Neuroterapêutica

Comece com um paciente humano anestesiado com o crânio exposto. O paciente é diagnosticado com um tumor intracraniano.Perfure o crânio exposto para criar um buraco, gerando um ponto de acesso.Usando orientação estereotáxica, insira uma fibra difusora de laser ou LDF ao longo do caminho predeterminado e prenda-a no lugar.Transfira o paciente para um scanner de ressonância magnética e conecte o LDF a uma fonte de laser.Capture imagens de ressonância magnética de vários ângulos para visualizar o...

Comece com um paciente humano anestesiado diagnosticado com glioblastoma recorrente, um tumor invasivo caracterizado pela infiltração de células tumorais na região peritumoral circundante.A região peritumoral retém uma barreira hematoencefálica (BHE) intacta, onde junções apertadas entre as células endoteliais restringem a penetração do fármaco.Faça uma incisão no couro cabeludo, crie uma abertura no crânio e insira uma sonda a laser no núcleo do tumor usando orientação por ressonância...

Fonte: Tadokoro, T., et al. Entrega do vetor do vírus adeno-associado subpial 9 (AAV9) em camundongos adultos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra uma técnica de injeção subpial para entrega de genes à medula espinhal em camundongos. O procedimento envolve expor a dura-máter, perfurar a pia-máter e injetar um vírus adeno-associado recombinante (rAAV) carregando um gene que expressa proteína fluorescente no espaço subpial. Após a injeção e recuperação, o vírus facilita a expressão gênica nas...

Fonte: Pietruczyk, E. A., et al. Laminectomia e implantação de janela da medula espinhal no camundongo. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a implantação de uma janela da medula espinhal em um camundongo anestesiado para imagens in vivo. O protocolo estabiliza a medula espinhal exposta usando uma lamínula de borossilicato e uma placa traseira impressa em 3D. Este método permite a microscopia de dois fótons de alta resolução para estudar a dinâmica da barreira hematoencefálica e as...

Fonte: Dalkin, W., et al. O método de lesão do nervo fibular: um ensaio confiável para identificar e testar fatores que reparam as junções neuromusculares. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra um procedimento cirúrgico para induzir lesão do nervo fibular em um camundongo para estudar a regeneração da junção neuromuscular (JNM). O procedimento envolve expor o nervo fibular, aplicar pressão controlada para induzir lesão e garantir que o epineuro permaneça intacto para apoiar a regeneração...

Fonte: Brandli, A. Pré-condicionamento isquêmico de membros remotos: uma técnica neuroprotetora em roedores. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra um protocolo não invasivo de pré-condicionamento isquêmico de membros em ratos para induzir neuroproteção sistêmica. O procedimento envolve oclusão e reperfusão arterial controladas, desencadeando vias de estresse celular que liberam fatores de proteção. Esses fatores aumentam a resistência a lesões isquêmicas e metabólicas em órgãos distantes,...

Fonte: Schregel, K., et al. Gerenciamento otimizado do tratamento endovascular para AVC isquêmico agudo. J. Vis. Exp. (2018).Este vídeo demonstra o tratamento endovascular do AVC isquêmico agudo usando a técnica de extração bloqueada a vácuo assistida por stent retriever. Uma bainha guia é introduzida através da artéria femoral para alcançar o coágulo. Um cateter com um stent retriever protege e extrai o coágulo. A imagem vascular é feita para confirmar o sucesso da reperfusão.

Fonte: Alomari, S., et al. Implementação de ressecção minimamente invasiva de tumor cerebral em roedores para coleta de tecidos de alta viabilidade. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o uso de um sistema de ressecção minimamente invasivo (MIRS) para extirpar o tecido tumoral de um camundongo anestesiado implantado com um tumor. O procedimento envolve prender o mouse em uma estrutura estereotáxica, reabrir o local cirúrgico anterior para acessar o cérebro e inserir uma cânula especializada...

Fonte: Lefevre, M. C., et al., Dispositivos Eletrônicos Orgânicos Flexíveis para Terapia de Campo Elétrico Pulsado de Glioblastoma. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a implantação de uma sonda flexível e biocompatível em um modelo de camundongo com glioblastoma para fornecer terapia de campo elétrico pulsado direcionada para aplicações neuroterapêuticas.

Fonte: Paro, M. R., et.al. Um modelo para tratamento de encefalomiossinangiose após acidente vascular cerebral induzido por oclusão da artéria cerebral média em camundongos. J. Vis. Exp. (2022).Este vídeo demonstra um procedimento cirúrgico para enxertar um músculo vascularizado na superfície do cérebro após oclusão transitória da artéria cerebral média. O enxerto promove a formação de novos vasos sanguíneos na região isquêmica, aumentando o suprimento de oxigênio e nutrientes. Com o tempo, o...

Fonte: Pan, J. et. al., Evacuação Endoscópica Minimamente Invasiva de Hemorragia Intracerebral. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra a remoção endoscópica minimamente invasiva do hematoma, usando uma bainha guiada por navegação e aspiração endoscópica com irrigação salina para preservar a estrutura cerebral.

Fonte: Li, Q., et al. Investigando a regeneração do axônio de mamíferos: eletroporação in vivo do gânglio da raiz dorsal de camundongos adultos. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o processo de regeneração axonal em um nervo ciático de camundongo após uma lesão por esmagamento. O nervo isolado é fixado e preparado para imagens, com proteínas fluorescentes expressas em neurônios para visualizar o crescimento do axônio. Usando um microscópio de epifluorescência, a regeneração do axônio é...

Fonte: Rennert, R. C., et al. Manejo Endovascular Abrangente e Cirúrgico Aberto de Malformações Arteriovenosas Cerebrais. J. Vis. Exp. (2017).Este vídeo demonstra a ressecção cirúrgica aberta de uma malformação arteriovenosa cerebral (MAV) em um cérebro humano. O procedimento envolve a criação de um retalho ósseo, o acesso ao espaço subaracnóideo, a identificação e oclusão das artérias de alimentação e as veias de drenagem e a remoção cuidadosa da MAV. A angiografia intraoperatória confirma a...

Fonte: Wang, L., et.al. Técnica de zona de isolamento endoscópica total para o tratamento de hérnia de disco lombar. J. Vis. Exp.(2023)Este vídeo demonstra um procedimento endoscópico minimamente invasivo para tratar a hérnia de disco lombar, removendo o núcleo pulposo protruso e o anel fibroso rompido. A técnica descomprime a raiz nervosa afetada, alivia a dor e restaura a função nervosa por meio da ressecção de tecido direcionada e modulação por radiofrequência.

Fonte: Gao, Z., et al. Um modelo de camundongo de anastomose direta através da via pré-espinhal para cirurgia de transferência de nervo cruzado. J. Vis. Exp. (2021).Este vídeo demonstra a restauração do movimento do membro anterior em um camundongo por meio da reconexão direta do nervo cervical. Começa com um camundongo com o membro anterior direito paralisado devido a um nervo C7 direito seccionado em sua raiz nervosa. O nervo C7 esquerdo é cortado, guiado para a direita pela via pré-espinhal...

Fonte: Svientek, S. R., et al. Fabricação da Interface Regenerativa Composta de Nervos Periféricos (C-RPNI) no rato adulto. J. Vis. Exp. (2020).Este vídeo demonstra a construção cirúrgica de uma interface regenerativa composta de nervos periféricos (C-RPNI) em um modelo de lesão nervosa periférica em ratos. O procedimento envolve a fixação de um nervo fibular seccionado a um enxerto muscular e a sobreposição com um enxerto de pele dérmica para promover a regeneração do nervo. Com o tempo, os...

