Name: Komórki zamrażające, rozmrażające i pakujące do transportu (Wideo) | JoVE Journal
Uploaded: 2008-07-02T15:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 32 s
Description: Naucz się zamrażać i rozmrażać komórki ssacze w celu długoterminowego przechowywania w ciekłym azocie. Techniki te zapewniają zachowanie żywotności komórek i są kluczowe dla badań w biologii komórki.

ai_agent_IP

ai_agent

maintenance

instantTrialDurationMinutes

isBiopharma

enableNewMyJoveSectionDesign

educationFeatures

seoMetaApi

ai_copilot_institution_blacklist

ai_chat_institution_blacklist

freeAccessWindow

ssoRoleCapture

scheduledMaintenanceBanner

joveLabsFeatures

disable_autoplay_for_bots

extended_trial_duration

5 minutes

playerTrialDesktop

Pełny tekst protokołu dla tego podejścia eksperymentalnego jest dostępny w <a class="jove_content" href="http://www.mrw.interscience.wiley.com/emrw/9780471143031/cp/cpcb/article/cb0101/current/abstract">Current Protocols in Cell Biology.</a>

Autorzy nie mają żadnych konfliktów interesów do ujawnienia.

mrożenie, rozmrażanie i pakowanie komórek do transportu

Freezing, Thawing, and Packaging Cells for Transport

hodowlane komórki ssaków są szeroko wykorzystywane w badaniach z zakresu biologii komórki. Aby zachować strukturę, funkcję, zachowanie i biologię komórek w kulturze, wymagane jest opanowanie szeregu specjalistycznych umiejętności. W niniejszym filmie opisano podstawowe umiejętności niezbędne do mrożenia i przechowywania komórek oraz sposób regeneracji zamrożonych banków komórek.

Hodowlane komórki ssaków są szeroko wykorzystywane w badaniach z zakresu biologii komórki. Niniejszy film opisuje podstawowe umiejętności niezbędne do zamrażania i przechowywania komórek oraz sposób regeneracji zamrożonych zapasów.

Mrożenie, rozmrażanie i pakowanie komórek do transportu

Hodowlane komórki ssaków są szeroko wykorzystywane w badaniach nad biologią komórki. Wymaga to opanowania szeregu specjalistycznych umiejętności, aby móc zachować...

Hodowle komórkowe są wykorzystywane w szerokim zakresie zastosowań badawczych i diagnostycznych. W celu zachowania komórek, uniknięcia starzenia się, zmniejszenia ryzyka kontaminacji oraz zminimalizowania efektów dryfu genetycznego, pożądane jest czasami przechowywanie linii komórkowych do przyszłych prac. Linie komórkowe mogą być mrożone w celu długoterminowego przechowywania.W tym filmie pokazujemy, jak mrozić komórki hodowane zarówno w monowarstwie, jak i w zawiesinie, oraz jak je rozmrażać w celu ponownego wznowienia wzrostu. Cześć, nazywam się Ricky i znajduję się w laboratorium dr LAN w sieci Molecular Pathology Laboratories wschodniego Tennessee. Dzisiaj pokażę Państwu, jak mrozić komórki do długoterminowego przechowywania oraz jak rozmrażać je z ciekłego azotu.Aby zamrozić ludzkie komórki adherentne, należy rozpocząć od ododerwania ich od płytki w sposób analogiczny do przygotowywania ich do pasażowania. Należy pamiętać, że do kriokonserwacji najlepiej wykorzystać komórki znajdujące się w logarytmicznej fazie wzrostu. Po ododerwaniu komórek i zatrzymaniu reakcji trypsyny poprzez dodanie serum lub medium zawierającego serum, należy przenieść zawiesinę komórkową do sterylnej

freezing-thawing-and-packaging-cells-for-transport

Research

JoVE Journal

Biology

Biologia

Komórki zamrażające, rozmrażające i pakujące do transportu

Tutaj pokazujemy, jak w naszym laboratorium zawiesza barwy linii ludzkich zarodkowych komórek macierzystych.

