Patch Clamp

Muitas funções celulares fundamentais, como a contração muscular e a transmissão nervosa, dependem dos sinais elétricos produzidos pelo movimento de íons carregados positiva e negativamente através da membrana celular. Um método eficiente para registrar a corrente que flui através de toda a célula, ou canal iônico único, é a técnica patch-clamp.

Neste método, uma micropipeta de vidro contendo solução eletrolítica é hermeticamente selada contra uma pequena porção da membrana celular. Como resultado, um pedaço da membrana celular é isolado eletricamente, garantindo que os íons que se movem através dos canais fluam apenas para a micropipeta. Além disso, esta vedação hermética da membrana celular evita que os íons escapem para a solução do banho na qual a célula está suspensa.

Diferentes métodos de patch-clamp:

Dependendo do interesse da pesquisa, diversas variações do método patch-clamp podem ser usadas para medir as propriedades biofísicas da célula. Por exemplo, os pesquisadores podem fixar ou controlar a tensão da membrana e medir a corrente que passa por ela. Alternativamente, eles podem fixar a corrente e medir qualquer variação na tensão da membrana.

No modo ligado à célula, o adesivo de membrana contendo apenas um, ou alguns, canais iônicos permanece intacto. Como resultado, apenas a corrente que flui através do remendo da membrana pode ser medida. Em contraste, o método de célula inteira envolve a ruptura do adesivo da membrana aplicando brevemente uma forte sucção. Consequentemente, o interior da pipeta torna-se contínuo com o citoplasma. Este modo permite a medição de corrente elétrica e tensão de toda a célula.

Outro método de patch-clamp requer uma retração suave da pipeta anexada. Como resultado, o adesivo da membrana é excisado sem afetar a vedação hermética. Nesta configuração de dentro para fora, a porção intracelular da membrana fica exposta à solução do banho, permitindo o estudo dos fatores intracelulares que afetam as funções do canal.