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Amostragem de microextração em fase sólida: uma técnica baseada em sonda para extração de amostras de tecidos de enxerto

April 30th, 2023

In This Article

Abstract

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Fonte: Stryjak, I. et al. Usando uma biópsia química para avaliação da qualidade do enxerto. J. Vis. Exp. (2020)

Neste vídeo, demonstramos a extração de metabólitos baseada em sonda SPME de um rim de doador pré-colhido. Os metabólitos extraídos podem ser utilizados para realizar análises metabolômicas e lipidômicas, a fim de avaliar a qualidade do órgão para transplante.

Protocol

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,

Todos os procedimentos envolvendo participantes humanos foram realizados em conformidade com as diretrizes institucionais, nacionais e internacionais para o bem-estar humano e foram revisados pelo conselho de revisão institucional local.

1. Preparação de Sondas

  1. Preparar sondas de liga de titânio-níquel (40 mm de comprimento; 0,2 mm de diâmetro) revestidas com um adsorvente de modo misto de 7 mm. O número de sondas depende dos pontos de tempo visados durante todo o procedimento e do número de réplicas (3 são recomendadas por ponto de tempo).
    nota: A duração e o tipo de fase de extração pod....

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Disclosures

$$\rightleftharpoonup{xx}$$ $$\longleftharp{xx}$$, $$\longrightharp{xx}$$,
Não há conflitos de interesse declarados.

Materials

List of materials used in this article
NameCompanyCatalog NumberComments
ácido acéticoMerck5330010050Aditivo de fase móvel
AcetonitriloAlquimia696-34967-4X2.5LSolvente para HPLC
Acetato de amônioMerck5330040050Aditivo de fase móvel
MISTURADOR DE BANCADA XL VÓRTICE MULTITUBOBenchmark CientíficoBV1010Misturador de vórtice
CapsTecnologias PerlanRolamento 5183-2076Azul scrw tp, pré-fenda PTFE / Si spta, 100PK
clorofórmioMerck1024441000
Cartucho Discovery HS F5 Supelguard, 3 μm, L × I.D. 2 cm × 2,1 mmMerck567570-UColuna de proteção para HPLC
Discovery HS F5, 2,1 mm x 100 mm, 3 μmMerck567502-UColuna para HPLC
ácido fórmicoAlquimia497-94318-50MLAditivo de fase móvel
Frascos de vidroTecnologias PerlanRolamento 5182-0714
HILIC Luna 3 μm, 200A, 100 x 2,0 mmCalço-PolPHX-00D-4449-B0Coluna para HPLC
Cartucho HILIC SecurityGuard, 3 μm, 4 x 2,0 mmCalço-PolPHX-AJ0-8328Coluna de proteção para HPLC
IsopropanolAlquimia231-AL03262500Solvente para HPLC
metanolAlquimia696-34966-4X2.5LSolvente para HPLC
Água nanopuraMerck1037281002Solvente para HPLC
Q Foco Exativo híbrido quadrupolo-Orbitrap MSThermo CientíficoQ Foco AtivoEspectrômetro de Massa
SeQuant ZIC-cHILIC 3μm, 100Å 100 x 2,1 mmMerck1506570001Coluna para HPLC
Kit de proteção SeQuant ZIC-HILIC 20 x 2,1 mmMerck1504360001Coluna de proteção para HPLC
Sondas de fibra SPME LC, modo mistoSupelcofibras protótipo
Sistemas de HPLC UltiMate 3000Thermo CientíficoUltiMate 3000Sistema de HPLC
Inserções de frascos (desativados)Tecnologias PerlanRolamento 5181-8872
XSelect CSH C18 3,5μm 2,1x75mmÁguas186005644Coluna para HPLC
Cartucho XSelect CSH C18 VanGuard 3,5μm, 2,1x5mmÁguas186007811Coluna de proteção para HPLC

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Solid Phase MicroextractionSPME ProbeMetabolite ExtractionGraft Tissue SamplingOrgan Quality AssessmentHydroalcoholic CleaningActivation SolutionDesorption SolutionLC MS AnalysisSterile Processing

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