Este vídeo mostra como induzir hipofisite auto-imunes em camundongos SJL e como avaliar sua gravidade pela histopatologia.
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Artigo de método
Indução de hipofisite Auto-Imune Experimental em Ratos SJL
Neste artigo
Resumo
Resumo
Hipofisite auto-imune pode ser reproduzida experimentalmente pela injeção de proteínas pituitária misturado com adjuvante em camundongos suscetíveis 1. Modelos de ratos nos permitem estudar a forma como se desenrolam as doenças, muitas vezes fornecendo uma boa réplica dos mesmos processos que ocorrem nos seres humanos. Para algumas doenças auto-imunes, como diabetes tipo 1A, existem modelos (o mouse NOD) que, espontaneamente, desenvolver uma doença semelhante à contraparte humana. Para muitas outras doenças auto-imunes, no entanto, o modelo precisa ser induzida experimentalmente. Uma abordagem comum a este respeito é injetar o mouse com um antígeno dominante derivado do órgão em estudo. Por exemplo, os investigadores interessados em tireoidite auto-imune injetar camundongos com tireoglobulina 2, e os interessados em miastenia gravis injetá-las com o receptor de acetilcolina 3. Se o autoantígeno para uma determinada doença auto-imune não é conhecido, os investigadores injetar um extrato de proteína bruta do órgão alvo da reação auto-imune. Para hipofisite auto-imunes, a auto-antígeno patogênicos (s) continuam a ser identificados 4, e, assim, uma preparação de proteína bruta pituitária é usado. Neste artigo de vídeo demonstramos como induzir hipofisite auto-imune experimental em camundongos SJL.
Protocolo
Protocolo Experimental
Uma vez que o imunógeno pituitária está preparada (ver artigo companheiro), é administrado por via subcutânea em camundongos SJL (The Jackson Laboratories, estoque 000.686). Uma segunda injeção idêntico é repetido sete dias depois. Ratos são então usados para coletar in vivo e post-mortem resultados.
Etapa 1. A injecção subcutânea de imunógeno em camundongos SJL pituitária
Ratos são os primeiros anestesiados pela injeção de 0,5 ml de 20 mg / ml 2,2,2 tribromoetanol (Avertin, TCI América, T-1420) por via intraperitoneal. Camundongos são injetados por vi....
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Discussão
Quatro técnicas têm sido relatadas para induzir hipofisite em animais experimentais. A técnica descrita neste artigo, que é a injeção de proteínas pituitária misturado com adjuvante Freund s, é o mais antigo, que remonta a 1967 6, e foi melhorado mais recentemente 1. Outras técnicas são a injeção de glicoproteínas do vírus da rubéola solúveis em 1992 7, a injeção estereotáxica de um adenovírus diretamente na glândula pituitária, em 2002 8, eo transplante de glândulas pituitári.......
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Divulgações
Não há conflitos de interesse declarados.
Agradecimentos
Este trabalho foi financiado pelo NIH conceder DK080351 para PC, e por uma oferta generosa do Terry e família Kristine Gore.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Camundongos SJL (The Jackson Laboratories) | estoque 000686 | ||
| 2,2,2-Tribrom–etanol (Avertin) | TCI America | T-1420 | |
| Fixador de Beckstead’s |
Referências
- Tzou, S. C., Lupi, I., Landek, M., Gutenberg, A., Tzou, Y. M., Kimura, H., Pinna, G., Rose, N. R., Caturegli, P. Autoimmune Hypophysitis of SJL mice: Clinical Insights from a New Animal Model. Endocrinology. , (2008).
- Twarog, F. J., Rose, N. R. The production of thyroid autoantibodies in mice. J Imm....
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Reimpressões e permissões
