drosófila Dissecção da glândula acessória masculina: um método para isolar células secundárias

Resumo

Fonte: Immarigeon, C., et al. Um protocolo baseado em FACS para isolar o RNA das células secundárias das glândulas acessórias masculinas de Drosophila. J. Vis. Exp. (2019).

Este vídeo descreve a dissecção das glândulas acessórias de moscas machos e mostra um exemplo em que a glândula isolada será dissociada em uma única suspensão celular.

Protocolo

Este protocolo é um trecho de Immarigeon et al., Um protocolo baseado em FACS para isolar RNA das células secundárias das glândulas acessórias masculinas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2019).

1. Soluções e Preparação de Materiais

1. Prepare as seguintes soluções.
   1. Prepare o meio suplementado com soro (SSM): O meio de Drosophila de Schneider complementado com 10% de soro fetal bovino inativado pelo calor e 1% de penicilina-estreptomicina.
   2. Prepare alíquotas de 1x enzima tripsina (por exemplo, enzima TrypLE Express) e armazene em temperatura ambiente.
   3. ....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Microscópio binocular para dissecção
Binóculo com fonte de luz para GFP
Bunsen
Microtubos de plástico 1,5 mL	Eppendorf
Pinça de dissecção fina
Soro fetal bovino	Gibco	10270-106	calor inativado antes do uso
Pratos de vidro para dissecação
Balde de gelo
Pág. 1000	Gilson
Pág. 20	Gilson
Pág. 200	Gilson
papaína			Estoque de 50U/mL
Pbs			feito em casa
Penicilina-estreptomicina	Gibco	15070-063
Drosophila de Schneider	Gibco	Rolamento 21720-001
Ponta graduada Tipone 1250 μL	Laboratório estelar	S1161-1820
Ponta chanfrada Tipone 200 μL	Laboratório estelar	S1161-1800
Enzima TrypLE Express	Gibco	12604013