii mas chromatografii cieczowej w badaniach nad produktami naturalnymi: alkaloidy tropanowe jako studium przypadku

Ten protokół przedstawia zweryfikowaną metodę chromatografii cieczowej, mobilności jonów i spektrometrii mas o wysokiej rozdzielczości, do określania obecności alkaloidów sporyszu w żywności, zgodnie z niedawno wydanym rozporządzeniem Komisji (UE) 2023/915.

Wykrywanie regulowanych alkaloidów sporyszu w matrycach spożywczych za pomocą chromatografii cieczowej - spektrometria ruchliwości jonów uwięzionych w elektronice - spektrometria mas czasu przelotu

Ten protokół szczegółowo opisuje ważne kroki wymagane do biokoniugacji białka zawierającego cysteinę z maleimidem, w tym oczyszczanie odczynników, warunki reakcji, oczyszczanie biokoniugatu i charakterystykę biokoniugatu.

Synteza biokoniugatów białkowych za pomocą chemii cysteiny-maleimidu

Opisujemy katalityczną polimeryzację insercyjną kwasu 5-norborneno-2-karboksylowego i 5-winylo-2-norbornenu w celu utworzenia funkcjonalnych polimerów o bardzo wysokiej temperaturze zeszklenia.

Prosty i wydajny protokół katalitycznej polimeryzacji insercyjnej funkcjonalnych norbornenów

Opisano szczegółową procedurę syntezy azydku znakowanego 125I oraz znakowania radioaktywnego nanocząstek złota o wielkości 13 nm sprzężonych z grupą dibenzocyklooktynu (DBCO) przy użyciu reakcji kliknięcia bez miedzi.

Zoptymalizowany protokół skutecznego znakowania radioaktywnego nanocząstek złota przy użyciu azydkowej grupy protetycznej znakowanej 125I

Poznaj szybką metodę HPLC-QQQ-MS do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w Anisodus tanguticus. Technika zapewnia wysoką czułość i precyzję przy analizie fitochemicznej roślin leczniczych.

Skuteczną i szybką metodę HPLC-QQQ-MS do ilościowego oznaczania alkaloidów tropanowych w roślinach leczniczych

Przeglądaj więcej filmów