$$\rightleftharpoonup{xx}$$
$$\longleftharp{xx}$$,
$$\longrightharp{xx}$$,
Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE.
1. Indução da expressão do gene dependente de tetraciclina ou shRNA
CUIDADO: A doxiciclina pode ser prejudicial. Consulte a ficha de dados de segurança.
NOTA: Dependendo do tipo e duração do experimento, a doxiciclina pode ser fornecida na água potável.
- Para experimentos de curto prazo (<10 dias), administre doxiciclina através da água potável usando o seguinte protocolo.
- Dissolva 5 g de sacarose em 100 mL de água da torneira. Autoclave.
- Dissolva 100 mg de doxiciclina-hiclato em 5 ml de solução de sacarose (passo 1.1.1) num tubo cónico de 15 ml.
- Usando uma seringa de 10 mL, filtre a solução através de um filtro de 0,2 μm. Adicionar à solução de sacarose preparada no passo 1.1.1.
- Forneça solução de doxiciclina-sacarose como água potável para o camundongo. Verifique diariamente e substitua quando a solução ficar turva, indicando crescimento excessivo de bactérias (substitua a solução límpida após três dias, o mais tardar).