Este vídeo demonstra um método baseado em cultura para identificar espécies de Vibrio , destacando o ágar cromogênico como uma alternativa mais precisa ao tiossulfato-citrato-sais biliares-sacarose comumente usado ou ágar TCBS. O ágar cromogênico fornece diferenciação superior das cepas de Vibrio, detectando atividades enzimáticas específicas da espécie.
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Artigo de método
Um novo meio cromogênico para detecção rápida de espécies de Vibrião
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26 de setembro de 2025
Neste artigo
Resumo
Protocolo
Crescimento em meios seletivos e diferenciais
- Dois a quatro dias antes do experimento, listre todas as cepas microbianas em meio não seletivo (TSAS, BHI ou ágar chocolate) para isolamento da colônia. Incubar as placas a 35-37 °C durante 48 horas. Verifique a pureza das culturas observando a morfologia da colônia após a incubação. Culturas puras devem produzir colônias que exibam morfologia de colônia semelhante.
- Transfira algumas colônias isoladas para 5 ml de caldo. Incube os tubos a 35-37 °C por 16-24 horas.
NOTA: Use colônias jovens, com menos de quatro dias de idade, para preparar culturas durante a noite em todos os experimentos.
- Listre um loop cheio de culturas durante a noite em meios seletivos e diferenciais (TCBS e ágar cromogênico) para isolamento de colônias. Incube as placas a 35-37 °C por até 96 horas.
- Registre o crescimento geral de todas as cepas examinando a densidade da cultura na placa e o tamanho das colônias isoladas. Registre a cor das colônias sob luz ambiente e/ou UV. Observe outras características da colônia isolada, como elevação, margem e forma.
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Materiais
| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Reagente/Equipamento | |||
| Ágar | Fisher Científico | DF0140-15-4 | pode usar outras marcas |
| BHI em pó | Fisher Científico | DF0418-17-7 | pode usar outras marcas |
| Gerador de gás CampyGen | Diagnósticos resistentes | CN035A | para fornecer uma atmosfera microaerofílica; pode usar outras marcas |
| Pratos de ágar chocolate | Diagnósticos resistentes | E14 | pode usar outras marcas |
| Tubos de cultura | Fisher Científico | S50712 | pode usar outras marcas |
| Placas de ágar HardyChrom Vibrio | Diagnósticos resistentes | G319 | Este estudo avalia este meio |
| Incubadora | Qualquer | ||
| Inoculando loops | Fisher Científico | 22-363-606 | O tamanho de 10 microlitros foi usado neste estudo |
| Placa de Petri | Fisher Científico | FB0875713 | pode usar outras marcas |
| Pipeta e pontas | Quaisquer pontas esterilizadas | ||
| Pó de TCBS | Diagnósticos resistentes | 265020 | Este estudo avalia este meio |
| TSB em pó | Fisher Científico | DF0370-07-5 | pode usar outras marcas |
| Armário de visualização UV | Qualquer | Emita luz UV de ondas longas | |
| Banho-maria | Qualquer | ||
| Espécies e estirpes bacterianas | |||
| Aeromonas hydrophila | ATCC | ||
| Candida albicans | ATCC | ||
| Campylobacter jejuni | ATCC | ||
| Escherichia coli | ATCC | ||
| Proteus mirabilis | ATCC | ||
| Pseudomonas aeruginosa | ATCC | ||
| Staphylococcus aureus | ATCC | ||
| Salmonella Choleraesuis | ATCC | ||
| Shigella boydii | ATCC | ||
| Shigella flexneri | ATCC | ||
| Shigella sonnei | ATCC | ||
| Vibrio alginolyticus | ATCC | ||
| V. cholerae (os sorotipos incluem O139, O1, não O1, biovares El Tor) | FDA, ATCC | ||
| V. damsela | FDA | ||
| V. fisheri | Ambiente | ||
| V. fluvialis | CDC | ||
| V. furnissii | CDC | ||
| V. hollisae | FDA | ||
| V. metschnikovii | ATCC | ||
| V. mimicus | FDA | ||
| V. parahaemolyticus (os sorotipos incluem O3:K6, O1:K56, O4:K8, O5:K15, O8, etc.) | ATCC, FDA, CDC, Meio Ambiente | ||
| V. proteolyticus | FDA | ||
| V. vulnificus | FDA |
