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Secagem Química: Preparação de Amostras Biológicas para Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV)

30 de abril de 2023

Neste artigo

Resumo

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Fonte: Koon, M. A., et al. Preparação de Organismos Procarióticos e Eucarióticos Usando Secagem Química para Análise Morfológica em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV). J. Vis. Exp. (2019).

A microscopia eletrônica de varredura (SEM) é uma ferramenta poderosa para obter imagens - principalmente - das características da superfície de uma amostra biológica. A preparação adequada da amostra, no entanto, é fundamental para a obtenção de imagens de qualidade. Este vídeo se concentra nas etapas de desidratação e secagem da preparação de Drosophila adulta intacta para SEM.

Protocolo

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Este protocolo é um trecho de Koon et al., Preparação de Organismos Procarióticos e Eucarióticos Usando Secagem Química para Análise Morfológica em Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV), J. Vis. Exp.(2019).

1. Preparação e Fixação

  1. Prepare Drosophila melanogaster (mosca da fruta).
    1. Anestesie moscas adultas usando 100% de dióxido de carbono. Coloque os adultos anestesiados (cerca de 10 a 30 moscas) em um pequeno frasco de plástico com tampa de rosca ou tubo de centrífuga de 1,5 mL.
    2. Mergulhe as moscas anestesiadas em 1 mL de fixador (glutaraldeído a 1,25%, tampão fosfato 0,1 M pH....

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Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo
NomeEmpresaNúmero de catálogoComentários
Adesivo condutor prateado 503Ciências da Microscopia Eletrônica12686-15
prato de pesagem em alumínioFisher Científico08-732-100
Pontas de montagem em alumínio (12 mm)Ciências da Microscopia EletrônicaRolamento 75210
Pontas de montagem em alumínio (25 mm)Ciências da Microscopia EletrônicaNº 75186
Abas adesivasCiências da Microscopia EletrônicaRolamento 76760
Abas adesivas de carbono condutorasCiências da Microscopia EletrônicaNº 77825
Éter terc-octilfenílico de polietilenoglicol (Triton X-100)VWRRolamento 97062-208
Hitachi 3400N-II SEMHitachihttps://www.hitachi-hightech.com/us/product_list/A empresa parece não vender mais este modelo

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