Name: Liczenie i określanie żywotności hodowanych komórek (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-06-23T15:41:00.000+00:00
Duration: 5 min 47 s
Description: Naucz się liczenia komórek w hodowli przy użyciu hemocytometru oraz oceny ich żywotności testem Trypan Blue. Ta metoda pozwala dokładnie wyznaczyć stężenie komórek w zawiesinie.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Pełny tekst protokołu dla tego podejścia eksperymentalnego jest dostępny w <a href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract" target="_blank">Current Protocols in Cell Biology</a>.

Autorzy nie zgłaszają żadnych konfliktów interesów.

liczenie i określanie żywotności hodowli komórkowych

Counting and Determining the Viability of Cultured Cells

Wyznaczenie liczby komórek w hodowli jest istotne dla standaryzacji warunków hodowli oraz przeprowadzania dokładnych eksperymentów ilościowych. Hemacytometr to grube szkiełko przedmiotowe z obszarem centralnym zaprojektowanym jako komora licznikowa. Zawiesinę komórkową nanosi się na wyznaczony obszar, a następnie dokonuje zliczenia, co pozwala na obliczenie gęstości komórek.

Oznaczanie liczby komórek w hodowli jest istotne dla standaryzacji warunków hodowli oraz przeprowadzania dokładnych eksperymentów ilościowych. W tym filmie demonstrujemy sposób zliczania komórek przy użyciu hemacytometru.

Liczenie i określanie żywotności hodowli komórkowych

Oznaczanie liczby komórek w hodowli jest istotne dla standaryzacji warunków hodowli oraz przeprowadzania dokładnych eksperymentów ilościowych. A ...

Oznaczanie liczby komórek oraz kultury jest istotne w standaryzacji warunków hodowli oraz podczas przeprowadzania eksperymentów, w których wymagana jest precyzyjna liczba komórek. W niniejszym materiale pokażemy, jak zliczać komórki przy użyciu komory countingowej (hemocytometru) oraz jak obliczyć stężenie komórek w zawiesinie. Przedstawimy również sposób oznaczania liczby żywych komórek w kulturze za pomocą testu żywotności z użyciem błękitu trypanu.Cześć, jestem Ricky z laboratorium Dr.LAN w sieci Molecular Pathology Laboratories Network we wschodnim Tennessee. Dzisiaj pokażę wam, jak zliczać komórki w zawiesinie oraz jak określać ich żywotność. Aby przygotować komorę countingową do liczenia komórek, należy najpierw oczyścić jej powierzchnię oraz dołączone szkiełko nakrywkowe 70% ethanol.Kryszka i szkiełko powinny być czyste, suche i wolne od kłaczków, odcisków palców oraz śladów wody. Następnie należy lekko zwilżyć kranową wodą krawędzie hemocytometru i docisnąć na nim kryszkę. Kryszka powinna równomiernie przylegać do srebrnego pola zliczania.Jesteśmy teraz gotowi do przygotowania zawiesiny komórkowej do zliczenia. Najpierw, jeśli komórki były hodowane w kulturach monowarstwy,

counting-and-determining-the-viability-of-cultured-cells

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Liczenie i określanie żywotności hodowanych komórek

Znajomość dokładnej liczby żywych komórek jest niezbędna przy wielu manipulacjach w hodowlach tkankowych. Niniejszy protokół opisuje sposób rozróżniania komórek żywych od martwych oraz ilościowego oznaczania komórek przy użyciu hemacytometru. Choć opisano w nim liczenie ludzkich neuralnych komórek macierzystych/prekursorowych (hNSPCs), można go zastosować również do innych typów komórek.

Liczenie ludzkich neuralnych komórek macierzystych

Scepter Cell Counter to przenośne, zautomatyzowane urządzenie, które umożliwia zliczanie komórek, monitorowanie ich średnicy i objętości oraz sprawdzanie stanu zdrowia i jakości populacji komórkowych w kolejnych kulturach.

Oznaczanie liczby komórek podczas hodowli komórkowej przy użyciu licznika komórek Scepter

Zastosowanie testu kolonogennego do oceny żywotności reprodukcyjnej jest uznane od ponad 50 lat. W niniejszym materiale przedstawiamy ogólną procedurę przeprowadzania testu kolonogennego z wykorzystaniem komórek adherentnych.

