32.3: Linhas Celulares

Uma linhagem celular é uma população de células cultivadas in vitro que podem ser subcultivadas ao longo de várias gerações. As células normais param de se dividir após um certo número de divisões celulares, um processo conhecido como senescência replicativa. Esse número, chamado de limite de Hayflick, foi conceituado por Leonard Hayflick em 1961, quando observou que as células fetais cultivadas em cultura só podiam se dividir de 40 a 60 vezes. Este limite é devido ao encurtamento dos telômeros durante cada rodada de divisão celular, impedindo a divisão celular além do comprimento insuficiente dos telômeros. A superexpressão da enzima telomerase evita o encurtamento dos telômeros e é um dos métodos para produzir linhagens celulares imortais.

Tipos de linhagens celulares

As linhagens celulares primárias obtidas diretamente de tecido animal mantêm as características genotípicas e fenotípicas aproximadas de suas células de origem. Por exemplo, a linha celular de pulmão humano BEAS2B e a linha celular de retina RPE1 têm um número próximo ao normal de 46 cromossomos. Em contraste, as linhagens celulares obtidas de células cancerígenas podem proliferar indefinidamente e são chamadas de linhagens celulares transformadas. Essas linhagens celulares mostram atributos adicionais, como independência de ancoragem e falta de inibição de contato. As linhagens celulares transformadas também costumam ter um número alterado de cromossomos. Por exemplo, as linhagens celulares SW480 e A549 podem ter até 56 e 66 cromossomos, respectivamente.

Validando linhas celulares

As linhagens celulares são propensas à instabilidade genômica e contaminação cruzada no laboratório. Portanto, é essencial validá-los rotineiramente. Técnicas como o cariótipo espectral ajudam a identificar aberrações cromossômicas numéricas e estruturais e detectar contaminação cruzada. As linhagens celulares também podem ser validadas em nível molecular por perfil STR, um método usado para analisar o número de repetições curtas em tandem (STR) no DNA que são exclusivas para cada linha celular.