Imagem de cálcio: um método para visualizar a atividade neural em C. elegans vivos

Resumo

Fonte: Turek, M. et al. Microcâmaras de agarose para imagens de cálcio de longo prazo de Caenorhabditis elegans.J. Vis. Exp.(2015).

Este vídeo apresenta os conceitos por trás da imagem de cálcio e inclui um protocolo de exemplo para imagem de lapso de tempo de vermes contidos em poços de agarose moldados.

Protocolo

Este protocolo é um trecho de Turek et al, Microcâmaras de agarose para imagens de cálcio de longo prazo de Caenorhabditis elegans, J. Vis. Exp. (2015).

1. Imagem de cálcio

1. Use cepas transgênicas que expressam sensores de cálcio geneticamente codificados, como HBR16 (goeIs5[pnmr-1::SL1-GCaMP3.35-SL2::unc-54-3'UTR, unc-119(+)]).
2. Use um microscópio composto equipado para epifluorescência de campo amplo. Conecte a saída TTL da câmera EMCCD à entrada TTL do L....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Sistema LED	CoolLED	pE-2
Microscópio composto	Nikon	amarrar
câmera EMCCD	Andor	iXon 897	agora vendido como iXon Ultra 897
Z-stage para o microscópio	prévio	Nano Scan Z
X-Y platina para o microscópio	prévio	Proscan III
Filtro de luz vermelha	Chroma	ET660/50m
35 mm Placa de Petri	falcão	Placas de Petri descartáveis Falcon, estéreis, Corning