Câncer do Trato Urinário

Neste vídeo, demonstramos a seccionamento do vibratome de um rim de camundongo inteiro para obter fatias finas. Essas seções de tecido fatiado podem ser armazenadas em baixas temperaturas até uma análise posterior a jusante.

Neste vídeo, demonstramos a extração de metabólitos baseada em sonda SPME de um rim de doador pré-colhido. Os metabólitos extraídos podem ser utilizados para realizar análises metabolômicas e lipidômicas, a fim de avaliar a qualidade do órgão para transplante.

Este vídeo descreve a técnica de coloração de DNA extracelular em seções de tecido FFPE. O DNA extracelular corado pode ser quantificado para determinar a eficácia de qualquer tratamento terapêutico que leve à morte de células cancerígenas.

Neste vídeo, descrevemos o protocolo para derivar podócitos renais humanos de células-tronco pluripotentes induzidas por meio da diferenciação celular sob condições químicas definidas. Os podócitos gerados podem ser usados para testes de nefrotoxicidade e modelagem de doenças.

Neste vídeo, demonstramos o isolamento de células musculares lisas detrusoras de amostras de bexiga urinária humana usando um tratamento enzimático sequencial em duas etapas.

Este vídeo demonstra a caracterização das correntes catiônicas dos canais iônicos de melastatina tipo 4 (TRPM4) com potencial receptor transitório em células musculares lisas detrusoras usando a técnica de patch-clamp perfurado mediado por anfotericina B. A técnica ajuda a avaliar as propriedades biofísicas e farmacológicas dos canais iônicos.

Este vídeo descreve o método para isolar glomérulos intactos dos rins de camundongos. Os glomérulos encapsulados e descapsulados assim obtidos podem ser usados para a cultura de conseqüências de células epiteliais parietais do rim murino.

Este vídeo demonstra a preparação de blocos esferoides cancerígenos por congelamento instantâneo, uma técnica na qual uma amostra de tecido de interesse é congelada a uma temperatura ultrafria, restringindo os esferoides dentro da matriz.

Este vídeo descreve uma técnica de ultracentrifugação baseada em densidade para isolar exossomos de meios condicionados colhidos de culturas de células renais embrionárias humanas usando uma almofada de sacarose a 25% (p/p) preparada em óxido de deutério. Os exossomos isolados podem ser usados para aplicações a jusante.

Este vídeo descreve um método baseado em eletroporação para encapsular siRNA em exossomos. Os exossomos carregados de siRNA podem então ser usados para aplicações terapêuticas.

Neste vídeo, demonstramos as etapas para isolar e purificar células epiteliais tubulares renais para uma ampla gama de estudos de biologia molecular e cultura de células.

Neste vídeo, descrevemos o protocolo para a realização da coloração de Schiff com ácido periódico (PAS) para avaliar as anomalias estruturais no glomérulo renal. O método de coloração PAS permite a avaliação adequada da fisiopatologia do glomérulo.

Este vídeo demonstra a metodologia para realizar Reverse Phase Protein Arrays (RPPA) para estudar padrões de expressão de proteínas a partir de lisado celular. No RPPA, o lisado contendo uma mistura de proteínas é impresso em lâminas de nitrocelulose e as proteínas de interesse são analisadas usando anticorpos marcados com fluorescência.

Neste vídeo, descrevemos um método chamado patologia de expansão, uma variante da microscopia de expansão, em que as amostras de tecido clínico são expandidas quimicamente usando uma rede de polímeros para exame microscópico de estruturas em nanoescala.

Este vídeo descreve o procedimento para gerar um modelo murino experimental de xenoenxerto, que pode ser usado para estudar a progressão do carcinoma de células uroteliais.

Neste vídeo, descrevemos o transplante ortotópico de organoides tumorais de bexiga cultivados para a bexiga murina para estudar o papel do ambiente do órgão no desenvolvimento de tumores.

Este vídeo demonstra o procedimento para gerar um modelo de camundongo com obstrução ureteral unilateral. O procedimento envolve o corte de um dos ureteres do camundongo para obstruir o fluxo de urina.

Neste vídeo, descrevemos o procedimento intravesical de entrega de células cancerígenas na bexiga de um modelo de camundongo. Esse procedimento ajuda a gerar um modelo de tumor ortotópico de bexiga que pode ser usado para desenvolver estratégias terapêuticas.

Neste vídeo, descrevemos um procedimento baseado em cateter para esvaziar e enxaguar a bexiga urinária de um modelo de camundongo. O mouse preparado pode então ser usado para outros procedimentos experimentais.

Este vídeo demonstra a entrega de plasmídeo de DNA no urotélio da bexiga do camundongo usando uma combinação de técnicas de cateterismo uretral e eletroporação. O procedimento descrito permite a geração de modelos de câncer de bexiga de camundongos.

Neste vídeo, apresentamos o protocolo de injeção hidrodinâmica de plasmídeos na pelve renal do rim de camundongo para transfecção de ácido nucleico. Essa técnica permite a entrega de plasmídeos específicos do órgão, utilizando o princípio da alta pressão hidrostática, que impulsiona com força os plasmídeos para o local específico sem causar lesão tecidual.

Neste vídeo, desenvolvemos um modelo ortotópico de carcinoma de células renais em camundongos. Esse modelo resulta em tumores primários reprodutíveis no rim injetado e tumores metastáticos no pulmão, permitindo a avaliação da progressão da doença e do tratamento.

Este vídeo demonstra a microinjeção intravenosa de nefrotoxinas na veia da cauda de um embrião de peixe-zebra para estudar seus efeitos químicos na função renal.

Neste vídeo, demonstramos a administração intrarrenal de medicamentos em ratos através da artéria renal. Este método é benéfico para melhorar o direcionamento do medicamento, a potência do medicamento e minimizar a toxicidade sistêmica.

Este vídeo mostra a aspiração de fluidos de glomérulos de camundongos usando a técnica de micropuntura mediada por dois fótons. A técnica fornece acesso aos glomérulos do camundongo vivo e, portanto, ajuda a obter informações sobre a fisiologia renal.

Neste vídeo, descrevemos o procedimento de extração renal do espaço retroperitoneal do camundongo. O rim extraído pode ainda ser microdissecado para obter um rim intacto sem cápsula renal e a camada de gordura circundante.

Este vídeo descreve a preparação de um rim de rato descelularizado. O arcabouço vascular acelular obtido pode servir como uma plataforma promissora para a engenharia tecidual de enxertos de órgãos.

Este vídeo demonstra a dissecação e preparação de uma montagem plana do rim de peixe-zebra adulto. A montagem plana preparada pode ser visualizada ao microscópio para análise de amostras.

Neste vídeo, demonstramos a despigmentação do rim de peixe-zebra adulto e sua posterior preparação para procedimentos de coloração. Após a coloração, o rim de peixe-zebra adulto pode ser usado para estudar a regeneração renal, caracterização fenotípica de modelos de doença renal e funcionalidade do néfron.

Este vídeo descreve um método para estudar o desenvolvimento de órgãos usando uma configuração aprimorada de xenotransplante na membrana corioalantóide (CAM) de embriões de aves. Este método permite o desenvolvimento de órgãos embrionários e organoides cultivados totalmente vascularizados.