Visualização de Vesículas Extracelulares de Cianobactérias Utilizando Microscopia Eletrônica de Transmissão

Resumo

Fonte: Biller, S. J., et al. Isolamento e caracterização de vesículas extracelulares de cianobactérias. J. Vis. Exp. (2022)

Este vídeo demonstra a preparação de vesículas extracelulares de cianobactérias para microscopia eletrônica de transmissão por coloração negativa, permitindo a visualização de alta resolução da morfologia, tamanho e pureza da vesícula para análises estruturais e comparativas.

Protocolo

1. Caracterização das vesículas isoladas

1. Realizar microscopia eletrônica de transmissão de coloração negativa (ver Tabela de Materiais) (TEM - microscopia eletrônica de transmissão; tamanho de partícula, estrutura, pureza).
   1. Para melhorar a qualidade da imagem, descarregue a superfície de uma grade MET revestida usando um sistema de descarga de brilho de acordo com as diretrizes do fabricante (consulte a Tabela de Materiais).
   2. Aplique cuidadosamente ~ 5 μL da amostra de vesícula e deixe descansar por 5 min.
      >NOTA: Amostras com concentrações de vesículas >10

Materiais

< >< tabela class='ck-table-resized'>Lista de materiais utilizados neste artigo Nome Empresa Número de catálogo Comentários 2% Solução de acetato de uranilaColoração negativa Electron Microscopy Sciences22400-2- TEMCarbon Support Film 200 Mesh, cobre. CF200-Microscopia Eletrônica Sciences71150Microscopia eletrônica de transmissão (TEM) sistemade limpeza de descarga de brilho easiGlow TedPella91000Descarregador de brilho de grade TEM comercialSistema de purificação de água de referência Milli-QMerckZ00QSV0WWSistema de purificação de água para obtenção de água de grau ultrapuro tipo IMicroscópio eletrônico de transmissãoJEOLJEM-1400ou microscópio similar