Purificação por detergente de proteínas da membrana

Os detergentes contêm grupos de cabeças hidrofílicas e caudas hidrofóbicas, que lhes permitem formar micelas esféricas; portanto, eles são amplamente utilizados para purificar proteínas de membrana.

Existem três tipos de detergentes – iônicos, não iônicos e zwitteriônicos.

Detergentes iônicos, como o dodecil sulfato de sódio, têm grupos de cabeça carregados, enquanto detergentes não iônicos, como o Triton X-100, não são carregados.

Os detergentes zwitteriônicos como o CHAPS têm grupos de cabeça com cargas positivas e negativas.

Os detergentes não iônicos e zwitteriônicos são mais comumente usados para purificação de proteínas, pois permitem que a proteína mantenha sua forma funcional. Em contraste, os detergentes iônicos podem desnaturar as proteínas-alvo.

As proteínas integrais da membrana são purificadas em três estágios distintos. Primeiro, a micela do detergente interage com a bicamada externa da membrana.

Em seguida, a membrana é solubilizada, com a formação de complexos lipídico-detergente e proteína-detergente.

Uma vez que os detergentes são removidos, a proteína pode ser purificada usando técnicas como cromatografia de afinidade.