Avaliação da Carga Bacteriana no Baço de Camundongos para Estudos de Infecção

Resumo

Fonte: Madenspacher, J. H. e Fessler, M. B. Um método não invasivo e tecnicamente não intensivo para indução e fenotipagem de pneumonia bacteriana experimental em camundongos. J. Vis. Exp. (2016)

Este vídeo demonstra o processo de quantificar a carga bacteriana no baço de um camundongo infectado para avaliar a gravidade da infecção. O baço homogeneizado é diluído em série e placado para determinar a carga bacteriana total. Os dados resultantes fornecem insights sobre as interações hospedeiro-patógeno dentro do tecido sistêmico.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê local de cuidados com animais institucionais e pelo conselho veterinário JoVE.

1. Aspiração intratraqueal murina de Klebsiella pneumoniae da orofaringe

1. Certifique-se de que os camundongos sejam identificados de forma única por marca de cauda, tatuagem ou outro identificador aprovado.
2. Elabore um inóculo dosístico das bactérias usando uma pipeta P200 antes de remover camundongos do isoflurano para agilizar o procedimento. Para melhores resultados com aspiração de i.t., use um volume de <100 μl para evitar transbordamento. Aqui, util....

Resultados

Figura 1: Conselho de Procedimentos para Pneumonia por Aspiração em Camundongos. Os camundongos de estudo são posicionados, cabeça para cima e de costas para a tábua (ou seja, semi-reclinados), suspensos pelos incisivos em um elá.......

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
ATCC	43816
Becton Dickenson	211825
Preparado internamente	N/A	Água destilada (5 L), NaCl (40 g), KCl (1 g), Na₂HPO₄ (5,75 g), KH₂PO₄ (1 g)