Coloque um filhote neonatal anestesiado em uma almofada de aquecimento.Desinfete o couro cabeludo com etanol.Encha uma seringa com uma solução viral contendo vírus adeno-associados que carregam o gene para um receptor inibitório ativado por drogas e um corante de rastreamento.Alinhe a ponta da seringa com a cabeça do filhote e injete lentamente o vírus no cérebro para uma distribuição uniforme.Permita que o filhote se recupere.Durante a incubação, as partículas virais entram nos neurônios e...

Fonte: Jain, R. W., et al. Produção e purificação simples e eficientes de glicoproteína de oligodendrócitos de mielina de camundongo para estudos experimentais de encefalomielite autoimune. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra o isolamento e purificação do MOGtag, uma glicoproteína recombinante de oligodendrócitos de mielina (MOG) usada em estudos de encefalomielite autoimune experimental (EAE). O protocolo envolve lise bacteriana, sonicação, centrifugação e cromatografia de afinidade de...

Fonte: Chen, S., et al., Cirurgia Estereotáxica para Manipulação Genética em Células Estriatais de Cérebros de Camundongos Neonatais. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a injeção estereotáxica de um vetor viral que codifica a Cre recombinase e a proteína de fluorescência verde ou GFP no estriado de um filhote de camundongo geneticamente modificado para obter a manipulação de genes extirpando um STOP flanqueado por loxP, ativando a proteína de fluorescência vermelha ou RFP como repórter.

Fonte: Pereira, M. et. al., Reprogramação direta in vivo de células gliais residentes em interneurônios por injeção intracerebral de vetores virais. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a injeção estereotáxica de um vírus adeno-associado no córtex cerebral de um camundongo transgênico para fornecer reprogramação neuronal dependente de Cre e genes repórteres fluorescentes em células gliais.

Fonte: Fricano-Kugler, C. J., et al. Projeto, embalagem e entrega de CRISPR retro e lentivírus de alto título por meio de injeção estereotáxica. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a injeção viral estereotáxica para edição precisa de genes neuronais no cérebro de camundongos. O protocolo garante a entrega precisa do vírus ao giro denteado, permitindo a marcação fluorescente e o nocaute genético mediado por CRISPR para estudar circuitos neurais, função gênica e mecanismos de doenças in vivo.

Fonte: Ullah, I., et.al. Um dispositivo de posicionamento para a colocação de camundongos durante a entrega intranasal de siRNA ao sistema nervoso central. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra uma técnica de administração intranasal precisa para fornecer complexos peptídeo-siRNA direcionados a neurônios ao cérebro de camundongos usando um dispositivo de posicionamento especializado. Os camundongos anestesiados são fixados em uma posição de cabeça para baixo e para frente para otimizar a...

Fonte: Keefe, K. M., et al. A injeção direta de um vetor lentiviral destaca várias vias motoras na medula espinhal do rato. J. Vis. Exp. (2019).Este vídeo demonstra a injeção de um vetor viral de transporte retrógrado altamente eficiente (HiRet) na medula espinhal de ratos para rastrear as vias neuronais. O vírus possui glicoproteínas para entrada sináptica e um gene codificador de proteína fluorescente. A agulha é inserida na medula espinhal e a suspensão do vírus é administrada a uma taxa...

Fonte: Li, Q. et al. Investigando a regeneração do axônio de mamíferos: eletroporação in vivo do gânglio da raiz dorsal de camundongos adultos. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a transfecção mediada por eletroporação de neurônios DRG de camundongos para estudar a regeneração do axônio. Ele descreve as etapas para fornecer construções de ácido nucleico aos neurônios DRG, induzir lesão do nervo ciático e avaliar a regeneração axonal.

Fonte: Li, D., et al. Injeção intratecal direta de vírus adeno-associados recombinantes em camundongos adultos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o procedimento para a injeção intratecal de vírus adeno-associados (AAV) no líquido cefalorraquidiano (LCR) de um camundongo acordado, abrangendo a preparação da seringa, o alinhamento da coluna vertebral e a inserção precisa da agulha. Este método valida a entrega de genes direcionados, apoiando seu potencial para terapias do SNC.

Fonte: Park, S. W., et al. Abordagem límbica-injeção sub-retiniana de vetores virais para terapia gênica no epitélio pigmentar da retina de camundongos. J. Vis. Exp. (2015)O vídeo descreve o método de injeção sub-retiniana de vetores virais no epitélio pigmentar da retina (EPR) em um modelo de camundongo. Ele detalha o procedimento desde a anestesia e preparação ocular até a entrega precisa do vetor lentiviral, garantindo a integração e expressão do gene no EPR.

Fonte: Bender, H. R., et.al. Entrega de siRNA terapêutico ao SNC usando lipossomas catiônicos e aniônicos. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a entrega direcionada de siRNA de proteína príon (PrP) aos neurônios usando complexos lipossomais de siRNA-peptídeo (LSPCs). Os lipossomas catiônicos ligam-se eletrostaticamente ao siRNA direcionado ao PrP, que é ainda estabilizado pelo peptídeo RVG-9r para transporte mediado por receptor através da barreira hematoencefálica. Uma vez dentro do...

Fonte: Grames, M. S., et al. Métodos e dicas para administração intravenosa de vírus adeno-associado a ratos e avaliação da transdução do sistema nervoso central. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a injeção na veia da cauda do vírus adeno-associado recombinante (AAV) em ratos. Após a injeção na veia lateral da cauda, o vírus entra na corrente sanguínea, circula pelo coração e chega ao cérebro, onde entra nos neurônios e facilita a produção de proteínas-alvo para aplicações...

Fonte: Denaxa, M., el al., Transplante de progenitores de interneurônios corticais quimiogeneticamente modificados em cérebros de camundongos pós-natais precoces. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o procedimento para injetar um vetor de plasmídeo carregando o gene de interesse em progenitores interneurônios em uma fatia de cérebro embrionário, seguido de eletroporação para entrada de plasmídeo e expressão gênica. Esses progenitores modificados podem ser usados posteriormente para o...

Fonte:Pourshafie, N., et al. Entrega sistêmica de microRNA usando vírus adeno-associado recombinante sorotipo 9 para tratar doenças neuromusculares em roedores. J. Vis. Exp. (2018).Neste vídeo, uma atrofia muscular espinhal e bulbar ou camundongo afetado por SBMA é submetido à injeção na veia da cauda de vetores AAV (vetores adeno-associados) recombinantes que carregam um plasmídeo que codifica microRNA terapêutico. O vetor produz microRNA que se liga ao AR mutante (receptor de andrógeno)-mRNA...

Fonte: Smit, R. D., et al. Visando o trato corticoespinhal em ratos neonatais com um vetor viral duplo usando cirurgia combinada de cérebro e coluna. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra a entrega direcionada de vetores virais aos neurônios corticoespinhais em um rato neonatal. O protocolo permite a expressão gênica precisa usando injeções virais anterógradas e retrógradas, facilitando a pesquisa sobre regeneração neural e plasticidade após lesão medular.

Fonte: Porlan, E., et al. Modificação genética estável e eficiente de células no camundongo adulto V-SVZ para a análise de efeitos autônomos e não autônomos de células-tronco neurais. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a modificação genética estável de células-tronco neurais (NSCs) na zona ventricular-subventricular (V-SVZ) por meio da injeção estereotáxica de um gene terapêutico portador de vírus em um modelo de camundongo. O vírus entra nas NSCs, sofre transcrição reversa, integra-se ao...

Fonte: Mangold, K., H el. al., Direcionamento de placa neural murina por nanoinjeção in utero (NEPTUNE) no dia embrionário 7.5. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o método de nanoinjeção no útero para direcionamento de placas neurais em um modelo de camundongo embrionário. Uma solução lentiviral de alto título é injetada na cavidade amniótica, onde se integra às células da placa neural, permitindo a manipulação estável de genes para pesquisas de neurodesenvolvimento e aplicações...

