$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Este protocolo é um trecho de Trannoy et al., Uma nova abordagem que elimina o manuseio para estudar a agressão e o efeito "perdedor" em Drosophila melanogaster, J. Vis. Exp. (2015).
1. Experimento Comportamental
- Realize os experimentos comportamentais com moscas machos de 6 a 7 dias de idade.
- Insira divisórias de plástico em cada câmara de combate.
- Remova o plugue de algodão do tubo de isolamento e posicione o tubo abaixo de um orifício aberto na lateral do aparelho.
- Deixe a mosca entrar na câmara de combate por geotaxia negativa, geralmente em poucos segundos.
- Feche a parede deslizante depois que a mosca sair do tubo e entrar na câmara.
- Repita o procedimento para introduzir a segunda mosca na câmara de combate do outro lado do aparelho.
- Coloque o aparelho de volta na posição de gravação de vídeo iluminada.
- Comece a gravação de vídeo e remova a divisória de plástico para permitir que as moscas interajam.
- Para experimentos de agressão:
- Nesses experimentos, grave lutas por pelo menos 20 minutos para garantir a formação de fortes relações de dominância.
- Após o tempo desejado, pare a gravação do vídeo.
- Remover as moscas das câmaras de combate invertendo o procedimento acima descrito.
- Lave bem o aparelho comportamental com detergente neutro e água após cada uso e enxágue.
- Para experimentos de efeito "perdedor":
OBSERVAÇÃO: Nesses experimentos, as primeiras lutas são consideradas como a fase de condicionamento e as segundas lutas como a fase de teste. O período de descanso entre as lutas pode ser diferente, mas 10 min permitem a formação de um forte efeito "perdedor".
- Siga o procedimento descrito acima para realizar uma primeira luta.
- PASSO CRÍTICO: Para induzir a formação de uma mentalidade de "perdedor", certifique-se de que as primeiras lutas tenham pelo menos 20 minutos de duração para estabelecer fortes relações de dominância. Após 20 minutos, reinsira a divisória de plástico nas câmaras de combate para separar as moscas.
- Após um período de descanso de 10 minutos, remova suavemente a divisória de plástico para permitir que as moscas interajam para segundas lutas.
- No final da segunda luta de 20 minutos, pare a gravação do vídeo.
- Remova as moscas das câmaras comportamentais como acima.
- Mais uma vez, limpe completamente o aparato comportamental.