Este vídeo demonstra um ensaio de ágar semissólido à base de corante redox para avaliar a motilidade bacteriana distinguindo visualmente cepas móveis e não móveis.
NOTA: Oitenta cepas foram isoladas do ambiente aquático e identificadas usando um instrumento automatizado de identificação de bactérias (ver Tabela de Materiais), incluindo Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Salmonella spp., Vibrio spp., Klebsiella pneumoniae e Aeromonas hydrophila (Tabela 1). Staphylococcus aureus (ver Tabela de Materiais) foi usado como controle imóvel negativo; Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa e Salmonella typhimurium (ver Tabela de Materiais) foram usadas como cepas de controle positivo.
Identifique as cepas bacterianas de teste a serem usadas para análise de motilidade.
Incluir controles imóveis negativos e cepas de controle positivo móveis.
Observação da motilidade bacteriana aprimorada por TTC
Colher colónias isoladas de bactérias de ensaio de placas de ágar e inoculá-las no meio semi-sólido com TTC (cloreto de 2,3,5-trifeniltetrazólio), perfurando-as com agulhas de inoculação.
Cultive os tubos a 37 °C na incubadora por 24-48 h para observar os resultados.
Observe o estado de crescimento: caracterize a bactéria como imóvel (-) se apenas a linha de punção for vermelha. Caracterize a bactéria como móvel (+) se a cor vermelha se espalhar levemente para fora ao longo da linha de punção.
Tabela 1: Comparação da motilidade bacteriana.
Coar
Meio semissólido com ágar 0,4%
Meio semissólido com ágar 0,4% e TTC 0,005%
24 h
48 h
24 h
48 h
P. aeruginosa ATCC27853
+
+
+
+
E. coli ATCC25922
+
+
+
+
S. typhimurium ATCC14028
+
+
+
+
S. aureus ATCC25923
-
-
-
-
E. coli (15)
12
14
13
14
Salmonella spp. (8)
7
8
8
8
A. hydrophila (20)
18
20
20
20
Vibrio spp. (8)
7
8
8
8
P. aeruginosa (24)
18
20
22
23
K. pneumoniae (5)
-5
-5
-5
-5
Os números indicam o número de cepas positivas (+) e negativas (-).
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Materiais
Lista de materiais utilizados neste artigo
Nome
Empresa
Número de catálogo
Comentários
Ágar Bacto
Difco
Escherichia coli
ATCC
ATCC25922
Controle positivo
Pseudomonas aeruginosa
ATCC
ATCC27853
Controle positivo
Staphylococcus aureus
ATCC
ATCC25923
Controle imóvel negativo
Triptose
OXÓIDE
TTC (cloreto de 2,3,5-trifenil-tetrazólio)
Sigma
298-96-4
Sistema automatizado de identificação microbiana VITEK 2
Bio Mérieux
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