Fonte: Ino, D. et. al., Transferência de genes in vivo para células de Schwann no nervo ciático de roedores por eletroporação. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a transferência de genes in vivo para as células de Schwann do nervo ciático de roedores usando eletroporação. Uma solução de corante de DNA de plasmídeo é injetada no nervo e pulsos elétricos facilitam a entrada de DNA. O DNA mais tarde se integra ao genoma da célula, permitindo a transferência bem-sucedida de genes nas células...

Fonte: Keener, D. G., et al. Eletroporação de célula única em diferentes culturas de fatias organotípicas de neurônios excitatórios do hipocampo de camundongos e inibitórios específicos de classe. J. Vis. Exp. (2020).Este vídeo demonstra o processo de eletroporação de célula única para introduzir DNA de plasmídeo em neurônios dentro de culturas de fatias de hipocampo de camundongos. O procedimento envolve posicionamento preciso da pipeta, ajustes de pressão e pulsos de eletroporação para...

Fonte: Kozin, E. D., et.al. Visualização direta do núcleo coclear dorsal murino para estimulação optogenética da via auditiva. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra a transferência de genes mediada por vírus para o núcleo coclear dorsal (DCN) de camundongos para permitir a estimulação auditiva induzida por luz. Um vetor viral que codifica opsina, um canal iônico sensível à luz, é injetado no DCN após uma craniotomia e aspiração cerebelar para acesso direto. As opsinas expressas permitem que...

Fonte: Tagliafierro, L., et al. Plataforma de vetor lentiviral para a entrega eficiente de ferramentas de edição de epigenoma em modelos de doenças derivadas de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a transdução lentiviral de células progenitoras neurais (NPCs) para modificação epigenética direcionada da alfa-sinucleína, uma proteína-chave na doença de Parkinson. O protocolo permite a metilação do DNA mediada por metiltransferase, reduzindo...

Fonte: Lutz, D., et al. Avaliação dos parâmetros de neuroplasticidade ultraestrutural após transdução in utero do cérebro e da medula espinhal de camundongos em desenvolvimento. J. Vis. Exp. (2019).Este vídeo demonstra a transdução viral via injeção intra-uterina em embriões de camundongos. Uma rata grávida é preparada para a cirurgia e uma incisão na linha média é feita para expor os cornos uterinos. Uma mistura de um vírus contendo o gene desejado e um corante de rastreamento é injetada nos...

Pegue um rato anestesiado com um nervo ciático direito intacto exposto, que controla o movimento e a sensação da perna.Extirpe um segmento nervoso, criando uma lacuna, cortando os axônios neuronais e interrompendo a transmissão do sinal.Os axônios distais cortados se deterioram, destacando células especializadas de reparo nervoso ou de Schwann.Suturar um andaime de nervo condutor biônico, um tubo macio com microcanais, ao epineuro, a camada externa do nervo, em ambas as extremidades...

Pegue um camundongo submetido a danos induzidos por laser na cabeça do nervo óptico no olho.O dano causa lesão das células endoteliais e formação de coágulos sanguíneos nos vasos sanguíneos que irrigam o nervo, reduzindo o fluxo sanguíneo e causando isquemia.A isquemia priva os axônios das células ganglionares da retina na cabeça do nervo óptico de oxigênio.Nos corpos celulares RGC, essa interrupção prejudica a função mitocondrial e aumenta a produção de espécies reativas de oxigênio.O estresse...

Pegue as células microgliais murinas aderidas em uma placa multipoços.Adicione nanopartículas magnéticas revestidas com ácido poliacrílico (MNPs) ao poço de teste, deixando outro poço sem tratamento como controle.Incubar as células para permitir a captação de MNP via endocitose, permitindo sua internalização.Lave com tampão para remover MNPs não ligados.Adicione uma solução enzimática para separar as células.Transfira as células separadas para tubos e centrifugue para pellets.Rejeitar o...

Divida o sistema transwell em cinco grupos que passam por vários tratamentos.O primeiro grupo serve como controle e consiste em uma co-cultura de células de neuroblastoma e microglia.No segundo grupo, trate o co-cultivador apenas com β-amilóide fibrilar (fAβ). fAβ induz danos nas células do neuroblastoma.No terceiro grupo, trate as células do neuroblastoma com um laser de 808 nanômetros e, em seguida, co-cultive-as com microglia não tratada.O laser reduz o estresse oxidativo, melhorando a...

Fonte: Han, J., et.al. Regulando o crescimento da célula de Schwann por campo elétrico pulsado de nanossegundos para regeneração nervosa periférica in vitro. J. Vis. Exp. (2024)Este vídeo demonstra a aplicação da técnica de campo elétrico pulsado de nanossegundos (nsPEF) para modular o crescimento da célula de Schwann (SC). Os pulsos elétricos rápidos induzem nanoporos transitórios nas membranas SC, facilitando o influxo de cálcio que ativa as vias de sinalização que conduzem a proliferação,...

Fonte: Shionoya, Y., et al. Aplicações de bloqueio do gânglio simpático cervical induzido por etanol para promover a regeneração do nervo alveolar inferior canino usando um nervo artificial. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra um modelo canino para regeneração do nervo alveolar inferior (IAN) usando um andaime biodegradável e bloqueio simpático induzido por etanol. O procedimento envolve acessar cirurgicamente o gânglio simpático cervical e injetar etanol para induzir a vasodilatação. O...

Fonte: Lai, J., et al. Registro eletrofisiológico simultâneo e microinjeções de agentes inibitórios no cérebro de roedores. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra uma técnica baseada em microinjeção para registro e inibição neuronal simultânea no colículo superior de ratos. O procedimento envolve direcionamento estereotáxico, perfuração do crânio e a inserção de um injetor, que fornece um neurotransmissor inibitório enquanto registra a atividade neuronal. A estimulação da luz evoca potenciais...

Fonte: Poinsatte, K., et al., Quantificação da proteção neurovascular após pré-condicionamento hipóxico repetitivo e oclusão transitória da artéria cerebral média em camundongos. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o método de pré-condicionamento hipóxico repetitivo (RHP) expondo um camundongo a ciclos de hipóxia controlados antes de induzir um acidente vascular cerebral isquêmico. O experimento avalia seus efeitos na estabilidade da barreira hematoencefálica, adaptação neuronal e...

Fonte: Lee, Y. F., et al. Uma ferramenta ultrassônica para bloqueio de condução nervosa em modelos de ratos diabéticos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o uso de ultrassom focalizado de alta intensidade (HIFU) para bloquear os potenciais de ação do nervo ciático para o músculo gastrocnêmio em um modelo de rato diabético. Ao entregar o feixe HIFU ao nervo, uma diminuição no sinal muscular confirma o potencial do HIFU como terapia não invasiva para o alívio da dor neuropática diabética.

Fonte: Yan, X., et. al., Nova aplicação de um jato de plasma de pressão atmosférica como agente neuroprotetor contra lesão induzida por privação de glicose de células SH-SY5Y. J. Vis. Exp. (2017)O vídeo demonstra a atividade neuroprotetora do tratamento com plasma de pressão atmosférica de baixa dose em células de neuroblastoma privadas de glicose, modulando o estresse oxidativo e aumentando a viabilidade celular.

Fonte: Casquero-Veiga, M. et al. Tomografia por emissão de pósitrons in vivo para revelar padrões de atividade induzidos por estimulação cerebral profunda em ratos. J. Vis. Exp. (2022).Este vídeo demonstra os efeitos metabólicos da estimulação cerebral profunda (DBS) usando imagens FDG-PET em um modelo de rato. Ele descreve as etapas envolvidas na administração de FDG, aplicação de DBS e imagens de PET/CT para mapear regiões cerebrais com atividade metabólica aumentada ou suprimida.

