Todos os procedimentos envolvendo participantes humanos foram realizados em conformidade com as diretrizes institucionais, nacionais e internacionais para o bem-estar humano e foram revisados pelo conselho de revisão institucional local.
1. Aparelho de corte de próstata
- Adquira o aparelho de corte de próstata (Tabela de Materiais). Como alternativa, imprima um cabo de lâmina usando uma impressora 3D.
2. Direcionamento do tumor
- Revise as anotações clínicas para identificar a lesão índice conforme indicado pela biópsia diagnóstica, por exemplo, posterior esquerda.
- Revise as imagens de ressonância magnética para medir a localização do tumor acima.
- Encontre a sequência em que o tumor é mais visível no plano axial, por exemplo, ponderado em T2.
- Percorra as imagens axiais para encontrar a imagem onde o tumor é maior e imprima a imagem para referência.
- Na imagem coronal correspondente, meça a distância da base da próstata até a posição axial selecionada e o comprimento total da próstata do ápice à base (mm) e imprima para referência.
3. Coleta de Próstata
- Verifique as anotações do paciente para garantir que o consentimento informado apropriado tenha sido obtido para este procedimento e quaisquer aplicações de pesquisa posteriores.
- Após a prostatectomia radical, colete a próstata em uma panela seca. Certifique-se de que nenhuma formalina ou outro fixador foi adicionado à próstata.
- Transfira para um local estéril adequado para amostragem, por exemplo, uma capela de fluxo laminar em um laboratório de patologia.
- Proceder à amostragem o mais rapidamente possível se for necessário tecido fresco.
NOTA: Para certas aplicações (por exemplo, avaliação de DNA, que não deve se degradar tão rapidamente quanto o RNA), pode ser apropriado refrigerar a amostra e coletar amostras no dia seguinte.
4. Preparação da amostra
- Preparar a capela de fluxo laminar e o aparelho de corte da próstata de acordo com os procedimentos locais de descontaminação, utilizando técnicas estéreis. Aqui, borrife etanol 70% e limpe todas as superfícies. Use agulhas e bisturis estéreis de uso único. Use lâminas de corte até três vezes; Lave após cada uso em água quente com sabão, depois borrife e limpe com etanol 70%.
- Pesar a próstata (g) usando uma balança padrão.
- Pinte a próstata. Pinte o lado esquerdo com tinta azul e o lado direito com tinta preta. Cobrir a cápsula cheia e as vesículas seminais com tinta para posteriormente denotar as margens cirúrgicas.
NOTA: Os procedimentos de escrita à tinta podem variar localmente e podem ser modificados de acordo.
5. Fatiamento da próstata
- Monte o aparelho de fatiar inserindo as paredes perpendicularmente na base do suporte (Figura 1A).
- Coloque a próstata de forma que a base e o ápice fiquem voltados para paredes opostas, com o lado posterior para baixo e o anterior para cima. Coloque alfinetes de ouro ao redor da próstata. Empurre a próstata ligeiramente para dentro, se necessário, para obter um ajuste confortável, que apoiará a próstata durante o corte.
- Meça o comprimento da próstata da base ao ápice usando uma régua e compare-o com o comprimento da próstata medido por ressonância magnética. Se a próstata encolheu, aplique uma correção ad hoc à distância prevista da base ao corte transversal alvo. Por exemplo, se o comprimento total da próstata na imagem de ressonância magnética for de 50 mm, mas quando medido com uma régua neste ponto, mostrar que encolheu para 45 mm, reduza a posição de corte prevista em 10%.
- Meça da base até a fatia transversal desejada. Escolha o pino que fica mais próximo dessa medida para cortar.
- Usando luvas de cota de malha para evitar ferimentos, segure o dispositivo de corte (Figura 1B), coloque as lâminas em ambos os lados do pino identificado e use o espaçador para manter as lâminas separadas por 5 mm. Faça uma fatia movendo lenta e firmemente as lâminas para baixo, para frente e para trás com movimentos longos (Figura 1C). Certifique-se de que uma fatia inteira foi separada antes de desmontar o aparelho.
- Remova as paredes e os alfinetes e retire cuidadosamente a fatia para uma folha estéril de papelão usando luvas.
6. Amostragem de tecido
- Inspecione visualmente o corte transversal e compare-o com a imagem de ressonância magnética axial. Em alguns casos, a área do tumor pode parecer mais pálida do que o tecido circundante.
- Palpe suavemente a fatia transversal. Em alguns casos, o tumor pode parecer mais firme do que o tecido circundante.
- Usando a imagem de ressonância magnética axial como guia, selecione uma ou mais áreas para amostragem.
- Faça punções de biópsia da área desejada do tecido.
- Usando um punção de 6 mm, empurre para baixo a área desejada do tecido.
- Torça o punção de tecido no local e para baixo contra a rolha para garantir a separação total e use um bisturi afiado para separar, se necessário.
- Remova o punção e coloque-o em tubos/moldes conforme necessário, ejetando usando o êmbolo.
- Repita para outras amostras tumorais e benignas, conforme necessário, com punções de biópsia estéreis separadas. Pinte os buracos onde os punções foram feitos em vermelho.
- Observe a localização de cada punção junto com o peso da próstata e quaisquer observações sobre a cor/firmeza do tecido.
