Realizando a entrega bacteriana intratraqueal em um modelo de camundongo

Resumo

Fonte: Venuprasad, K., et al. Administração intratraqueal de Haemophilus influenzae em modelos de camundongos para estudar a inflamação das vias aéreas. J. Vis. Exp. (2016)

Este vídeo demonstra a entrega intratraqueal de um inóculo bacteriano patogênico pulmonar em um camundongo anestesiado para modelar a infecção do trato respiratório inferior.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária do JoVE.

1. Instilação intratraqueal (i.t.)

1. Injete no camundongo por via intraperitoneal (i.p.) com 0,1 mL / 10 g de peso corporal do camundongo com uma solução de cetamina + 20 mg / ml de xilazina. O procedimento deve ser feito no capuz com uma fonte de luz para manter o animal aquecido.
2. Aperte o espaço interdigital do mouse para verificar se o mouse está adequadamente anestesiado.
3. Coloque o mouse de costas. Raspe a região ventral do pescoço e desinfete com clorexidina e álcool etílico a 70%.
4. Levante a pele da parte ventral superior do pescoço usando uma pinça de dente de rato. Faça uma pequena incisão (0,5-1,0 cm) acima do timo usando um bisturi e disseque cuidadosamente o músculo para expor a traqueia.
   1. Usando uma seringa de 1 ml com uma agulha de 27 G, injete lentamente 0,05 ml de ar, seguido por 0,05 ml de Haemophilus influenzae não tipável (NTHi) ou solução salina como controle, seguido por outro 0,05 ml de ar. Mantenha o animal na vertical por cerca de 1 min.
5. Feche a incisão com cola cirúrgica. Mantenha o mouse lateralmente reclinado e aquecido por cerca de 10 min.

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Solução rápida e hábil	Sigma	GS500-500ML
Agulha de seringa 20/26 G	BD	REF305115/175
Seringa de 1 ml	BD	REF 309602
Tesoura de dissecação, reta, 10 cm de comprimento	Kentscientific	INS600393
Pinça de íris, serrilhada, 10 cm de comprimento	Kentscientific	INS650915
Pinça 5 aço inoxidável, 11 cm de comprimento	Kentscientific	INS600095