Análise baseada em impedância celular para monitoramento de processos celulares em tempo real

Resumo

Fonte: Labadie, T., et al., Monitorando a sobrevivência do vírus influenza fora do hospedeiro usando análise celular em tempo real. J. Vis. Exp. (2021)

Neste vídeo, demonstramos o processo de monitoramento em tempo real de eventos celulares, incluindo a proliferação de células aderentes, por meio de um ensaio de impedância celular. Aqui, as células aderentes atuam como isolantes, restringindo o fluxo de corrente entre os eletrodos e aumentando a impedância.

Protocolo

NOTA: Durante todos os experimentos, mantenha as placas em superfícies não eletrostáticas o tempo todo, como os envoltórios de papel da embalagem. Siga a seção 1 abaixo para determinar a concentração mais apropriada de células a serem semeadas na placa de microtitulação eletrônica (projetada como E-Plate).

1. Determinação da quantidade celular apropriada para células infectantes

1. Preparar células MDCK (Madin-Darby Canine Rim) em frascos de 75 cm² para obter células recém-divididas (aproximadamente 80% de confluência) 24 h antes da experiência.
2. Lave as células com 5 mL de 1x PBS e desconecte-a....

Materiais

Lista de materiais utilizados neste artigo

Nome	Empresa	Número de catálogo	Comentários
Placa E 16 (6 placas)	ACEA Biosciences, Inc	5469830001	As placas eletrônicas estão disponíveis em embalagens diferentes
PBS 1X	Tecnologias de vida (gibco)	14040091
TPCK-tripsina	Worthington	LS003740
Instrumento de Análise Celular em Tempo Real xCELLigence S16	ACEA Biosciences, Inc	380601310	Os instrumentos xCELLigence RTCA S16 estão disponíveis em diferentes formatos (16 poços, 96 poços, placa simples ou múltipla)
Balão de cultura de tecidos de 75 cm2	falcão	Rolamento 430641U
MEM 1X	Tecnologias de vida (gibco)	31095029