Ensaio de triagem de nematicidas de moléculas pequenas: um método de rendimento médio para rastrear nematicidas potenciais contra Ditylenchus dipsaci

Abstract

Fonte: Cammalleri, S. R., et al. Cultura e triagem do nematóide parasita de plantas Ditylenchus dipsaci. J. Vis. (2022).

Neste vídeo, demonstramos um ensaio de triagem para identificar a eficácia de nematicidas de moléculas pequenas contra nematóides. Os nematicidas são considerados eficazes se causarem uma diminuição no número de nematóides móveis na amostra após a exposição.

Protocol

Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE

1. Triagem in vitro de pequenas moléculas

1. Prepare as placas de ensaio seguindo as etapas abaixo.
   1. Despeje água destilada autoclavada em uma calha estéril e, usando uma pipeta multicanal, dispense 40 μL de água destilada da calha em cada poço de uma placa de fundo plano de 96 poços.
2. Prepare a ferramenta de fixação e adicione os produtos químicos.
   1. Configure bandejas de pinner (consulte a ....

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Copo de 50mL	Pyrex	CLS100050
Placa de 96 poços	Sarstedt	83,3924
papel-alumínio	Alcan Plus
escopo de dissecação	Leica	Leica MZ75
Dmso	Sigma-Aldrich	Rolamento 472301-500ML
corrediça de vidro	Magna	60-1200
Papel mata-borrão sem fiapos	V&P Scientific	VP 522-100
Ponteiras de pipeta de baixa retenção (200uL)	FORÇA DE LABORATÓRIO	1159M44
pipeta multicanal	Eppendorf research plus	3125000036
NaOH	Sigma-Aldrich	S8045-500G
parafilme	Bemis	PM-996
Soluções de limpeza de pinos	V&P Scientific	VP110A
Pinner	V&P Scientific	VP381N
Bandejas de enxágue Pinner	V&P Scientific	VP 421
reservatório de reagente com tampa para pipetas multicanal	Sigma-Aldrich	BR703459
incubadora de agitação	Científico de New Brunswick	I26