Artigo de método

Spinal Cord Eletrofisiologia

DOI:

10.3791/1660

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18 de janeiro de 2010

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1The Salk Institute for Biological Studies, Howard Hughes Medical Institute and Gene Expression Laboratory, 2Biology Graduate Program, University of California San Diego - UCSD

Neste artigo

Resumo

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A demonstração do isolamento do cabo do mouse neonatal espinhal para estudos eletrofisiológicos.

Resumo

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O cabo do mouse neonatal espinhal é um modelo para estudar o desenvolvimento de circuitos neurais e movimento locomotor. Nós demonstramos a dissecção da medula espinhal e preparação de fluido cerebrospinal artificial banho de gravação usado para estudos locomotor. Uma vez dissecada, a medula espinhal raízes nervosas ventral pode ser ligado a um eletrodo de gravação para gravar os sinais eletrofisiológicos dos circuitos centrais de geração de padrões dentro da medula lombar.

Protocolo

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1. Prepare líquido cefalorraquidiano artificial (ACSF) 1. Primeiro preparar uma 2L de um estoque de ACSF 10X sem magnésio ou cálcio. Reagentes listados na milimolar. Números de catálogo referem-se a Sigma / Aldrich.

2 Litros ACSF 10X (sem Mg ou Ca)
Reagente mM g/2L Catálogo
KCl 40 5,96 P-9333
NaCl 1280 149,61 S-7653
NaHCO 3 210 35,28 S-6297
....

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Discussão

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O cordão espinhal neonatal isolado fornece um método de estudar tractable Desenvolvimento1 sistema nervoso, 2. Dentro da medula espinhal de roedores lombar neonatal, gerando circuitos centrais padrão pode produzir locomoção fictícia na presença de neurotransmissores. Este locomoção fictícia consiste de aumentos na atividade rítmica, rajadas, que são produzidos em 0,2-0,5 Hz. Estas explosões são organizados para produzir esquerda-direita alternância ao longo do comprimento do cabo de alternância e flexores e extensores (.......

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Divulgações

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CARE ANIMAL

Experimentos em animais foram realizados de acordo com as diretrizes e regulamentos estabelecidos pelo Instituto Salk para Estudos Biológicos AIACUC.

Agradecimentos

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Samuel L. Pfaff é professor no Laboratório de Expressão Gênica do Instituto Salk para Estudos Biológicos e um investigador no Instituto Médico Howard Hughes. Este trabalho foi financiado pelo Christopher Reeve e Dana Foundation. Joe Belcovson, Kent Schnoeker e Mike Sullivan em Recursos Multimídia do Instituto Salk prestou assistência com a fotografia e edição.

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
KClP-9333
NaClS-7653
NaHCO3S-6297
NaH2PO4S-9638
GlicoseD-9434
CaCl2C-5080
MgSO4M-5921
Tesouras grandesFine Science Tools14070-12
PincetaFine Science Tools11050-10
Tesouras finasFine Science Tools15000-10
Agulhas para insetosFine Science Tools26002-10
Sylgard 184 (Dow-Corning)
Frasco volumétrico de 1 L
Frascos volumétricos de 100 mL

Referências

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  1. Myers, C. P. Cholinergic input is required during embryonic development to mediate proper assembly of spinal locomotor circuits. Neuron. 46, 37-49 (2005).
  2. Goulding, M., Pfaff, S. L. Development of circuits that generate simp....

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