Fonte: Batra, V., et al. Um método geral para avaliar os efeitos da estimulação cerebral profunda na autoadministração intravenosa de metanfetamina. J. Vis. Exp. (2016).Este vídeo demonstra um modelo de dependência de drogas em ratos no qual o animal auto-administra metanfetamina intravenosa pressionando uma alavanca, levando a um comportamento compulsivo de busca de drogas impulsionado pela liberação de dopamina no núcleo accumbens. Para neutralizar isso, o rato passa por estimulação cerebral...

Fonte: Selvakumar, T., et al., Análise de alterações na expressão gênica no hipocampo de ratos após estimulação cerebral profunda do núcleo talâmico anterior. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o procedimento de implantação de eletrodos no cérebro de ratos para aplicar estimulação cerebral profunda (DBS), que modula a atividade neuronal e melhora a comunicação com o hipocampo, apoiando a sobrevivência neuronal e a neurogênese.

Fonte: Zhang, L., et al. A luz infravermelha próxima (NIr) aumenta a expressão de um marcador da função mitocondrial no epitélio sensorial vestibular do camundongo. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o processo de aplicação de luz NIr ao couro cabeludo de um camundongo raspado para ativar os neurônios vestibulares e estimular a produção de superóxido dismutase-1 (SOD-1), apoiando a função neuronal. O procedimento destaca a terapia NIr como uma estratégia neuroprotetora.

Fonte: Kuhn, Y. et al. A inibição intracortical dentro do córtex motor primário pode ser modulada alterando o foco de atenção. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o uso da estimulação magnética transcraniana (EMS) para modular a atividade do neurônio motor e medir as respostas musculares por meio de eletromiografia (EMG). Ele descreve as etapas para localizar o hotspot motor, determinar os limiares de estimulação e avaliar os efeitos da EMT subliminar (subEMT) na inibição cortical.

Fonte: Zhao, Z. et al. Um método invasivo para a ativação do giro dentado do camundongo por estimulação de alta frequência. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o protocolo para fornecer estimulação cerebral profunda de alta frequência a um giro dentado do hipocampo de camundongo, detalhando seus efeitos na ativação neuronal, plasticidade sináptica e neurogênese.

Fonte: Taube, W., et.al., Avaliação não invasiva de alterações na transmissão corticomotoneuronal em humanos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra um método não invasivo para avaliar as alterações na transmissão corticomotoneuronal em humanos após estimulação magnética transcraniana repetitiva (EMTr). O estudo apresenta uma técnica eletrofisiológica que diferencia as vias corticoespinhais rápidas e diretas das conexões polissinápticas.

Fonte: Kodani, S., et.al. Manipulação optogenética de circuitos neurais durante o monitoramento de estados de sono/vigília em camundongos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a manipulação optogenética de circuitos neurais envolvidos na transição do sono para a vigília em camundongos. O procedimento envolve a implantação cirúrgica de uma fibra óptica e eletrodos no cérebro e nos músculos para permitir a estimulação da luz e o registro eletrofisiológico. Ao fornecer luz para ativar canais...

Fonte: Sanchez, C. A., et al. Preparação de eletrodos de estimulação de nervos periféricos para implantação crônica em ratos. J. Vis. Exp. (2020).Este vídeo demonstra a estimulação do nervo vago em um rato acordado. Um rato com um eletrodo de manguito de nervo periférico crônico implantado e treinado em uma tarefa de pressão de alavanca é conectado a um gerador de estímulo por meio de uma tampa de cabeça implantada. O nervo vago é estimulado imediatamente após cada pressão bem-sucedida da...

Fonte: Childs, J. E., et al. Estimulação do nervo vago como ferramenta para induzir plasticidade em vias relevantes para o aprendizado da extinção. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o método de estimulação do nervo vago (VNS) em um modelo de rato para reduzir o comportamento de congelamento. Ratos condicionados ao medo recebem VNS durante a reexposição ao som, levando à redução do congelamento e revelando seu potencial terapêutico.

Fonte: Remacle, T., et al. Tratamento da dor lombar em pacientes com cirurgia nas costas com falha na estimulação da medula espinhal com múltiplas colunas. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o método de uso da estimulação da medula espinhal com várias colunas para controlar a dor lombar crônica em pacientes com síndrome de cirurgia nas costas (FBSS). O eletrodo pré-implantado fornece pulsos elétricos direcionados que ativam vias sensoriais não dolorosas, interrompendo os sinais de dor e...

Fonte: Moeller, S., et al., Estimulação do nervo vago como uma ferramenta de neuroestimulação adjuvante na depressão resistente ao tratamento. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra um protocolo clínico para Estimulação do Nervo Vago (VNS) como terapia adjuvante de neuroestimulação para depressão resistente ao tratamento (TRD).

Fonte: Charalambos, C. C., et al. Avaliação bilateral das vias corticoespinhais dos músculos do tornozelo usando estimulação magnética transcraniana navegada. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o método para avaliar as vias corticoespinhais dos músculos da perna usando estimulação magnética transcraniana (EMT). As respostas musculares ativas e de repouso são registradas em um hemisfério cerebral para avaliar a função corticomotora contralateral dos músculos da perna.

Pegue as construções musculares esqueléticas bioimpressas.Essas construções contêm pilares de hidrogel de fibrina com fibras musculares e microesferas incorporadas.A microesfera é uma estrutura polimérica porosa que envolve fatores neurotróficos.Pegue os gânglios da raiz dorsal isolados de embriões de pintinho.Coloque um gânglio em cada construção e incuba.Os fatores neurotróficos são liberados das microesferas em uma concentração fisiológica controlada, facilitando o surgimento de projeções...

Comece com um camundongo anestesiado com tumor e raspe sua cabeça.Coloque-o em um scanner de ressonância magnética integrado ao sistema de ultrassom focalizado.A ressonância magnética inicial localiza o tumor cerebral e os vasos sanguíneos próximos.Injete um agente de contraste por via intravenosa e, em seguida, administre nanopartículas marcadas com fluorescência revestidas em microbolhas cheias de gás.O agente de contraste e as microbolhas circulam e atingem o cérebro.Aplique ondas de...

Comece com um modelo de glioblastoma em camundongos, um tumor cerebral invasivo.Na periferia do tumor, a barreira hematoencefálica (BHE) permanece intacta, com células endoteliais formando junções apertadas que regulam a entrada molecular.O mouse é equipado com uma fibra óptica montada na cabeça para fornecer luz laser.Administre um laser infravermelho de baixa intensidade, que penetra na pele e no crânio para atingir o cérebro.O laser excita o oxigênio molecular nas células cerebrais, gerando...

Comece com um cérebro de rato colhido submerso em líquido cefalorraquidiano artificial em uma placa de Petri.Deposite o milirrobô magnético no córtex cerebral.O milirobô, denominado MANiAC, consiste em nanobastões de níquel alinhados magneticamente embutidos em uma microcápsula composta pelo hidrogel alginato biocompatível e carregada com um corante como medicamento modelo.Posicione um gerador de campo magnético externo abaixo da placa de Petri para gerar um campo magnético rotativo uniforme.Os...

Pegue culturas de células semelhantes a micróglias derivadas de monócitos humanos.Introduzir nanopartículas contendo um medicamento anti-inflamatório na cultura experimental e o medicamento livre no controle.As nanopartículas apresentam um invólucro hidrofílico e um núcleo hidrofóbico encapsulando a droga lipofílica.As células endocitam as nanopartículas, que liberam o fármaco por via intracelular, aumentando sua entrega.O fármaco livre entra por difusão passiva, processo limitado pelo...

Comece com uma cultura primária do mesencéfalo de embriões de ratos, contendo neurônios dopaminérgicos que superexpressam alfa-sinucleína mutada.Substituir os meios dos alvéolos de tratamento por meios frescos que contenham o composto de ensaio e os dos alvéolos de controlo por meios simples. Em seguida, incube.No controle, a alfa-sinucleína forma agregados tóxicos nos neurônios dopaminérgicos, causando retração dos neuritos e levando à morte neuronal.No tratamento, o composto de teste interage...

