O protocolo a seguir é um trecho de Mersha et al. Consequências comportamentais e reprodutivas de longo prazo da exposição embrionária a tóxicos de baixa dose, J. Vis. Exp. (2018)
<ol>
	<li>Ensaio de habituação de toque anterior
	<ol>
		<li>Transfira aproximadamente 10 vermes adultos jovens sincronizados para novas placas NGM não semeadas usando um palito de fio de platina de 30 G esterilizado por fogo. Deixe os vermes intactos por 5 minutos para permitir que eles se aclimatem à nova placa.</li>
		<li>Para a resposta de habituação, use um cabelo de sobrancelha preso à ponta de um espeto de madeira ou palito de dente e esterilize mergulhando em etanol a 70%. Limpe com um lenço de papel limpo e sem fiapos e aguarde 1 minuto para que o etanol evapore. Toque suavemente o verme na cabeça (anterior do bulbo faríngeo) usando os pelos da sobrancelha. Repita os toques, permitindo 10 s entre os toques para permitir que o verme se recupere.</li>
		<li>Continue a tocar (permitindo intervalos entre estímulos de 10 s) até que o verme não se mova mais para trás. Neste ponto, o verme se habituou ao estímulo. Registre o número + ber de toques necessários para o verme se habituar.</li>
		<li>Analise a diferença entre as taxas médias de habituação dos controles tratados e não tratados usando ANOVA de uma via seguida pelo teste post hoc de Tukey.</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" style="width:601px;" width="601">
	<tbody>
		<tr altura = "19">
			<td height="19" style="height:19px;width:201px;">EtOH</td>
			<td style="width:115px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:103px;">64-17-5</td>
			<td style="width:183px;"></td>
		</tr>
		<tr altura = "19">
			<td height="19" style="height:19px;">N2 (C. elegans do tipo selvagem) vermes</td>
			<td>CGC</td>
			<td></td>
			<td>Repositório na Universidade de Minnesota</td>
		</tr>
		<tr altura = "19">
			<td height="19" style="height:19px;">Palheta de fio de platina</td>
			<td>Genesee Científico</td>
			<td>59-AWP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr altura = "19">
			<td height="19" style="height:19px;">placas de Petri</td>
			<td>pescador</td>
			<td>07-202-011</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr altura = "19">
			<td height="19" style="height:19px;">Microscópio de dissecção</td>
			<td>AmScope</td>
			<td>SM-2TYY</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

ensaio de habituação ao toque: um método para estudar a aprendizagem não associativa em c. elegans

Fonte: Mersha, M. D., et al. <a href="https://www.jove.com/video/56771/long-term-behavioral-reproductive-consequences-embryonic-exposure-to">Consequências comportamentais e reprodutivas de longo prazo da exposição embrionária a tóxicos de baixa dose.</a> J. Vis. Exp. (2018).
Este vídeo apresenta o ensaio de habituação ao toque, um método comportamental de C. elegans para avaliar a mecanosensação e quantificar o tempo de habituação.

Ensaio de Habituação ao Toque: Um Método para Estudar a Aprendizagem Não Associativa em C. elegans

Fonte: Mersha, M. D., et al. Consequências comportamentais e reprodutivas de longo prazo da exposição embrionária a tóxicos de baixa dose. J. Vis. Exp. (2018).
Este...

- C. elegans se move de lado gerando ondas senoidais ao longo de seu corpo. O animal se move para frente quando as ondas são propagadas da cabeça para a cauda. Inversamente, quando as ondas senoidais são propagadas da cauda para a cabeça, o verme se move para trás. A locomoção para trás, conhecida como reversão, é breve e ocorre espontaneamente ou é desencadeada por um estímulo sensorial, por exemplo, um toque suave na parte anterior do verme. Para realizar o ensaio de habituação ao toque anterior, isole os vermes previamente sincronizados do estágio de desenvolvimento desejado em placas NGM não semeadas. Usando um cabelo fino esterilizado, dê um toque suave na parte anterior do corpo. Isso provocará uma resposta de escape em que o worm executa uma reversão. Permita um intervalo entre estímulos de 10 segundos para que o verme se recupere e repita o toque. Para avaliar a habituação, que é uma forma de aprendizagem não associativa, registre o número de toques até que uma reversão não seja mais observada. No protocolo de exemplo, veremos uma demonstração do ensaio de habituação ao toque anterior. - Primeiro, o uso de picareta de fio de platina de calibre 30 esterilizado para transferir aproximadamente 10 vermes adultos jovens sincronizados para novas placas NGM não semeadas. Deixe os vermes intactos por cinco minutos para permitir que eles se acostumem com a nova placa. Em seguida, esterilize um pêlo de sobrancelha preso à ponta de um espeto de madeira ou palito de dente mergulhando em etanol a 70%. Limpe com um lenço de papel limpo e sem fiapos e aguarde um minuto para que o etanol evapore. Toque suavemente o verme na cabeça usando os pelos da sobrancelha. Repita os toques permitindo 10 segundos entre os toques para permitir que o verme se recupere. Continue a tocar, permitindo intervalos entre estímulos de 10 segundos até que o verme não se mova mais para trás. Registre o número de toques necessários para que essa habituação ocorra. - Permitir um intervalo de 10 segundos entre os toques é importante, pois isso permite o tempo de recuperação do animal e ajuda a obter ensaios consistentes de comportamento de habituação.

touch-habituation-assay-method-to-study-non-associative-learning-c

Research

JoVE Encyclopedia of Experiments

Biology

Biologia

Caenorhabditis elegans (worm)

Caenorhabditis elegans (verme)

Behavior

Comportamento

Touch Habituation Assay: A Method to Study Non-Associative Learning in C. elegans

2.8K visualizações. - C. elegans se move de lado gerando ondas senoidais ao longo de seu corpo. O animal se move para frente quando as ondas são propagadas da cabeça para a cauda. Inversamente, quando as ondas senoidais são propagadas da cauda para a cabeça, o verme se move para trás. A locomoção para trás, conhecida como reversão, é breve e ocorre espontaneamente ou é desencadeada por um estímulo sensorial, por exemplo, um toque suave na parte anterior do verme. Para realizar o ...

Ensaio de Habituação ao Toque: Um Método para Estudar a Aprendizagem Não Associativa em C. elegans

Neste artigo

Resumo

Protocolo

Materiais

Reimpressões e permissões

Etiquetas

Artigos relacionados

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
EtOH	Sigma-Aldrich	64-17-5
N2 (C. elegans do tipo selvagem) vermes	CGC		Repositório na Universidade de Minnesota
Palheta de fio de platina	Genesee Científico	59-AWP
placas de Petri	pescador	07-202-011
Microscópio de dissecção	AmScope	SM-2TYY