$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
1. Preparação para o teste de comportamento
- Transfira 800 μL de solução de exposição para cada poço da microplaca de 48 poços.
nota: Use 16 poços para cada grupo (ou seja, a solução controle, grupo de 5 μg/L e 50 μg/L).
- Use uma ponta de pipeta de 1 mL para transferir 200 μL de solução de exposição com uma larva da placa de Petri de vidro para um poço da microplaca de 48 poços.
- Transfira 4 mL de solução de exposição para cada poço da microplaca de 6 poços.
nota: Use uma microplaca de 6 poços para cada grupo.
- Use uma ponta de pipeta de 1 mL para transferir 200 μL de solução de exposição com duas larvas para cada poço da microplaca de 6 poços.
nota: Cada grupo tem seis grupos repetidos.
- Certifique-se de que a temperatura da sala de teste seja de 28 °C 2 h antes do teste.
nota: Os testes comportamentais geralmente são realizados à tarde.
2. Ensaio de locomoção e ângulo de trajectória
- Salve o protocolo e apague a luz da sala de teste.
- Aclimate as larvas no sistema por 10 min e clique no botão "Experimento" "Executar" sucessivamente, depois escolha a pasta onde os arquivos do experimento são salvos e digite o nome do resultado.
- Clique no botão "Iniciar" "Plano de fundo" para iniciar o teste.
- Clique no botão "Experimento" "Parar" para interromper o experimento quando o teste terminar.
nota: O sistema mostra os dados testados quando o sistema para. Os dados incluem a distância rastreada em três classes de velocidade e os números de ângulo de caminho em oito classes de ângulo de cada minuto. Para o teste de locomoção no exemplo apresentado, a distância total em cada período de luz (10 min) é calculada e a diferença entre o grupo de controle e os grupos de tratamento comparada.
- Transfira a microplaca de 48 poços de volta para a incubadora de luz para outros experimentos.