Comece com um rato anestesiado portador de um tumor cerebral composto de células tumorais em proliferação.Exponha o crânio do rato e crie um buraco para revelar a região do cérebro com o tumor.Pegue um biopolímero termicamente responsivo fundido com um peptídeo que penetra nas células e um inibidor de c-myc, uma proteína oncogênica.Injete o biopolímero na veia femoral do membro posterior para entrega ao cérebro.Aplique luz infravermelha através do orifício do crânio para aquecer o local do...

Pegue uma Drosophila transgênica.O cérebro da Drosophila expressa a proteína peptídica amilóide humana ou APP e uma enzima de clivagem.A enzima cliva a APP, permitindo a formação de placa beta-amilóide, que leva àdoença de Alzheimer ou patologia da DA em Drosophila.Alimente o modelo Drosophila AD com uma dieta contendo uma formulação simbiótica.A formulação contém uma combinação de três bactérias probióticas bioativas e um prebiótico.Dentro do intestino da mosca, o prebiótico suporta o...

Comece com um rato submetido à oclusão da artéria cerebral média, um procedimento cirúrgico que bloqueia temporariamente o fluxo sanguíneo para o tecido cerebral.Isso induz um acidente vascular cerebral isquêmico, levando a danos no tecido cerebral.Em seguida, remova o bloqueio para restaurar o fluxo sanguíneo.Selecione ratos que apresentem déficits neurológicos para garantir a relevância do estudo.Em seguida, administre a droga de teste ao grupo experimental enquanto injeta solução salina no...

Fonte: Slezia, A. et al. A entrega eletroforética de ácido γ-aminobutírico (GABA) no foco epiléptico previne convulsões em camundongos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a entrega eletroforética de ácido gama-aminobutírico (GABA) para inibir a atividade convulsiva em um camundongo anestesiado. Ele descreve as etapas envolvidas na implantação da sonda, registro da atividade neural, indução de convulsões e entrega controlada de GABA por meio de uma bomba de íons microfluídica para avaliar...

Fonte: Chen, Y., et al. Entrega intratecal de oligonucleotídeos antisense no sistema nervoso central de ratos. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a entrega de um composto de teste no líquido cefalorraquidiano (LCR) por meio de um cateter implantado na coluna vertebral lombar de um modelo de rato. O composto circula ao longo do LCR até o cérebro e a medula espinhal, entra nos neurônios e oferece potencial terapêutico.

Fonte: Leda, A. R., et al. Técnica de infusão de microcirurgia de camundongo para entrega de substância direcionada no SNC através da artéria carótida interna. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra um procedimento microcirúrgico projetado para facilitar a infusão direcionada de uma substância de teste no cérebro através da artéria carótida interna (ACI). O procedimento envolve sutura precisa e manipulação vascular para restringir temporariamente o fluxo sanguíneo, garantindo uma entrega...

Fonte: Kanazawa, T., et al. Novos métodos para administração intranasal sob anestesia inalatória para avaliar a administração de medicamentos nariz-cérebro. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a administração intranasal de medicamentos radiomarcados em um camundongo anestesiado para obter a entrega de medicamentos nariz ao cérebro. Ele explica como as drogas atravessam o epitélio nasal e viajam por vias neuronais para chegar ao cérebro, bem como como o movimento ciliar influencia a retenção...

Fonte: Wang, X. et. al., Entrega de medicamentos baseada em bomba osmótica para pesquisa de remielinização in vivo no sistema nervoso central. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra o método de administração de medicamentos neuroterapêuticos usando uma bomba osmótica em um modelo de camundongo desmielinizado. A liberação controlada do medicamento promove a remielinização ativando as células produtoras de mielina no corpo caloso.

Fonte: Paolone, G., et al. Agulhas personalizadas para microinjeções no cérebro de roedores. J. Vis. Exp. (2018).Este vídeo demonstra uma injeção de microagulha de cérebro de roedor usando uma microagulha de quartzo com orifícios. A microagulha é conectada a uma seringa e microbomba para controlar a taxa de entrega. A agulha com a solução injetável é inserida no cérebro com a velocidade de entrega definida como baixa. Uma vez posicionado, a velocidade de entrega é aumentada. A agulha é retirada...

Fonte: Akil, O., et al., Método cirúrgico para entrega de genes mediada por vírus ao ouvido interno de camundongos através da membrana da janela redonda. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o procedimento de entrega de um gene terapêutico no ouvido interno de um filhote de camundongo com perda auditiva geneticamente induzida. Usando um vetor viral adeno-associado (AAV), o gene é injetado através da membrana da janela redonda, permitindo que as partículas virais entrem nas células ciliadas,...

Fonte: Yavuz, B., et al. Formulando e caracterizando um sistema transportador de dopamina baseado em exossomos. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a formulação de exossomos carregados de dopamina, com foco na permeabilização da membrana induzida por saponina para aumentar o encapsulamento de dopamina dentro dos exossomos.

Fonte: Zeynalov, E. et. al., A infusão IV contínua é a via de tratamento de escolha para o bloqueador do receptor de arginina-vasopressina Conivaptan em camundongos para estudar o edema cerebral evocado por AVC. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a administração intravenosa de um antagonista do receptor de arginina-vasopressina (AVP) em um modelo de camundongo. A oclusão transitória da artéria cerebral média induz edema cerebral. Um antagonista do receptor AVP é administrado através de um...

Fonte: Martinez, E., et al. Farmacoterapia intracraniana e ensaios de dor em roedores. J. Vis. Exp. (2019).Este vídeo demonstra a administração intracraniana de um analgésico em um rato anestesiado com uma cânula guia pré-implantada no córtex pré-frontal. Um medicamento analgésico adicional é co-administrado por via intraperitoneal. Após a recuperação, a resposta térmica à dor do rato é avaliada usando o aparelho de Hargreave, onde a latência de retirada da pata é medida para avaliar os efeitos...

Fonte: Vanegas, M. I., et al. Sistema de microinjeção para infusão combinada de drogas e eletrofisiologia. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra um dispositivo microfluídico baseado em microeletrodo que fornece solução de medicamento através de um tubo capilar, usando uma solução de marcador à base de óleo para rastreamento preciso de volume e permitindo registro neural simultâneo e infusão de medicamento.

Fonte: Mohan, R., et al. Injeções intramusculares ao longo das placas motoras: uma abordagem minimamente invasiva para transportar traçadores diretamente para os neurônios motores. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra a entrega direcionada de um marcador neuronal fluorescente nos neurônios motores por meio de injeção intramuscular nas placas terminais motoras (MEPs). Ele descreve as etapas envolvidas na preparação do rato, injeção do marcador e avaliação dos neurônios motores marcados quanto...

Fonte: Parikh, S., et al. Um método de injeção alternativo e validado para acessar o espaço sub-retiniano por meio de uma abordagem posterior transcleral. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra o procedimento para entregar um corante fluorescente no espaço sub-retiniano de um camundongo. O processo envolve anestesiar o camundongo, preparar o olho, fazer incisões precisas para acessar o espaço sub-retiniano e injetar o corante para criar um descolamento de retina controlado. Essa técnica...

Fonte: Zhu, J., et. al., Preparação e Caracterização de Novas Nanopartículas que Mimetizam HDL para Encapsulamento do Fator de Crescimento Nervoso. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a montagem passo a passo de nanopartículas que imitam HDL carregadas com NGF usando encapsulamento assistido por protamina e automontagem à base de lipídios para possíveis aplicações de entrega neurotrófica.

Fonte: Fukushima, A., et al. Tratamento Intracerebroventricular com Resiniferatoxina e Testes de Dor em Camundongos. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra o procedimento de injeção intracerebroventricular de resiniferatoxina em camundongos para dessensibilizar os receptores TRPV1 no cérebro.

