Imagem de fluorescência de infecção bacteriana associada a biomateriais em embriões de peixe-zebra

Resumo

Fonte: Zhang, X., et al. Um modelo de embrião de peixe-zebra para visualização in vivo e análise intravital da infecção por Staphylococcus aureus associada a biomateriais. J. Vis. Exp. (2019)

Este vídeo demonstra imagens de fluorescência de embriões de peixe-zebra injetados com Staphylococcus aureus, permitindo a quantificação da progressão da infecção e distribuição bacteriana para avaliar o impacto das microesferas de biomateriais nas interações patógeno-hospedeiro in vivo.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Microscopia de fluorescência da progressão da infecção e infiltração celular provocada em embriões de peixe-zebra

1. Anestesie os embriões colocando-os em uma placa de Petri de 100 mm contendo 0,02% (p / v) de ácido 3-aminobenzóico (Tricaína) para anestesiar Após 5 min, transfira os embriões para a placa de agarose revestida com meio E3 contendo 0,02% (p / v) de tricaína e alinhe-os em uma orientação para injeção. Pipete 500 μL de uma solução de metilcelulose PBS (solução salina tamponada com fosfato) a 2....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Microesferas de poliestireno de 10 μm de diâmetro (fluorescente azul)	Tecnologia da vida/ThemoFisher	Rolamento F8829
Ácido 3-aminobenzóico (tricaína)	Sigma-Aldrich	E10521-50G
Microscópio fluorescente estéreo LM80	Leica	MDG3610450126
Metilcelulose 4000cp	Sigma-Aldrich	MO512-250G
Placa de Petri	Falcão	353003
Placa de Petri	Biomerieux	NL-132
ImagemJ	Não aplicável	Não aplicável	Link: https://imagej.nih.gov/ij/download.html
GraphPad 7.0	Prisma	Não aplicável