Zamrażanie komórek ES człowieka

Od czasu opracowania przez Jamesa Thomsona i współpracowników w 1998 roku techniki izolacji i hodowli ludzkich embrionalnych komórek macierzystych (hES) in vitro, zamrażanie komórek do późniejszego wykorzystania oraz rozmrażanie i namnażanie komórek z zapasów mrożonych stały się istotnymi procedurami wykonywanymi w rutynowej hodowli komórek hES. Ponieważ komórki hES są bardzo wrażliwe na stresy towarzyszące zamrażaniu i rozmrażaniu, należy zachować szczególną ostrożność. W niniejszym materiale...

Mrożenie i rozmrażanie ludzkich embrionalnych komórek macierzystych

Przedstawiamy tutaj sposób wykorzystania kriotomografii elektronowej (ECT) do badania ultrastruktury komórek bakteryjnych w stanach zbliżonych do naturalnych, z rozdzielczością „makrocząsteczkową” (~4 nm).

Kriotomografia elektronowa komórek bakteryjnych

Opisano metodę witryfikacji zarodków myszy opartą na glikolu etylenowym. Jest ona korzystniejsza od innych metod ze względu na prostotę i niską toksyczność dla zarodków, dzięki czemu może znaleźć szerokie zastosowanie u wielu szczepów myszy, w tym u myszy inbredowych i modyfikowanych genetycznie.

Kriokonserwacja embrionów myszy metodą witryfikacji z użyciem glikolu etylenowego

Liofilizacja jest często łatwym i wygodnym sposobem pozyskiwania suchych produktów zawierających żywe komórki bakteryjne. Kluczowym problemem w tym procesie jest przeżywalność komórek. Opisujemy tutaj procedurę pozwalającą zbadać, w jaki sposób przeżywalność komórek podczas liofilizacji jest kształtowana przez właściwości zastosowanej formulacji.

Składy do liofilizacji bakterii i ich wpływ na przeżywalność komórek

Ten manuskrypt opisuje łatwą w użyciu i tanią metodę kriofiksacji do wizualizacji komórek zawiesinowych za pomocą transmisyjnej mikroskopii elektronowej.

Zamrażanie wgłębne: narzędzie do badań ultrastrukturalnych i immunolokalizacyjnych komórek zawiesinowych w transmisyjnej mikroskopii elektronowej

Linie komórkowe Drosophila są ważnymi odczynnikami zarówno dla badań podstawowych, jak i biomedycznych. Ten artykuł zawiera protokoły rozmrażania, subhodowli i kriokonserwacji powszechnie stosowanych linii komórkowych Drosophila, aby pomóc naukowcom w włączeniu tych odczynników do ich badań.

Rozmrażanie, hodowla i kriokonserwacja linii komórkowych Drosophila

Tutaj przedstawiono protokół opisujący etapy przygotowania próbki i zbierania danych wymagane w kriogenicznej tomografii rentgenowskiej (SXT) do obrazowania ultrastruktury całych komórek kriokonserwowanych w rozdzielczości połowy tonu 25 nm.

Kartograficzny opis 3D komórki za pomocą kriomiękkiej tomografii rentgenowskiej

Tutaj pokazujemy, jak używać urządzenia do zamrażania kanapek do szybkiego zamrażania próbek biologicznych, w tym bakterii, drożdży, hodowanych komórek, izolowanych komórek, tkanek zwierzęcych i ludzkich oraz wirusów. Pokazujemy również, jak przygotować próbki do ultracienkiego cięcia po szybkim zamrożeniu.

Szybkie zamrażanie za pomocą urządzenia do zamrażania kanapkowego w celu dobrego ultrastrukturalnego zachowania próbek biologicznych w mikroskopii elektronowej

Ten protokół wideo ilustruje, jak wykonać skaningową tomografię elektronową mikroskopii transmisyjnej na próbkach wirusologicznych. Dla optymalnych rezultatów próbki przygotowuje się przez zamrażanie pod wysokim ciśnieniem i późniejszą podstawienie zamrożenia.

Skaningowa transmisyjna tomografia elektronowa w wirusologii: obrazowanie 3D próbek zamrożonych i zamrożonych pod wysokim ciśnieniem

Naucz się zamrażać i rozmrażać komórki ssacze w celu długoterminowego przechowywania w ciekłym azocie. Techniki te zapewniają zachowanie żywotności komórek i są kluczowe dla badań w biologii komórki.

Mrożenie, rozmrażanie i pakowanie komórek do transportu

Przeglądaj więcej filmów