Fonte: Zheng, Y., et al. Modelos experimentais para estudar a neuroproteção do pós-condicionamento ácido contra isquemia cerebral. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a aplicação do pós-condicionamento ácido (APC) para avaliar seus efeitos neuroprotetores contra lesão isquêmica em um modelo de camundongo de oclusão da artéria cerebral média (MCAO). Ele descreve as etapas envolvidas na reperfusão no modelo MCAO e a aplicação de APC durante a reperfusão para mitigar a excitotoxicidade, o...

Fonte: Lee, S. E., et al. Avaliação dos efeitos neuroprotetores do extrato de Glycyrrhizae Radix et Rhizoma usando um modelo transitório de camundongo com oclusão da artéria cerebral média. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o procedimento para avaliar o efeito neuroprotetor de um composto de teste em um modelo de camundongo com oclusão da artéria cerebral média. O composto entra no cérebro, previne a morte neuronal e reduz o volume do infarto, confirmando seu efeito neuroprotetor em...

Fonte: Andreatta, R. D. et. al., A infusão subcutânea de neurotrofina 4 usando bombas osmóticas ou injeção muscular direta melhora o envelhecimento dos músculos laríngeos de ratos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a infusão de neurotrofina 4 (NTF4) em um modelo de rato idoso para restaurar a função muscular laríngea afetada pela denervação relacionada ao envelhecimento e redução das junções neuromusculares. O NTF4 desencadeia a regeneração nervosa e promove a formação de junções...

Fonte: Liou, C. et al. Entrega intracerebroventricular de metabólitos microbianos derivados do intestino em camundongos que se movem livremente. J. Vis. Exp. (2022).Este vídeo demonstra a injeção intracraniana de ácidos graxos de cadeia curta (SCFAs) em um camundongo que se move livremente para estudar seus efeitos no comportamento mediado pelo cérebro. Uma cânula injetora é inserida em uma cânula guia implantada no cérebro do camundongo. Após a recuperação, o camundongo se aclimata em uma nova...

Fonte: Joshi, K., et al. Abordagem cirúrgica estereotáxica para microinjetar o tronco encefálico caudal e a medula espinhal cervical superior através da cisterna magna em camundongos. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a abordagem estereotáxica da cisterna magna para entrega direcionada ao tronco encefálico e à medula espinhal superior. Ao acessar a cisterna magna cheia de líquido cefalorraquidiano, essa abordagem permite injeções precisas em áreas de difícil acesso usando métodos...

Fonte: Poland, R. et al. Microinjeção de cérebro de roedores para estudar substratos moleculares do comportamento motivado. J. Vis. Exp. (2015)Neste vídeo, uma configuração de microinjeção cheia de água que consiste em uma seringa e um tubo de microinjetor é usada para a administração precisa do medicamento. Um rato com uma cânula guia pré-implantada é submetido a microinjeção cerebral direcionada, permitindo a administração precisa de agentes terapêuticos em animais acordados com danos mínimos...

Fonte: Silva, C. et al. Desvendando o papel de áreas discretas do cérebro de ratos na regulação da ovulação por meio de inativação reversível por microinjeções de tetrodotoxina. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra o protocolo de microinjeção de tetrodotoxina (TTX) no hipotálamo de um rato em movimento livre para inibir transitoriamente a atividade neuronal, suprimir a secreção do hormônio liberador de gonadotrofina e impedir a ovulação.

Fonte: Rosenberg, M., et al. Projetando filmes de silício poroso como portadores do fator de crescimento nervoso. J. Vis. Exp. (2019).Este vídeo demonstra o uso de um filme de silício poroso nanoestruturado degradável (PSi) para a liberação sustentada do fator de crescimento nervoso (NGF) para apoiar a diferenciação celular PC12. O NGF é adsorvido nos poros do filme por meio de interações eletrostáticas e é gradualmente liberado no meio por difusão e degradação do andaime. Essa entrega...

Fonte: Zhan, J., et al. Estratégias não invasivas para manipulação crônica da atividade neuronal controlada por DREADD. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra um método de administração oftálmica não invasiva de medicamentos para neuromodulação direcionada. A droga é administrada por meio de colírios, absorvida pela circulação, atravessa a barreira hematoencefálica e ativa receptores neuronais específicos.

Fonte: Zamboni, M., et al., Indução de modificação de células leptomeníngeas via injeção intracisternal. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra o procedimento de administração de um medicamento indutor na cisterna magna de um camundongo anestesiado. A injeção induz seletivamente a expressão de marcadores fluorescentes em células da superfície cerebral acessíveis via líquido cefalorraquidiano, confirmado por imagens de fluorescência.

Fonte: Wilson, K.L., et al. Injeção de andaimes de biomaterial de hidrogel no cérebro após acidente vascular cerebral. J. Vis. Exp. (2020)Este vídeo demonstra a injeção estereotáxica de um hidrogel no núcleo do AVC de um camundongo pós-AVC, destacando seu papel na formação de andaimes que imitam a matriz extracelular, promovem a infiltração celular e apoiam a angiogênese, ressaltando seu potencial neuroterapêutico na recuperação do AVC.

Fonte: Xavier, A. L. R., et al. Implantação de cânula na cisterna magna de roedores. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o procedimento para implantar uma cânula na cisterna magna de um camundongo anestesiado. A técnica envolve guiar uma cânula montada em agulha através da dura-máter até a cisterna magna triangular invertida e prendê-la para entrega direcionada no líquido cefalorraquidiano.

Fonte: Unger, M. D., et al., Laminotomia para acesso e injeção do gânglio da raiz dorsal lombar em suínos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra um procedimento de laminotomia em um porco anestesiado para acessar o gânglio da raiz dorsal lombar para entrega neuroterapêutica direcionada usando entrega aprimorada por convecção.

Fonte: Mess, G., et al. Terapia sonodinâmica para o tratamento de glioblastoma multiforme em um modelo de camundongo usando um sistema portátil de ultrassom focado em bancada. J. Vis. Exp. (2023)Este vídeo demonstra um protocolo para realizar terapia sonodinâmica em um tumor cerebral em um modelo de camundongo usando ultrassom focalizado guiado por ressonância magnética (MRgFUS). Um precursor do sonossensibilizador é administrado antes do tratamento, que se acumula nas células tumorais e é...

Fonte: Kim, B. D., et al. Entrega de nanopartículas de uma carga útil de oligonucleotídeos em um modelo animal de glioblastoma multiforme. J. Vis. Exp. (2024)Este vídeo demonstra a injeção intravenosa de nanopartículas terapêuticas em um camundongo portador de glioblastoma. O método permite a entrega direcionada através da barreira hematoencefálica e oferece suporte a imagens não invasivas para avaliar a biodistribuição de nanopartículas e a eficácia terapêutica em tumores cerebrais.

Comece com um paciente diagnosticado com doença de Alzheimer, usando um dispositivo de estimulação de terapia gama.O dispositivo consiste em um aparelho de olhos e fones de ouvido.Usando o controlador, ative o dispositivo para fornecer estimulação auditiva e visual.O componente visual emite luz bruxuleante em uma frequência gama, enquanto o componente auditivo produz pulsos sonoros sincronizados.As oscilações gama são ondas cerebrais geradas por disparos neuronais sincronizados, cruciais para a...

Pegue um rato com um acidente vascular cerebral isquêmico focal no córtex cerebral, resultando em BBB comprometido, fluxo sanguíneo reduzido e atividade neuronal excessiva.O AVC também induz a ativação de astrócitos, levando à formação de astrócitos neurotóxicos que liberam citocinas pró-inflamatórias.Isso desencadeia neuroinflamação, levando à degeneração das células neuronais e endoteliais.Contenha o rato e posicione a bobina de EMTr sobre a região isquêmica.Administre a EMTr por vários...