Test klonogenny: komórki adherentne

Miniaturowy automatyczny licznik komórek Moxi Z to nowoczesny instrument, który łączy zasadę Coultera z opatentowaną technologią cienkowarstwowych czujników oraz autorskim algorytmem oprogramowania, aby umożliwić pomiar rozmiaru i zliczanie cząstek z szerokiego zakresu wielkości, a także ocenę ogólnego stanu hodowli monodyspersyjnych komórek ssaków. Niniejszy protokół opisuje zastosowanie tego urządzenia do zliczania i oceny kondycji hodowli komórkowych.

Oznaczanie liczby komórek ssaczych, wielkości komórek i stanu zdrowia komórek przy użyciu automatycznego licznika komórek Moxi Z Mini

Związki terapeutyczne są często najpierw badane in vitro za pomocą testów żywotności. Zliczanie ślepych komórek przez ludzkiego obserwatora może być bardzo wrażliwe na niewielkie zmiany liczby komórek, ale nie ocenia funkcji. Komputerowe testy żywotności, jak opisano tutaj, mogą ocenić zarówno strukturę, jak i funkcję w obiektywny sposób.

Testy żywotności komórek w hodowli

Ten protokół opisuje użycie trzech różnych metod analizy proliferacji komórek w liniach komórkowych raka piersi. Obejmuje to stosowanie konwencjonalnego zliczania komórek, żywotności komórek na podstawie luminescencji oraz zliczania komórek za pomocą obrazowania komórek. Każdy z nich oferuje korzyści w zakresie powtarzalnego pomiaru proliferacji komórek.

Porównanie trzech różnych metod określania proliferacji komórek w liniach komórkowych raka piersi

Ten artykuł opisuje kwantyfikację hemocytometru i mikrofotografii migracji/inwazji za pomocą dwóch nowych wtyczek ImageJ o otwartym kodzie źródłowym: Kalkulatora Stężenia Komórek i Licznika Testu Migracji.  Ponadto opisano w nim protokoły akwizycji i kalibracji obrazu, a także szczegółowo omówiono wymagania wejściowe wtyczek.

Zautomatyzowana kwantyfikacja i analiza procedur zliczania komórek za pomocą wtyczek ImageJ

Często konieczne jest oszacowanie potencjalnej cytotoksyczności zestawu związków na hodowanych komórkach. W tym miejscu opisujemy strategię niezawodnego badania przesiewowego pod kątem toksycznych związków w formacie 96-dołkowym.

Strategia identyfikacji związków, które wpływają na wzrost i przeżycie komórek w hodowanych komórkach ssaków przy niskiej lub umiarkowanej przepustowości

Ten protokół dostarcza wyczerpujących wytycznych dotyczących konfiguracji i ilościowego monitorowania kokultur, w tym fotoautotroficznych cyjanobakterii wydzielających cukier i drożdży heterotroficznych.

Składanie i kwantyfikacja kokultur łączących drożdże heterotroficzne z fototroficznymi cyjanobakteriami wydzielającymi cukier

Przedstawiamy tutaj protokół mającycy mierzenie przeżycia po stresie w próbkach drożdży. Test wykorzystuje dwa barwniki fluorescencyjne, SYTO 9 i jodek propidiu (PI), do ilościowego określenia integralności błony plazmatycznej. Wykorzystuje cytometrię przepływową do dostarczania ilościowych i powtarzalnych szacunków ułamków żywych, martwych i uszkodzonych komórek dla próbek po stresie utlencyjnym.

Zoptymalizowany test ŻYWY/MARTWY połączony z cytometrią przepływową do ilościowego przeżycia po stresie w komórkach drożdży

Naucz się liczenia komórek w hodowli przy użyciu hemocytometru oraz oceny ich żywotności testem Trypan Blue. Ta metoda pozwala dokładnie wyznaczyć stężenie komórek w zawiesinie.

Liczenie i określanie żywotności hodowli komórkowych

Przeglądaj więcej filmów