Estimulação de alta frequência para aumentar a ativação neuronal e a neurogênese no giro dentado de camundongo

Resumo

Fonte: Zhao, Z. et al. Um método invasivo para a ativação do giro dentado do camundongo por estimulação de alta frequência. J. Vis. Exp. (2018)

Este vídeo demonstra o protocolo para fornecer estimulação cerebral profunda de alta frequência a um giro dentado do hipocampo de camundongo, detalhando seus efeitos na ativação neuronal, plasticidade sináptica e neurogênese.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Entrega de estimulação de alta frequência
   1. Conecte o eletrodo implantado no cérebro do camundongo a um estimulador programável por meio de eletrodos. Configure a interface do software conforme apresentado na Figura 1. Defina os parâmetros de estimulação de alta frequência (HFS) como 6 séries de 6 trens de 6 pulsos a 400 Hz (Figura 2B, 100 ms entre os trens, 20 s entre as séries). Defina a intensidade da estimulação para 200 μA.
   2. Entregue um HFS pelo período de tempo desejado conforme configurado. Aplique a estimulação 2x ao dia às 8:00 e às 20:00.
   3. Para o grupo controle, implante eletrodos nos camundongos e não realize estimulação.
   4. Para a coloração c-fos, estimule os camundongos experimentais agudamente (2x por dia). Para a marcação com bromodeoxiuridina (BrdU), divida os camundongos experimentais em um grupo de estimulação aguda (aplicado 2x ao dia) e um grupo de estimulação crônica (aplicado 10x em 5 dias, 2x por dia). Durante o curso da estimulação, certifique-se de que o mouse esteja acordado. Lembre-se de garantir que os eletrodos não estejam torcidos.
      NOTA: No último dia do procedimento, os camundongos do grupo de estimulação aguda foram estimulados simultaneamente.
   5. Quando a estimulação estiver concluída, desconecte cuidadosamente o pino do eletrodo do porta-eletrodo e do conector do sistema de gravação.

Resultados

Figure1. Interface e parâmetros do multiestimulador. O estimulador foi conectado a um conversor digital-analógico e ativado por software proprietário. O tipo de estímulo da estimulação de alta frequência (HFS) foi monofásico.<...

Materiais