Câncer de Próstata

Organoides derivados de tumores são um tipo de modelo de cultura de células 3D que pode manter as características patológicas e a linhagem celular específica de órgãos de tumores. No protocolo de exemplo, veremos os cientistas gerarem organoides a partir de um tumor de próstata a partir de um modelo de camundongo geneticamente modificado.

Neste vídeo, realizamos um ensaio spin-down para incorporar organoides 3D de câncer de próstata em agarose. Esses organoides incorporados podem ser usados para análises histopatológicas adicionais para estudar o crescimento e o desenvolvimento do câncer.

Neste vídeo, demonstramos a cultura de células epiteliais isoladas da próstata de camundongo usando uma técnica de cultura baseada em anel de gel de matriz. Essa abordagem pode fornecer informações complementares sobre a capacidade de diferenciação das células epiteliais da próstata para formar estruturas glandulares 3D em resposta à manipulação genética ou farmacológica.

Neste vídeo, demonstramos a extração de lisados de proteínas de organoides de próstata cultivados em um anel de matriz de membrana basal. A análise das frações proteicas extraídas pode ajudar a estudar a expressão do marcador de linhagem nos organoides.

Este vídeo descreve a técnica de coloração imunofluorescente de organoides intactos de câncer de próstata e sua imagem por microscopia confocal de montagem total. Esta técnica tem como objetivo avaliar a capacidade de diferenciação ex vivo de células epiteliais basais e luminais da próstata.

Este vídeo demonstra uma técnica baseada em dados de ressonância magnética para atingir regiões específicas contendo tumores no tecido da próstata para amostragem. As amostras de biópsia coletadas podem ser armazenadas para fins de biobanco ou usadas para análise subsequente a jusante.

Neste vídeo, demonstramos o isolamento de células epiteliais de câncer que expressam EpCAM a partir de amostras de sangue periférico. A técnica envolve o uso de um fio de grau médico funcionalizado com anticorpos EpCAM para capturar as células-alvo. As células capturadas são então posteriormente extraídas para uma solução tampão.

Este vídeo descreve a técnica para isolar células individuais de um conjunto de células-alvo para realizar análises downstream. Neste método, um micromanipulador instalado em um microscópio é usado para isolamento de alta precisão de uma única célula-alvo.

Este vídeo descreve a técnica para obter uma única célula de uma população de células heterogêneas usando microdissecção por captura a laser. A única célula isolada pode ser usada para estudos genômicos adicionais ou pesquisas sobre o câncer.

Este vídeo descreve um protocolo para gerar modelos celulares de câncer de próstata resistentes a taxanos. Esses modelos podem ajudar a estudar as vias envolvidas na progressão para a resistência ao docetaxel em pacientes com câncer de próstata.

Este vídeo descreve um método para avaliar a resistência a medicamentos quimioterápicos em células de câncer de próstata usando o ensaio de formação de colônias. Este ensaio pode ser usado como uma ferramenta funcional para identificar novos mecanismos moleculares e celulares de quimiorresistência em células cancerígenas.

Neste vídeo, demonstramos a indução de autofagia baseada em arginina deiminase em células de câncer de próstata. Além disso, a microscopia de fluorescência avançada pode ser usada para visualizar as mudanças associadas à indução da autofagia, incluindo a formação e distribuição de autofagossomos e lisossomos e sua fusão em autolisossomos.

Este vídeo descreve a técnica de extração e digestão de proteínas para obtenção de peptídeos do tecido tumoral da próstata. Esses peptídeos, em análises posteriores, podem ajudar a identificar novos alvos para oncoterapia.

Neste vídeo, demonstramos cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa para purificar peptídeos de uma mistura de lisado de proteína digerida. Esses peptídeos purificados são então liofilizados e armazenados para aplicações a jusante. A análise de peptídeos pode ajudar a entender a mecânica envolvida na sinalização celular e no câncer.

Neste vídeo, demonstramos a imunoprecipitação baseada em anticorpos de fosfopeptídeos de uma mistura de peptídeos. Os fosfopeptídeos enriquecidos são concentrados a vácuo e armazenados para análise a jusante.

Este vídeo demonstra o enriquecimento à base de dióxido de titânio de fosfopeptídeos extraídos do tecido tumoral da próstata. Esses fosfopeptídeos enriquecidos podem ser usados para aplicações a jusante, como caracterização de proteínas, para entender as vias de sinalização celular envolvidas na progressão do câncer de próstata.

Neste vídeo, descrevemos o procedimento para a dissecção do sistema urogenital ou UGS de um modelo de camundongo macho. Este UGS é posteriormente dissecado ex vivo para isolar a próstata e estudar seu papel no desenvolvimento do câncer de próstata.

Este vídeo descreve uma técnica para colher lobos individuais da próstata de um modelo de camundongo. Os lobos individuais podem então ser usados para análise histológica e pesquisa do câncer.

Neste vídeo, demonstramos o procedimento para administrar injeção intraprostática de células de câncer de próstata em um modelo de camundongo. Modelos murinos ortotópicos podem ser usados para estudar a origem da doença e a resposta às terapias de tratamento em um ambiente não invasivo e clinicamente relevante.

Neste vídeo, demonstramos a implantação de enxertos de tecido de câncer de próstata derivados de humanos na cápsula renal de um camundongo receptor imunocomprometido. Essa técnica pode ser usada para avaliar a progressão do tumor e desenvolver novas estratégias terapêuticas.

Este vídeo descreve um método para editar genes específicos em células da próstata usando um sistema de entrega baseado em adenovírus. A abordagem permite a alteração ortotópica e localizada da expressão gênica utilizando a tecnologia CRISPR para desenvolver novos modelos de camundongos para câncer de próstata.