Estabelecimento de um modelo camundongo para infecção vaginal do grupo B por Streptococcus

Resumo

Fonte: Patras, K. A., Doran, K. S. Um modelo murino de colonização vaginal do grupo B por Streptococcus . J. Vis. Exp. (2016)

Este vídeo demonstra a preparação e inoculação vaginal de uma fêmea de camundongo tratada com hormônios e com Streptococcus do Grupo B para modelar a infecção. Explica como cultivar e preparar as bactérias, administrar o inóculo no lúmen vaginal e garantir o sucesso da infecção.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê local de cuidados com animais institucionais e pelo conselho veterinário JoVE.

1. Inoculação Vaginal com Streptococcus do Grupo B (GBS)

1. Um dia antes da inoculação, cultive uma cultura líquida de 5 ml durante a noite de uma cepa de GBS de interesse, como A909 (sorotipo Ia), em caldo Todd Hewitt (THB) a 37 °C.
2. Subcultura do GBS durante a noite em um volume 1:10 em THB fresco e incube a 37 °C. Faça crescer a bactéria até a fase média logaritarima (OD₆₀₀ = 0,4-0,5).

NOTA:

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Ponteiras de pipeta com carregamento de gel de 200 μl	USA Scientific	1252-0610
Caldo Todd Hewitt	Hardy Diagnostics	7161C
Solução de Sal Tamponado com Fosfato da Dulbecco 1x	Corning	21-031-CV