Comece com um camundongo geneticamente modificado (GM) com sinalização a jusante interrompida de mGluR5, um receptor de neurotransmissor.No hipocampo de um camundongo comum, o mGluR5 regula a endocitose de receptores excitatórios de ação rápida das sinapses existentes, enfraquecendo-os.Os receptores internalizados são reciclados para sinapses recém-formadas, fortalecendo-as para a formação da memória.No camundongo GM, a sinalização mGluR5 prejudicada reduz a redistribuição do receptor,...

Fonte: Jang, S., et al, Convulsões eletroconvulsivas em ratos e fracionamento de seus hipocampos para examinar alterações induzidas por convulsões em proteínas de densidade pós-sinápticas. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a indução de uma convulsão eletroconvulsiva aguda (ECS) em um modelo de rato para estudar a neuroplasticidade induzida por convulsões. Os pesquisadores aplicam estimulação elétrica por meio de eletrodos de clipe de ouvido, desencadeando hiperexcitabilidade neuronal e...

Fonte: Sellers, K. K. et al. Neuroestimulação de circuito fechado para tratamento personalizado e orientado por biomarcadores do transtorno depressivo maior. J. Vis. Exp. (2023)Este vídeo demonstra o procedimento de configuração do sistema e gravação de dados para apoiar a detecção de biomarcadores específicos do paciente e a entrega de neuroestimulação para o tratamento do transtorno depressivo maior.

Fonte: Fritsch, B. et al. Estimulação elétrica cerebral transcraniana em roedores alertas. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra a implantação de eletrodos e a aplicação de estimulação elétrica transcraniana (tES) no córtex motor de ratos alertas. Ele descreve as etapas envolvidas na colocação do eletrodo, na administração da estimulação e na ativação neuronal e microglial resultante, destacando seu potencial neuroterapêutico.

Fonte: Beom, J., et al. Estimulação magnética transcraniana repetitiva no hemisfério unilateral do cérebro de ratos. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a aplicação da estimulação magnética transcraniana repetitiva (EMTr) em ratos anestesiados para modular a excitabilidade cortical. O procedimento envolve a determinação do limiar motor (MT) para estabelecer a estimulação basal, seguida pela aplicação de rTMS em uma intensidade acima do MT para induzir a despolarização neuronal. Essa...

Fonte: Shafi, M. M., et al. Um método multimodal baseado em imagem e estimulação para avaliar a excitabilidade cerebral relacionada à conectividade em pacientes com epilepsia. J. Vis. Exp. (2016)O vídeo demonstra o procedimento para usar a estimulação magnética transcraniana (EMT) e a eletroencefalografia (EEG) para avaliar a excitabilidade neuronal em pacientes com epilepsia. Ele detalha as etapas para alinhar a cabeça do paciente com uma varredura cerebral pré-gravada, posicionar a bobina TMS...

Fonte: Badran, B. W., et al. Administração laboratorial de estimulação transcutânea do nervo vago auricular (taVNS): técnica, direcionamento e considerações. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a estimulação transcutânea do nervo vago auricular (taVNS), um método não invasivo para modular a atividade cerebral. Os eletrodos são colocados na parede anterior do meato acústico externo e no tragus, visando o ramo auricular do nervo vago (ABVN). Quando estimulado, o impulso nervoso resultante...

Fonte: Dunlop, K., et al. dmPFC-rTMS guiado por ressonância magnética como tratamento para transtorno depressivo maior resistente ao tratamento. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o procedimento de estimulação magnética transcraniana repetitiva (rTMS) guiada por ressonância magnética direcionada ao córtex pré-frontal dorsomedial (dmPFC) para tratar a depressão.

Fonte: Rich, M. T., et al. Usando optogenética para reverter a neuroplasticidade e inibir a busca de cocaína em ratos. J. Vis. Exp. (2021)Este vídeo demonstra o uso da optogenética para induzir depressão de longo prazo (LTD) nas sinapses do núcleo geniculado medial para a amígdala lateral (MGN-LA), enfraquecendo o comportamento de busca de narcóticos induzido por sugestão em um modelo de rato. O rato, implantado cirurgicamente com fibras ópticas e transduzido viralmente para expressar canais...

Fonte: Jakobs, M., et al. Estimulação do campo do nervo trigêmeo subcutâneo para dor facial refratária. J. Vis. Exp. (2017)Este procedimento demonstra o implante de eletrodos subcutâneos para estimulação do nervo trigêmeo para tratar a dor facial neuropática. Os eletrodos são tunelizados subcutaneamente da região facial afetada para uma bolsa infraclavicular, onde são conectados a um gerador de pulso interno (IPG). O IPG fornece estimulação elétrica, ativando fibras mecanorreceptoras, que por...

Fonte: Stefanou, M., et.al. Estimulação cerebral dependente do estado cerebral com estimulação magnética transcraniana acionada por eletroencefalografia em tempo real. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o processo de estimulação magnética transcraniana (EMT) desencadeada por EEG em tempo real para estudar a excitabilidade cortical. O procedimento envolve posicionar a bobina TMS sobre o córtex motor, sincronizar a estimulação com fases específicas do sinal de EEG e registrar potenciais...

Fonte: Holbrook, C., et al. Estimulação contínua de Theta Burst do córtex frontal medial posterior para reduzir experimentalmente as respostas ideológicas à ameaça. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra a aplicação da estimulação contínua de explosão (cTBS) para modular as respostas a ameaças ideológicas. Os eletrodos de eletromiografia (EMG) registram os sinais motores, enquanto uma bobina magnética estimula o córtex motor primário a determinar o limiar motor ativo (aMT). A bobina é então...

Fonte: Pope, P. A. Modulando a cognição usando estimulação transcraniana por corrente contínua do cerebelo. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra os efeitos da ETCC catódica na função cognitiva, modulando a atividade neural no cerebelo. Ele descreve as etapas para administrar ETCC, realizar tarefas cognitivas e analisar seu impacto na memória de trabalho.

Fonte: Shirozu, K., et al. Resposta pupilar como avaliação da indução eficaz de convulsões por eletroconvulsoterapia. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o procedimento para realizar a eletroconvulsoterapia em um paciente humano, destacando o processo de estimulação e avaliando a atividade convulsiva por meio da resposta pupilar.

Fonte: Curado, M. et. al., Montagens de estimulação elétrica cerebral não invasivas para modulação da função motora humana. J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a configuração e o mecanismo da estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) para modular a função motora humana. Ao colocar o ânodo sobre o córtex motor primário e o cátodo sobre a área supraorbital contralateral, a estimulação elétrica direcionada aumenta a excitabilidade cortical, aumentando a atividade do neurônio motor...

Fonte: Shaw, M. T. et al. Estimulação Transcraniana por Corrente Contínua Supervisionada Remotamente: Uma Atualização sobre Segurança e Tolerabilidade. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o processo de autoadministração de estimulação transcraniana por corrente contínua (ETCC) para aprimoramento cognitivo. Ele descreve as etapas para a colocação do eletrodo, configuração da estimulação, avaliação da tolerabilidade e os efeitos neuroplásticos induzidos pela ETCC.

Fonte: Fehér, K. D. et. al., Registro de eletroencefalografia simultânea durante a estimulação transcraniana por corrente alternada (tACS). J. Vis. Exp. (2016)Este vídeo demonstra a configuração de experimentos simultâneos de estimulação transcraniana por corrente alternada (tACS) e eletroencefalografia (EEG) para fornecer sinais elétricos rítmicos ao cérebro enquanto registra a atividade cerebral. O procedimento garante o isolamento do eletrodo e evita a ponte de gel para estimulação precisa e...

Fonte: Tendler, A., et al. Como usar a bobina de estimulação magnética transcraniana profunda H1 para outras condições além da depressão. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o uso de estimulação magnética transcraniana profunda (dTMS) para aliviar os sintomas do transtorno de estresse pós-traumático, ou TEPT. Ele começa identificando a atividade reduzida no córtex pré-frontal medial (mPFC) como um fator-chave que contribui para a superativação da amígdala e aumento das respostas de medo. Ao...

