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Artigo de método
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8 de julho de 2025
Fonte: Brito-Sierra, C.A. et al., Protocolos para Testar a Toxicidade de Novos Produtos Químicos Inseticidas para Mosquitos. J. Vis. Exp. (2019).
Neste vídeo, demonstramos o ensaio de teste tópico para determinar a toxicidade de um potencial inseticida em mosquitos fêmeas adultas. Usando um antagonista do receptor de dopamina que causa inibição letal da neurotransmissão em mosquitos, este método descreve uma maneira de avaliar os efeitos tóxicos dos inseticidas na aplicação tópica.
Todos os procedimentos envolvendo modelos animais foram revisados pelo comitê institucional local de cuidados com animais e pelo conselho de revisão veterinária JoVE
1. Cultura de Mosquitos Adultos
NOTA: Cepas de mosquitos suscetíveis a inseticidas estão disponíveis no Repositório de Pesquisa e Referência de Reagentes da Malária. As cepas recomendadas são as seguintes: cepa Aedes aegypti Liverpool (LVP), cepa Anopheles gambiae Kisumu (KISUMU1) e cepa Culex quinquefasciatus Johannesburg (JHB).
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Figura 1: Cultura de mosquitos adultos. Imagem mostrando balde plástico de 20 L usado para cultura de mosquitos adultos e uso de aspirador para remoção de mosquitos.
Figura 2. Ensaio tópico adulto realizado com fêmeas de Ae.......
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| Nome | Empresa | Número de catálogo | Comentários |
|---|---|---|---|
| Cepas de mosquitos suscetíveis a inseticidas | Repositório de Referência de Pesquisa e Reagentes da Malária | https://www.beiresources.org/MR4Home.aspx; Cepas recomendadas: cepa de Aedes aegypti Liverpool (LVP), cepa de Anopheles gambiae Kisumu (KISUMU1) e cepa de Culex quinquefasciatus Johannesburg (JHB) | |
| acetona | Mallinckrodt Química | CAS 67-64-1 | Uso para diluições e controle |
| amitriptilina | Sigma-Aldrich | CAS: 549-18-8 | Pode ser diluído em acetona |
| Bifentrina | Sigma-Aldrich | CAS: 51529-01-2 | Piretorídeo sintético utilizado como controlo positivo |
| Micro-aplicador | Burkard Manufacturing Co. | - | Ferramenta necessária para experimentos de aplicação tópica |
| Placa de cultura de células de 24 poços com tampa | Corning Incorporada | 3526 | - |
| Vantagem elásticos | Aliança Rubber Co. | - | Usado para selar os copos de papel |
| Seringa de vidro (1 ml) | Becton Dickinson e Cia. | 512004 | Necessário para as micro-aplicações. O vidro é melhor que o plástico |
| Frascos de cintilação descartáveis (20 ml) | Fisher Científico | Rolamento 74505-20 | Os frascos de vidro evitam a evaporação |
| Tecido de tule, branco | Walmart | - | - |
| Copos de papel | Dixie Produtos de Consumo LLC. | PF15675/13D | Usado para manter mosquitos adultos em ensaios tópicos para adultos |
| Placas de Petri (150 mm) | Ciências da Vida da Corning | - | Usado para manter os mosquitos "dormindo" no frio sem contato direto com o gelo |
| Pipetas de transferência | Fisher Científico | 13-711-7M | Usado para classificar larvas |
| Microscópio estéreo | Olimpo | SZ6045 | Usado para pontuar ensaios larvais e realizar microaplicações |
| Pinças (finas) | Fontax | - | Usado para lidar com mosquitos adultos |
