Teste de alimentação: avaliação das preferências alimentares em Drosophila melanogaster

Resumo

Fonte: Bovier, T. F., et al. Métodos para testar a desregulação endócrina em Drosophila melanogaster. J. Vis. Exp. (2019).

Este vídeo descreve um ensaio de alimentação para moscas-das-frutas no qual alimentos coloridos são usados para monitorar a alimentação e o efeito que os compostos adicionados podem ter na atividade alimentar. O protocolo de exemplo testa os efeitos de vários produtos químicos desreguladores endócrinos (EDC).

Protocolo

Este protocolo é um trecho de Bovier et al., Métodos para testar a desregulação endócrina em Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2019).

1. Ensaio de alimentação

NOTA: Este ensaio é recomendado para testar se a presença do EDC selecionado no meio pode afetar a alimentação das moscas.

1. Coloque 15 moscas jovens em frascos contendo meio de fubá (CM) suplementado com diferentes concentrações do EDC selecionado e um alimento corante. Permitir que as moscas se alimentem da mídia por 1 dia.
   OBSERVAÇÃO: Por exemplo, use corante vermelho nº 40 (1 mg/mL).
2. Coloque 15 moscas jovens em frascos contendo CM suplementado apenas com o solvente e um alimento corante para controle. Permita que as moscas se alimentem da mídia por 1 dia.
3. Anestesiar individualmente cada grupo de moscas com éter.
   1. Transfira as moscas de cada grupo para um recipiente cilíndrico de vidro (eterizador) com um funil inserido na extremidade aberta, invertendo o frasco sobre o funil e batendo suavemente os dois recipientes juntos para fazer as moscas caírem no eterizador.
      OBSERVAÇÃO: O funil impedirá que eles saiam do eterizador.
   2. Bata as moscas batendo suavemente o eterizador em uma superfície macia, como um mousepad, e substitua rapidamente o funil por um tampão de algodão e gaze embebido em éter.
   3. Aguarde cerca de 1 min até que as moscas caiam no fundo e parem de se mover.
      OBSERVAÇÃO: Não exceda o tempo ou as moscas morrerão.
4. Coloque moscas imobilizadas sob um microscópio estereoscópico e compare a coloração abdominal de cada grupo de tratamento em relação ao grupo controle.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
17α-etinilestradiol	sigma	E4876-1G
Ágar para meio de Drosophila	BIOSIGMA	789148
Bisfenol A	sigma	239658-50G
Bisfenol AF	sigma	90477-100MG
fubá	CA' BIANCA
Éter dietílico	sigma
Frascos para Drosophila	BIOSIGMA	789008	25 mm x 95 mm
Frascos para Drosophila	BIOSIGMA	789009	29 mm x 95 mm
Frascos para Drosophila	Kaltek	187	22 mm x 63 mm
etanol	FLUKA	2860
Eterizador	Artesanato		recipiente de vidro cilíndrico com tampão de algodão
Varinha mágica Pimmy	Ariete		processador de alimentos
Levedura de sucesso instantâneo	ESKA		Levedura em pó
Corante vermelho nº 40	sigma	16035
Estereomicroscópio com luzes LED	Leica		S4E