Caenorhabditis elegans (verme)

Neste vídeo, mostramos um método de produção de uma população sincronizada com o desenvolvimento de C. elegans adultos estéreis. O protocolo de exemplo sincroniza vermes para estudar as taxas de consumo de oxigênio em animais vivos.

Este vídeo descreve uma técnica para rastrear rapidamente um único nematóide em busca de um marcador genético por triagem de PCR. No protocolo de exemplo, examinamos a edição do genoma baseada em CRISPR.

Este vídeo descreve um método tradicional baseado em placas para medir a vida útil de C. elegans. O protocolo de exemplo mede a vida útil de vermes tratados com RNAi.

C. elegans O comportamento de postura de ovos pode fornecer informações importantes em estudos de desenvolvimento, reprodutivos e anatômicos. Este vídeo apresenta as etapas importantes de um ensaio de postura de ovos e mostra um experimento de amostra no qual um medicamento é testado quanto à toxicidade reprodutiva.

Este vídeo descreve a microinjeção, um método comum de criação de cepas transgênicas de C. elegans. No exemplo, veremos a microinjeção usada para introduzir um complexo de ribonucleoproteína (RNP) para edição de genes baseados em CRISPR.

Este vídeo descreve o congelamento, um método para tornar os tecidos de C. elegans acessíveis para coloração de anticorpos, interrompendo a cutícula.

Durante a imagem ao vivo de C. elegans, uma almofada de agarose pode ser usada para manter o nematóide imóvel sem danificá-lo ou secá-lo. Este vídeo descreve como preparar uma almofada de montagem simples para microscopia.

Este vídeo apresenta os conceitos por trás da imagem de cálcio e inclui um protocolo de exemplo para imagem de lapso de tempo de vermes contidos em poços de agarose moldados.

Aqui, apresentamos um ensaio para medir SWIP, um fenótipo comportamental de C. elegans que ocorre durante movimentos vigorosos como natação. O protocolo de exemplo discute abordagens de análise manual e automatizada.

Este vídeo apresenta o ensaio de habituação ao toque, um método comportamental de C. elegans para avaliar a mecanosensação e quantificar o tempo de habituação.

Este vídeo apresenta a quimiotaxia no nematóide C. elegans e mostra um protocolo de amostra testando a aversão quimiotática ao sulfato de cobre.

Os pesquisadores podem desencadear o movimento sob demanda em C. elegans aplicando um campo elétrico que os vermes detectam e respondem. Este vídeo apresenta o comportamento eletrotático e mostra um protocolo de amostra que é feito em um dispositivo microfluídico.

Este vídeo descreve o uso de software de vídeo e rastreamento para registrar o movimento do verme em uma arena. O protocolo de exemplo mede o efeito da exposição ao etanol na locomoção do verme.

Este vídeo descreve um método para dissecar gônadas de hermafroditas adultos de C. elegans, resultando em tecidos adequados para imunocoloração e imagens fluorescentes.

Este vídeo apresenta um ensaio de sobrevivência de curto prazo que testa um tratamento para toxicidade aguda ou testa uma cepa genética para resistência a uma condição tóxica. O protocolo de exemplo mostra um exemplo de ensaio de sobrevivência no qual os vermes são testados quanto à sua capacidade de resistir ao estresse oxidativo induzido pelo paraquat (PQ).

C. elegans têm dois tipos de músculos, sarcômero único e sarcômero múltiplo, ou músculos estriados. Este vídeo descreve o arranjo dos músculos estriados da parede corporal, que são responsáveis pela locomoção de um verme e inclui um protocolo de amostra para medir a morfologia muscular usando um software de análise de imagem.

Este vídeo apresenta um método de ferimento a laser, que é usado para causar ferimentos muito precisos na epiderme do verme. O protocolo de amostra é de um estudo de resposta e reparo de feridas.

Este vídeo apresenta um método para visualizar e medir a integridade do lúmen intestinal de C. elegans alimentando vermes com dextrana marcada com FITC. O protocolo de exemplo mostra o ensaio feito com vermes tratados com 3,3'-diindolilmetano (DIM) e alimentados com patógenos.

Este vídeo descreve um protocolo para corar lipídios em vermes inteiros e fixos usando corante vermelho do Nilo. Para visualizar especificamente os lipídios neutros no núcleo das gotículas lipídicas, imagine os espectros de emissão verde do C. elegans corado.

Este vídeo descreve um método para dissociar vermes inteiros em uma suspensão de célula única adequada para FACS ou imunoprecipitação de células intactas.

Aqui, descrevemos uma técnica usada para visualizar o DNA genômico em nematóides fixos e intactos. O vídeo inclui um exemplo de protocolo para contar a cromatina em oócitos de C. elegans não fertilizados.

Este vídeo apresenta um método de isolamento de blastômeros de C. elegans de embriões iniciais. As células resultantes são adequadas para cultura de células ou experimentos ex vivo.

Este vídeo apresenta um método para isolar e cultivar células embrionárias de C. elegans in vitro para isolar e cultivar estérilmente.

Este vídeo descreve os princípios por trás do tratamento com RNAi em C. elegans e demonstra um protocolo para derrubar o lin-35 em uma cepa de verme transgênico.

RNAi é uma poderosa ferramenta genética disponível para pesquisadores de C. elegans. Este vídeo apresenta um método para tratar mais vermes com RNAi do que com alimentação em placas, utilizando condições de cultura líquida.

Os nematóides podem ser propagados facilmente em laboratório - em parte porque os hermafroditas podem se reproduzir por autofecundação. No entanto, cruzamentos genéticos e outros experimentos podem exigir um grande número de machos. Este vídeo descreve um método para enriquecer os machos de C. elegans.

A microinjeção de transgenes geralmente resulta em cepas de C. elegans com grandes matrizes extracromossômicas, que resultam em expressão e transmissão variáveis do transgene. A irradiação UV pode induzir a integração cromossômica da matriz e uma transmissão transgênica mais estável.