Ensaio de sonda de calor local: um método para avaliar a nocicepção de altas temperaturas em larvas de Drosophila

Neste artigo

Resumo

Fonte: Chattopadhyay, A., et al. Métodos locais e globais de avaliação da nocicepção térmica em larvas de Drosophila. J. Vis. Exp. (2012).

As larvas de Drosophila têm neurônios sensoriais dedicados – nociceptores – cuja resposta a estímulos térmicos potencialmente prejudiciais desencadeia comportamentos aversivos – ou os chamados "nocifensivos" – no animal. Este vídeo descreve um método para avaliar a nocicepção térmica registrando o comportamento larval em resposta à aplicação local de uma sonda de calor na cutícula. Este método é, portanto, chamado de ensaio de sonda de calor local.

Protocolo

Este protocolo é um trecho de Chattopadhyay et al., Métodos locais e globais de avaliação da nocicepção térmica em larvas de Drosophila, J. Vis. Exp. (2012).

1. Ensaio de Sonda de Calor Local

Fornecemos um estímulo térmico nocivo a um segmento individual do corpo larval usando uma sonda térmica personalizada fabricada pela Pro-Dev Engineering (consulte a Tabela de materiais). Embora esta sonda tenha características de design ideais (uma pequena ponta de metal de ~ 0,07 mm² de área e a capacidade de manter com precisão uma temperatura de ponto de ajuste de 23 °C a 65 °C), em pri....

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Resultados

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Figura 1: Configuração experimental para ensaio de sonda de calor local. A sonda de calor é controlada por uma unidade de controle térmico que é usada para definir e manter a temperatura da sonda. A sonda é mantida perpendicularmente ao eixo ântero-posterior e usada para estimular a larva em um ângulo de 45° em relação à horizontal. O contato da sonda é feito especificamente no segmento abdominal A4, conforme mostrado. O.......