Modelo murino de obstrução ureteral unilateral: um procedimento cirúrgico para obstruir o fluxo urinário de um rim em modelos de camundongos

Resumo

Fonte: Yanai, K. et al. Avaliação quantitativa por PCR em tempo real das expressões de microRNA em rim de camundongo com obstrução ureteral unilateral. J. Vis. Exp. (2020)

Este vídeo demonstra o procedimento para gerar um modelo de camundongo com obstrução ureteral unilateral. O procedimento envolve o corte de um dos ureteres do camundongo para obstruir o fluxo de urina.

Protocolo

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.

1. A Cirurgia UUO

1. Prepare os seguintes itens: isoflurano, folha de cortiça, creme depilatório, lenços umedecidos, placa de Petri com PBS, seda 4-0, nylon 4-0, seringa de 2,5 mL, cotonetes, pinças, tesouras cirúrgicas e camundongos machos C57BL/6 de 8 semanas de idade.
2. Anestesiar um camundongo com isoflurano a 1,5% e manter a 1,5%. Em seguida, aplique o creme depilatório no abdômen do camundongo. Após alguns minutos, limpe o creme depilatório com um lenço umedecido em PBS.
3. Injete etanol a 70% no abdômen do camundongo e coloque-o em decúbito dorsal na folha de cortiça.
4. Usando tesouras cirúrgicas e pinças, faça uma incisão na pele no abdômen e corte o músculo e a membrana peritoneal da bexiga até a borda inferior esquerda das costelas.
5. Coloque a seringa de 2,5 mL embaixo do mouse. Pegue dois cotonetes e umedeça-os com PBS. Puxe os intestinos cuidadosamente para o lado com a pinça e coloque os cotonetes umedecidos adequadamente para identificar o ureter esquerdo. Usando a pinça, levante o rim esquerdo.
6. Use a seda 4-0 para ligar o ureter esquerdo em dois lugares a aprox. 1 cm de distância. Corte o ureter no ponto central das duas ligaduras e, em seguida, use suturas de náilon 4-0 para fechar a membrana peritoneal e a incisão.