Fonte: Chen, W., et al. Determinação da localização da estimulação usando um digitalizador 3D com estimulação transcraniana de corrente contínua de alta definição. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra o procedimento para fornecer estimulação transcraniana de corrente contínua de alta definição (HD-tDCS) posicionando com precisão os eletrodos usando o sistema 10-10, mapeando suas localizações com um digitalizador 3D e aplicando estimulação para modular a atividade neuronal em uma região...

Fonte: Lioumis, P. et al. Estimulação Magnética Transcraniana Combinada e Eletroencefalografia do Córtex Pré-Frontal Dorsolateral. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra um protocolo para combinar estimulação magnética transcraniana e eletroencefalografia para avaliar a excitabilidade cortical e o equilíbrio entre excitação e inibição no córtex pré-frontal dorsolateral.

Comece com uma co-cultura sem contato de neurônios e oligodendrócitos.Uma membrana permeável separa os neurônios na inserção do transwell dos oligodendrócitos no poço inferior.Adicione potássio à inserção para aumentar os níveis de potássio extracelular, o que inibe o efluxo de potássio intracelular.O acúmulo de potássio despolariza os neurônios, desencadeando a abertura de canais de cálcio dependentes de voltagem e permitindo o influxo de cálcio.O influxo estimula a liberação de...

Fonte: Shahror, R. A. et. al., Rastreando células-tronco mesenquimais marcadas com óxido de ferro superparamagnético usando ressonância magnética após entrega intranasal em um modelo murino de lesão cerebral traumática. J. Vis. Exp. (2019)Este vídeo demonstra a entrega intranasal de células-tronco mesenquimais (MSC) em um modelo de camundongo. As MSCs são absorvidas pelo tecido nasal, migram para o cérebro por meio de sinais de citocinas e secretam fatores neurotróficos no local da lesão,...

Fonte: Quattrocolo, G., et al. Transplante homocrônico de precursores de interneurônios em cérebros de camundongos pós-natais precoces. J. Vis. Exp. (2018)Este vídeo demonstra o transplante de células precursoras de interneurônios no cérebro de camundongos neonatais usando uma abordagem homotópica ou heterotópica. O procedimento envolve proteger um filhote receptor anestesiado, identificar a região do cérebro alvo e injetar uma suspensão de células precursoras derivadas de um filhote doador no...

Fonte: Parajuli, B., et.al. Transplante de microglia derivada de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos no cérebro de camundongos imunocompetentes por via transnasal não invasiva. J. Vis. Exp. (2022).Este vídeo demonstra o transplante transnasal de células da microglia humana derivada de células-tronco pluripotentes induzidas (iPSMG) em um cérebro de camundongo. A hialuronidase é aplicada nas narinas de um camundongo com depleção microglial para aumentar a permeabilidade. A...

Fonte: Gonzalez-Ramos, A., et. al., Transplante de neurônios GABAérgicos derivados de células-tronco humanas no hipocampo de camundongo pós-natal precoce para mitigar distúrbios do neurodesenvolvimento. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra a injeção estereotáxica de células precursoras de interneurônios derivados de humanos no hipocampo de um filhote de camundongo geneticamente modificado com interneurônios inibitórios reduzidos, com o objetivo de restaurar o equilíbrio...

Fonte: Struzyna, L. A. et. al., Redes Neurais de Engenharia de Microtecidos Tridimensionais Anatomicamente Inspiradas para Reconstrução, Modulação e Modelagem do Sistema Nervoso. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o desenvolvimento de redes neurais de microengenharia de tecidos usando uma microcoluna de hidrogel com um núcleo de matriz extracelular. Agregados neuronais semeados aderem, estendem projeções e formam redes neurais estruturadas, contribuindo para avanços no neurodesenvolvimento...

Fonte: Sharma, A. D., et.al. Caracterização de alto rendimento de células-tronco adultas projetadas para entrega de fatores terapêuticos para estratégias neuroprotetoras. J. Vis. Exp. (2015)Este vídeo demonstra o processo de caracterização de células-tronco mesenquimais transgênicas projetadas para expressar fatores neurotróficos terapêuticos. Ele descreve as etapas envolvidas na fixação, permeabilização e coloração das células com anticorpos primários e secundários direcionados a um marcador...

Fonte: Zimmermann, S., et.al. Enxerto de gordura enriquecido com fração vascular estromal para o tratamento de neuromas finais sintomáticos. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o procedimento cirúrgico para neurólise e lipoenxertia enriquecida com fração vascular estromal (SVF) no tratamento do neuroma sintomático. A neurólise remove o tecido de adesão para restaurar o deslizamento do nervo, enquanto o enxerto de gordura enriquecido com SVF é aplicado ao redor do nervo para criar uma...

Fonte: Lee, Y., et.al. Transplante de células de Schwann dentro de condutos PVDF-TrFE para construir uma ponte sobre cotos de medula espinhal de ratos seccionados para promover a regeneração do axônio através da lacuna. J. Vis. Exp. (2017)Este vídeo demonstra o uso de um conduíte de polímero piezoelétrico semeado com células de Schwann para promover a regeneração do axônio em uma medula espinhal de rato seccionada. O conduíte fornece orientação estrutural, enquanto suas propriedades...

Fonte: Palma-Tortosa, S., et.al. Culturas organotípicas do córtex humano adulto como um modelo ex vivo para transplante e validação de células-tronco humanas. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o transplante de células-tronco progenitoras neuronais derivadas de células-tronco em fatias de tecido cortical humano. O procedimento envolve isolar e ressuspender células progenitoras em uma matriz de membrana basal, seguida por sua injeção em uma fatia cortical colocada em um conjunto transwell.

Fonte: Weber, R. Z., et al. Transplante intracerebral e rastreamento de bioluminescência in vivo de células progenitoras neurais humanas no cérebro de camundongos. J. Vis. Exp. (2022)Este vídeo demonstra o transplante estereotáxico de células progenitoras neurais humanas geneticamente modificadas (NPCs) para o cérebro de camundongos. Os pesquisadores injetam NPCs que expressam luciferase e proteínas fluorescentes, permitindo imagens de bioluminescência in vivo e microscopia de fluorescência...

Fonte: Zweckberger, K., et al. Uso sinérgico de células precursoras neurais e peptídeos auto-montáveis em lesão experimental da medula espinhal cervical. J. Vis. Exp. (2015).Este protocolo demonstra uma abordagem de injeção direcionada para reparo de lesão medular em um modelo de rato. Envolve a entrega de peptídeos de automontagem (SAPs) no núcleo da lesão para criar um andaime de suporte, seguido por injeções de células precursoras neurais (NPC) ao redor da lesão para remodelar o tecido.

Fonte: Furmanski, O., et al. Modelo de Impacto Cortical Controlado de Lesão Cerebral de Camundongo com Transplante Terapêutico de Células Neurais Derivadas de Células-Tronco Pluripotentes Induzidas por Humanos. J. Vis. Exp. (2019)Neste vídeo, células neurais derivadas de células-tronco pluripotentes induzidas por humanos são injetadas estereotaxicamente na borda da substância cinzenta e da substância branca do córtex profundo em um modelo de camundongo de lesão cerebral traumática. As células...

Fonte: Ibanez-Rios, M.I., et al., Um Modelo Organoide Cerebral Humano de Transplante de Células Neurais. J. Vis. Exp. (2023)Este vídeo demonstra a injeção de células progenitoras neurais (NPCs) marcadas com fluorescência em organoides cerebrais humanos usando uma mistura de matriz celular. O método é reprodutível e livre de animais, permitindo o transplante com o mínimo de ruptura organoide. Ele oferece uma plataforma valiosa para modelar transplantes neurais e doenças do sistema nervoso...