Perfuzja mikronaczyniowa monitorowana za pomocą laserowego obrazowania z kontrastem plamkowym podczas uszkodzenia niedokrwienia nerek i reperfuzji u myszy

W tym badaniu wykorzystujemy laserowe systemy obrazowania z kontrastem plamkowym do monitorowania mikroperfuzji w gwinei podczas reperfuzji niedokrwienia. Technologia ta może być stosowana w badaniach związanych ze zmianami przepływu krwi, takich jak przeszczepy narządów stałych, skuteczność leków czy badania niedokrwienia. Aby zacząć dezynfekować stół operacyjny przed każdym zabiegiem.

Ułóż sterylizowane narzędzia, patyczki kosmetyczne, gazę, wstępnie rozcieńczone środki znieczulające i wszystkie inne potrzebne przedmioty starannie na stole. Podawaj meloksykam w dawce 0,2 miligramu na kilogram masy ciała przez zastrzyk podskórny 30 minut przed operacją, aby złagodzić ból. Wlej sterylizowaną sól fizjologiczną do czystego pojemnika.

Nożyczkami wytnij odpowiednie otwór na środku kawałka gazy. Połóż znieczuloną mysz na termoforze i zabezpiecz ją taśmą. Stosuj krem depilacyjny, aby usunąć owłosienia na brzuchu.

Używając termoforu, utrzymuj temperaturę odbytu na poziomie 37 stopni Celsjusza przez cały zabieg. Za pomocą wacika kosmetycznego najpierw zdezynfekuj obszar operacyjny alkoholem 75%, a następnie jodoforem i powtórz zabieg jeszcze dwa razy. Następnie użyj kleszczy, żeby uszczypnąć palec myszy, aby potwierdzić brak reakcji bólowej.

Nożyczkami zrób pionowe nacięcie na linii środkowej brzucha. Delikatnie oddziel skórę od otrzewnej, a następnie naciń otrzewną, aby wejść do jamy brzusznej. Zastosuj kosmok retraktora, aby poprawić widoczność.

Okryj pole operacyjne gazą, ustawiając otwór z jamą brzuszną. Zwilż gazę solą fizjologiczną. Za pomocą patyczka kosmetycznego delikatnie przesuń jelito na bok, aby odsłonić prawą nerkę i otaczające tkanki.

Złóż gazę, aby zakryła jelito, a następnie zwilż ją solą fizjologiczną, aby zapobiec wysychaniu. Następnie użyj pary ukośnych kleszczy, aby unieść prawy moczowód. Przeprowadź dwie nici szwów 6-0 przez moczowód i podwiązuj w dwóch pozycjach.

Za pomocą mikronożyczek przeciń moczowód między dwoma ligaturami. Następnie użyj waty z solą fizjologiczną, trzymanej cienkimi kleszczemi, aby delikatnie popchnąć wątrobę do góry. Napraw wątrobę wacikami, aby odsłonić nerki i naczynia po prawej stronie.

Następnie użyj ukośnych kleszczy, aby tępo oddzielić tłuszczowe poduszki krocze, aż tętnica nerkowa i żyła będą całkowicie odsłonięte. Ostrożnie. Przesuń kleszcze pod tętnicę nerkową i żyłę, aby utworzyć kanał. Przełóż 6-0 jedwabny szw pleciony wokół obu naczyń i podwiązuj je razem. Przetnij zatkaną tętnicę nerkową i żyłę w pobliżu nerek.

Usuń nerkę z przyczepioną tkanką. Następnie wyjmij wacik używany do trzymania wątroby. Włącz system obrazowania kontrastowego z laserem i plamkowym i uruchom dedykowane oprogramowanie.

Kliknij oryginalny obraz, a następnie podgląd, aby wyświetlić surowy obraz pola operacji. Przesuń mysz. Reguluj powiększenie kamery podczas oglądania oryginalnego obrazu, aby uzyskać wyraźny widok na nerkę docelową.

Następnie kliknij jednoczesne wyświetlanie, aby zobaczyć obrazowanie przepływu krwi w czasie rzeczywistym. Ustaw powiększenie na 2,5X i wybierz automatyczną regulację przepływu krwi. Następnie zablokuj parametry przepływu krwi.

Ustaw nagrywanie na jedną klatkę co 5 000 milisekund. Następnie ustaw parametr rozmiaru powierzchni kwadratowej na 112 i równomiernie umieść pięć obszarów kwadratowych na obrazie nerki. Kliknij rejestrację obrazu w czasie rzeczywistym i nagrywaj, aby rozpocząć rejestrowanie przepływu krwi.

Po zarejestrowaniu 30-minutowego poziomu wyjściowego, tępo rozdziel tkankę tłuszczową wokół naczyń lewych nerek. Za pomocą szczypiec hemostatycznych umieść mikroklamr na lewej tętnicy nerkowej i żyłę w pobliżu hilum. Kontynuuj monitorowanie w czasie rzeczywistym przez kolejne 30 minut.

Zwolnij mikroklamr, aby rozpocząć reperfuzję. Monitoruj i rejestruj w czasie rzeczywistym odzyskiwanie przepływu krwi w mikronaczyniach nerek. Po monitorowaniu reperfuzji przez co najmniej 60 minut przerwij nagrywanie i zamknij nacięcie brzuszne.

Podaj jeden mililitr soli fizjologicznej przez zastrzyk dootrzewnowkowy, aby zapobiec odwodnieniu. Połóż mysz na termoforze i obserwuj, aż odzyska przytomność i będzie mogła się wyprostować. W ciągu pierwszych 30 minut przepływ krwi mikronaczyniowej w nerkach stopniowo stawał się stabilny na poziomie wyjściowym.

Heterogeniczność poziomów perfuzji w różnych obszarach zainteresowania była obserwowana przed niedokrwieniem. Po zaciśnięciu tętnicy nerkowej i żyły przepływ krwi gwałtownie spadł, a mikrokrążenie nerek weszło w stan braku perfuzji. Po zwolnieniu zacisku przepływ krwi natychmiast wzrósł do szczytu, a następnie stopniowo zmniejszył się, by stopniowo wrócić do stosunkowo stabilnego poziomu.

Perfuzja mikronaczyniowa podczas 60 minut reperfuzji była znacznie krótsza niż przed niedokrwieniem. Możemy uzyskać przepływ krwi z mikroperfuzji nerek za pomocą laserowych systemów obrazowania kontrastowego z plamkami. W ten sposób potwierdza się proces niedokrwienia i jego reperfuzja.

Aby uzyskać czystą nerkę o dobrym kontraście, musimy być cierpliwi i poświęcić czas na oddzielenie nerki od otaczającego zasobu i tkanek. W przyszłości można wprowadzić dodatkowe wskaźniki patofizjologii, a technologia ta będzie mogła monitorować wpływ leków na niedokrwienie nerek.