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Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê local de cuidados com animais institucionais e pelo conselho veterinário JoVE.
- Injeção intraperitoneal de lipopolissacarídeo (LPS) em camundongos
- Aspire a solução de trabalho LPS em uma seringa de 0,5 mL com uma agulha de 30 G em fluxo de ar laminar.
- Pese fêmeas C57Bl/6 camundongos (de seis a dez semanas de idade) e calcule a quantidade de LPS que será injetada: 10 μL (2 μg)/g de peso corporal.
NOTA: Por exemplo, se um camundongo pesa 20 g, então é necessário injetar 20 g x 10 μL = 200 μL de solução de trabalho LPS. - Manuseie o rato com delicadeza, mas firmeza, e prenda o animal com uma mão. Certifique-se de que o animal consiga respirar normalmente, mas sem se torcer durante a contenção.
- Incline levemente o nariz do rato para o chão para expor o abdômen para injeção. Localize a linha média do abdômen e o local da injeção na parte inferior do abdômen, à esquerda ou direita a partir da linha média. Injetar soro tampão fosfatado intraperitonealmente (i.p.) em vez de LPS em camundongos controle.
- Com a mão livre, injete o volume apropriado (o volume calculado no passo 1.2) da solução de trabalho LPS. Certifique-se de que a agulha tenha entrado na cavidade peritoneal, caso contrário, podem ocorrer injeções incorretas na camada muscular abdominal. Ainda assim, não penetre muito fundo com a agulha na cavidade peritoneal para evitar lesões nos órgãos internos localizados nessa área.
- Devolva o animal cuidadosamente à gaiola, com até 5 camundongos por gaiola.