Yerel Isı Probu Tahlili: Drosophila Larvalarında Yüksek Sıcaklıkların Nociception'ını Değerlendirmek için Bir Yöntem
Published: April 30, 2023
Abstract
Kaynak: Chattopadhyay, A., vd. Drosophila Larvalarında Termal Nosiception Değerlendirmenin Yerel ve Küresel Yöntemleri. J. Vis. Exp. (2012).
Drosophila larvaları, potansiyel olarak zararlı termal uyaranlara yanıtı hayvanda aversif veya sözde “nosifensif” davranışları tetikleyen özel duyusal nöronlara -nociceptors- sahiptir. Bu video, bir ısı probunun tiktikül üzerine lokal uygulamasına yanıt olarak larva davranışını kaydederek termal nosiception’ı değerlendirmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu nedenle, bu yönteme yerel ısı probu tahlili denir.
Protocol
Bu protokol Chattopadhyay ve ark., Drosophila Larvalarında Termal Nociception Değerlendirme Yerel ve Küresel Yöntemlerden bir alıntıdır, J. Vis. Exp. (2012). 1. Yerel Isı Probu Tahlili Pro-Dev Engineering tarafından üretilen özel yapım bir termal prob kullanarak bireysel larva gövde segmentine zararlı bir termal uyaran sunuyoruz (bkz. Malzeme Tablosu). Bu prob en uygun tasarım özelliklerine sahip olmasına rağmen (~ .07 mm<…
Representative Results
Şekil 1: Yerel ısı probu tahlilleri için deneysel kurulum. Isı probu, probun sıcaklığını ayarlamak ve korumak için kullanılan bir termal kontrol ünitesi tarafından kontrol edilir. Prob anteroposterior eksene dik tutulur ve larvayı yataya 45 ° ‘lik bir açıyla uyarmak için kullanılır. Prob teması özellikle gösterildiği gibi A4 karın segmentinde yapılır. Kullanıcı bu teması 20 saniyelik kesmeye…
Materials
| Thermal Probe | Pro-Dev Engineering | Custom-built on demand | Contact information can be provided on request |
| Leica DFC290 12v/400mA Color camera | Leica Microsystems | 12730080 | Any equivalent camera will do. |
| Leica MZ6 microscope | Leica Microsystems | Part number for MZ6 zoom body (optics carrier) is 10445614 | |
| Schott Ace Modulamp Unit | Schott AG | A20500 | |
| Schott Dual Gooseneck 23 inch Fiber Optic Light Guide | Schott AG | Schott A08575 | |
| Thermal Control Unit | TSCI corp. | Custom Built | Details can be provided on request |
| Zeiss Stemi 2000 microscope | Carl Zeiss, Inc. | NT55-605 | Any equivalent microscope will do. |
| Forceps | Fine Science Tools | FS-1670 | |
| Paintbrush | Blick Art Materials | 06762-1002 | |
| 35 X 10 mm Polystyrene Petri Dish | Falcon BD | 351008 | We have not tested alternative dishes. |
| Piece of vinyl | Office Depot | 480009 |
Citar este artigo
Local Heat Probe Assay: A Method to Assess Nociception of High Temperatures in Drosophila Larvae. J. Vis. Exp. (Pending Publication), e20146, doi: (2023).